Nejlep je prevence,

vymtme infekn pvodce.

Pravda !!!

Totln nesmysl !!!

Patogen Podmnn pat. Bn fl.

* Sands KE et al. JAMA. 1997;278:234-40; Based on data for septicemia. Murphy SL. National Vital Statistics Reports. Angus DC et al. Crit Care Med. 2001; reflects hospital-wide cases of severe sepsis as defined by infection in the presence of organ failure.

Vedouc pina morbidity a mortality ve svt

vedouc pina smrti na nekoronrnch JIP (USA)* jedenct pina smrti (USA)

ron je v USA vce ne 750,000 ppad tk sepse

v USA, umr denn vce ne 500 pacient na tkou sepsi

SepseSepse

Zkladn princip

kultivace odebran krve v ndob s vhodnou kult. pdou

pomnoen bakteri ptomnch v krvi

vyokovn na pevn kultivan pdy a mikroskopick prep.

identifikace patogena

stanoven citlivosti na ATB

sloit biofilm- symbiza bakteri, as, sinic

a dalch organism- rst ve vodnm prosted

povrchy kamen ve vodnch tocch,dno v rybncch apod.

- sloit struktura- uchovvn vlastnost uvnit biofilmu

= ivotn podmnky- mlo prozkouman

jednoduch biofilm- bakterie osdlujc cizorod povrchy- podstatn jednodu struktura- vce znalost pedmt intenzivnho

vzkumu

planktonicky rostouc bb =voln v tekutm prosted

1. pichycen bunk k povrchu

2. vznik mikrokolonie

3. vytvoen biolfilmu produkce4. exopolysacharidu

5. uvolnn bunk z biofilmu

Watnick P, Kolter R. Biofilm, city of microbesJournal of Bacteriology,y 2000; 182(10): 2675-2679,

biofilm V.cholerae

Watnick P, Kolter R. Biofilm, city of microbesJournal of Bacteriology,y 2000; 182(10): 2675-2679,

- houbovit struktury biofilmu

tvorba biofilmu P. aeruginosa

Quorum = nejmen nutn poet hlas (v parlamentu)

Xu L, Li H,Vuong C et al. Role of the luxS Quorum-Sensing System in Biofilm Formation and Virulence of Staphylococcus epidermidis . Infect Imun. 2006 Jan;74(1):488-96.

funkce quorum sensing systm

feromon

Odblokovn RNA

...agr, luxS, ica...

adheziny

extracelul.produkty(hemolyziny,toxiny,feromony..)

autolysinE - adheze bunk na povrchy

PIA - polysacharidovintercelulrn adhezinvazba bunk na sebe

delta toxin - represe tvorby PIA

QS systm agr

QS systm luxS

Typ mikroorganizmu Poet celkem Producenti biofilmu

koagulza neg. stafylokoky

S. epidermidis

69 (60,5 %)23 (20,1 %)

39 (56,5 %)19 (82,6 %)

S. aureus 13 (11,4 %) 2 (15,4 %)

Enterococcus sp. 9 (7,9 %) 6 (66,7 %)

enterobakterie celk.K. pneumoniae

18 (15,8 %)6 (5,3 %)

3 (16,7 %)3 (50 %)

Neferm. tyky 8 (7 %) 4 (50 %)

Candida sp. 3 (2,6 %) 0

3050

Syntza b.stny: beta-laktamy,vankomycin,bacitracin,INH,ethambutol,ethionamid DNA replikace

chinolonymetronidazol

RNAsyntzarifampicin

Syntza protein 30S rib. 50S rib.aminoglykosidy makrolidy

tetracykliny chloramfenikol,klindamycin, linkomycin

Bu.membrnakolistinantimykotika

AntimetabolitysulfonamidytrimetoprimPAS

PBPpenicillin-binding protein

Beta-laktam. ATB

spot eba makrolid

0

0,5

1

1,5

2

2,5

89 91 92 93 94 95 96 97 98 99 00

DD

D/1

000/

den

0

2

4

6

8

10

12

14

16

96 97 98 99 200

rezi

sten

ce (

%)

S.pyogenes - ERY - R

S.pneumoniae - ERY - R

Methicillin resistance in Staphylococcus aureus

In-Patients

Total isolates

% MR

60 -

55 -

50 -

45 -

40 -

35 -

30 -

25 -

20 -

15 -

10 -

5 -

0 -

- 5000

- 4500

- 4000 - 3500

- 3000

- 2500

- 2000

- 1500

- 1000

- 500

-

1984 1986 1988 1990 1992 1994 1996 1998 2000

1983 1985 1987 1989 1991 1993 1995 1997 1999

% n

Isolates of the same speciesfrom the same pat ient within365 days were consideredduplicates (and excludedfrom the analysis) unlessthe susceptibility patternwas dif ferent.

G.French, GUYs & S.Hospital, London

Antibiotika a chemoterapeutika G-

2. Zmnaclovhoreceptoru

3. Produkceinaktivanchenzym

1. Nepropustnost

4. Eflux ATB - aktivn vyluovn

1. Nepropustnost - glykopeptidy, aminoglykosidy, TET, CHLMF

2. Zmna clov struktury - makrolidy, linkosamidy, aminoglykosidy

3. Produkce inaktivanch enzym - tm u vech ATB,

chromosomln

extrachromosomln = R plasmidy, transposomy

4. Eflux - aktivn vylouen ATB /chinolony u Pseudomonas aeruginosa,aminogykosidy/

fenotypick adaptace x genomov zmny

vsledek

Lokalizovan nebo systmov reakce na ptomnostinfeknho pvodce nebo jeho toxinu, kter nebylaptomn nebo v inkuban dob v ase pijet do nemocnice.

Vnitn - mikrobiln flra pacienta (ke, GIT, dchac cesty..)

Vnj - jin pacienti- personl nemocnice- diagnostick a terapeutick zazen- stavebn ubytovac prostedky- strava- rostlinn a ivoin prosted

pacient

oetujc personl zevnprosted

zdravotnci komunitn penos

pacienti s vlastn bakteriln flrou

zvan Dgtk operace atd.

pacienti se statisticky prokazatelnm zlepenmstavu, peitm, uzdravenm = vsledky modern medicny

zvan Dgtk operace atd.

Princip selekce rezistentnch kmen

pacienti s vlastn bakteriln flrou

zvan Dgtk operace atd.

rezistentnbakterie

Princip selekce rezistentnch kmen

- kolonizace infekce pacienta rezistentnm kmenem- en na ostatn pacienty

zvan Dgtk operace atd.

Princip selekce rezistentnch kmen

1. Zpracovn dat - nejdleitj jsou na mikrobiologii- aktivn vyhledvn = LIS + SW pro vbr dat dle zadanch parametr

2. Informovn klinickho pracovit a nemocninhohygienika

3. Opaten hygienick (isolace, spec.reim), korekceATB politiky

4. Preventivn opaten, monitorovn prosted

5. Edukativn innost nepopulrn opatenodpor zastnnch pracovnk

Starov k Egyptsk mumie - TBC zmny,prkaz nukleovch kys. M.tuberculosis

Stedov k

Evropa - postupn promoen obyvatelstvaen a likvidace obyvatelstva ostatnchkontinentlepra

Novov kBCG vakcnapandemick postien obyvatelstva

1. Pai M et al. New tools and emerging technologies for the diagnosis of tuberculosis: Part I. Latent tuberculosis. EXPERT REVIEW OF MOLECULAR

DIAGNOSTICS 2006;6(3): 413-422.2. The WHO/IUATLD Global Project on Anti-Tuberculosis Drug Resistance Surveillance: Anti-Tuberculosis drug resistance in the

world, report number 2 Volume . Geneva; 2004:-.

3. Moore D et al. Microscopic Observation Drug Susceptibility Assay, a Rapid, Reliable Diagnostic Test for Multidrug-Resistant Tuberculosis Suitable

for Use in Resource-Poor Settings. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY 2004;42(10):44324437.

1. International Consortium on Tuberculosis.http://www2.ku.edu/~lba/Test/TB/ICTM.html

1. Zignoli M et al. Global influence of multi-drug resistant tuberculosis. JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES 2006;194(4):479-485.2. Shah NS et al. Worldwide emergence of extensively drug-resistant tuberculosis. EMERGING INFECTIOUS DISEASES 2008;13(3):380-387.3. International Consortium on Tuberculosis.http://www2.ku.edu/~lba/Test/TB/ICTM.html

MDR-TB multidrug resistant tuberculosis = rezistence na mi n. INH a RIF ze zkl. ady antitub.XDR-TB extensively drug-resistant tuberc.= rezistence na I NH, RIF + fluorochin. + min. jeden inj. lk 2. ady (AMI, KAN, CAP)TDR-TB total drug resistant tuberculosis = rezistence na o b ady

0

2

4

6

8

10

12

14

16

1989

1992

1995

1998

2001

2004

2007

CelkovprevalenceMikroskopickypozitivn

Robert Koch (1843 1910)vznamn objevy 1872 76 antrax

1882 tuberkulza1883 cholera

pedvn Nobelovy ceny (1905)za objevy tkajc se tuberkulzy

Emma,

Hedwiga

Obligtnpatogeny

M.tuberculosis komplex:M.tuberculosisM.bovis, M.bovis BCGM.africanum, M.microti, M.canetti, M. pinnipedii, M. caprae

Oportunnpatogeny

M.aviumM.intracelulareM.kansasiiM.malmonese, M.marinumM.scrofulaceum, M.szulgaiM.xenopi a dal

M.fortuitumM.chelonae

d Actinomycetales rod Mycobacterium

M.leprae

Ernst JD, TrefenoErnst JD, Trefeno--Nunez G, Banaiee N. Genomics and the evolution, pathogenesis, anNunez G, Banaiee N. Genomics and the evolution, pathogenesis, and diagnosis of tuberculosis. d diagnosis of tuberculosis. J. Clin. Invest.J. Clin. Invest.20072007 117:1738117:17381745.1745.

-- rozdrozdlnln geografickgeografick linielinie-- rozdrozdln pln penos, rezistenceenos, rezistence-- nennen horizonthorizontlnln ppenos genenos gen-- adaptace fylogenet. liniadaptace fylogenet. lini na lidskna lidsk populacepopulace

(Asie, Afrika) = p(Asie, Afrika) = penos v komunitenos v komunit napnap. v USA. v USA

TH2 TH2TH2

TH2TH2+

TH1 TH1

TH1TH1

TH1TH1

CD4-/CD8-T lymfocytyTcR

TcR

INFINFTNFTNF

Tr TrTrTH3

TH3

TH3

-IL- 4IL-10

-

B lymfocytyspecifickprotiltky

THM

aktivovan makrofgIL-10TGF

M

M X

X

NrampNramp--1 geny1 geny transportntransportnbblkoviny fagosomulkoviny fagosomu

Krejzek J. Krejzek J. KIA LF HK, 2007KIA LF HK, 2007

M

++

TH1

TH1TH1

CD4-/CD8-T lymfocytyTcR

TcR

INFINFTNFTNF

Tr

TrTr

IL- 4IL-10

-

THM

IL-10TGF

M

Krejzek J. Krejzek J. KIA LF HK, 2007KIA LF HK, 2007

CD4CD4

CD8CD8CD8CD8

CD8CD8

CD8CD8CD8CD8

CD4CD4

CD4CD4

CD4CD4

CD4CD4

CytotoxickCytotoxick reakce, destrukce tkreakce, destrukce tknn--tuberkulomtuberkulom--kalcifikacekalcifikace

CD8CD8

CD8CD8

Krejzek J. Krejzek J. KIA LF HK, KIA LF HK, 20072007

-TBC pneumonie-kavernosn TBC-milirn TBC

monka.hysteria.cz/.../images/tbc.jp2. Lf UK2. Lf UK

-mzn uzliny-ledviny-ke-kosti-hrtan, steva

SpeciSpeciSpecilnlnln kultivakultivakultivannn pppdy: LJ, Ogawa, dy: LJ, Ogawa, dy: LJ, Ogawa, ulaulaula

mnoen 1 cyklus 40 cykl

Enterobakterie 30 minut 20 hodin

M.tuberculosis 1 den 40 dn

Pozitivn mikroskopie pacient vyluuje ART (mykobakterie) = rozvinut onemocnn

Pozitivn kultivace pacient vyluuje iv mykobykterie = vysok pravdpod. TBC

genetick metodyNakultivovan kmen 100% spolehlivost.

Z odebranho klinickho vzorku

detekce iv bakterie = dg TBC onemocnn detekce NK mrtv buky falen pozitivn

nejedn se o mykobakteriln infekci falen negativn

pozitivn

negativn

ISBT laborato kraj. laborato ministerstvo zdrav.

hyg. sluba

Registr TBC kraj. ftizeolog

dohledvn kontakt

ena 75 letVelmi zachoval, thl, bez zvanch zdrav. problm.Dletrvajc kael, odebrno sputum, kultivan negativ.PCR M.tbc komplex pozitivn uzaveno jako TBC.

Vechny dal mikrobiologick vsledky negativn.

Terapie v lebn.Po terapi v podku.

6 msc v lebnpsychick trauma i pro manelaTBC nejspe nikdy nem la

sputum A sputum BDatum zpracovn 3.5.2002 3.5.2002Mikroskopie neg. neg.Pevn pdy neg. neg.MGIT 960 pozitivn pozitivn Genetika - -

M.TBC M.TBCINH R RSTM R RRIF R RPZA R REMB R R

Pacient A (V.J.)80 let, mu, HKpolymorbidn ( ICHS,OCHPN)opakovan hospitalizaceinterny, GMKopakovan vy.na TBCvdy negat.hrudn vpotek

Pacient B (J.J.)51 let, mu, vesniceopakovan vy.TRN Jinopakovan vy.na TBCvdy negat,...v minulosti TBC...

v dalm pr bhu oba pacienti opakovan negat.v etnPCR, z hlediska TBC onem. evidentn zdrvi..

Oba pacienti se pravd podobn v jeden den podrobilirozdlnm vyet enm ve FN...

Vyetovac komplexy

Vyetovac komplexy

spolen chodba+ekrnaA B

NEZNMiitelmultirezist.TBC

Mu 48 let- homeles, denn abusus- mrt na zklad prochlazen + alkohol- pitva rozvinut plicn TBC

Infikoval sv kamardy? ANOOnemocn jeho kamardi? NE...natst nebyl nikdo vyetovn modernmi kultivanmimetodami ani genetickymsto po Bohouovi obsazeno !!!

KONSTRUKCEVedro dm si pivo dostanu kael sputum na BK +genetika a je to v.

ddkuji za pozornostkuji za pozornost