Genom a proteom aneb cesta do základů života
Vypracovala: Markéta Fialová
T-exkurzePraktická část se konala 13. 12. 2012 v Univerzitním kampusu Bohunice.Před ní jsme se však připravovali v teoretické části, ve které jsme se seznámili s principy práce s DNA a proteiny.
„Zviditelnění“ makromolekul DNA
Pozorování tkáňových kultur pod mikroskopem.
Izolace a promytí buněk:
Izolace buněk
Přidání fyziologického roztoku, centrifugace:
Lýze buněk a odstranění bílkovin a tuků:
Míchání vzorku:
Shluk vláken DNA:po asi 20 min vyplave na hladinu
DETEKCE PROTEINŮ
SDS polyakrylamidová elektroforéza(PAGE)
Proteiny putují od záporné elektrody ke kladné a rozdělují se podle hmotnosti.
PAGE-gel jsme vyjmuli a nabarvili tzv. Coomassie barvením
Na obarveném gelu vidíme modré proužky proteinů vyskytujících se ve vzorku.
Závěr:Na této T-exkurzi jsme si užili opravdu hodně pipetování a jiných technik. Společnými silami se nám i vše podařilo.Díky této zkušenosti jsem se začala více zajímat o obor molekulární biologie a biochemie. Za příjemný den děkuji oběma lektorkám.