Kvalita laboratorních zvířat
Požadavky
AnLab Ltd.
KVALITA LZ
• Souhrn vlastností laboratorního zvířete který je určován vnitřními a vnějšími (environmentálními) faktory působícími v chovné populaci
INTERNÍ EXTERNÍ
• Genetické• Mikrobiální• Iatrogenní
• Fyzikální• Chemické• Makrobiologické• Mikrobiologické
KVALITA LZCharakterizace zvířat laboratorním vyšetřením
• Požadované parametry ověřuji laboratorním vyšetřením
Definované zvíře
• Opakované ověření požadovaných parametrů laboratorním vyšetřením
Standardní zvíře
Míra definovanosti a standardnosti zvířete závisí
• Rozsahu požadovaných parametrů• Kvalitě vyšetřující laboratoře a její dostupnosti• Ekonomických faktorech
Základní nepominutelné požadavkyna kvalitu laboratorních zvířat
• Genetická integrita + zdravotní stav
ZDRAVOTNÍ KONTROLAHealth Monitoring
• Retrospektivní (diagnostická)
multidisciplinární
• Prospektivní (pravidelná)
FELASA
• Recommendations for the health monitoring of mouse, rat, guinea pig and rabbit breeding colonies (November 1992)
změna
• Recommendations for the health monitoring of rodent and rabbits colonies in breeding and experimental units (June 2001)
Sestavení zdravotního programu
• Výběr mikroorganismů které budou sledovány (patogenní, oportunní, ostatní)
• Velikost vzorku,stáří vyšetřovaných zvířat
• Intervaly vyšetření
Důležité faktory pro výběr testovaných mikroorganismů
Je mikroorganismus primárním patogenem pro příslušný druh?
1. Je schopný epizooticky infikovat příslušný druh s přímým i nepřímým průkazem v signifikantní části populace?
2. Způsobí enzootická infekce klinické nebo histologické změny u signifikantní části populace?
3. Je příslušný druh primárním/preferovaným hostitelem?
Je stanoven patogenní potenciál mikroorganismu?
Kalkulace počtu zvířat na vyšetření (1)
• Předpoklady:1. obě pohlaví jsou infikována stejně2. početnost vyšetřované populace >100 zvířat3. náhodný výběr vzorků (zvířat)4. náhodný výskyt infekce v populaci
Pak je možno použít následující vzorec pro výpočet velikosti vzorku:
log 0,05 log N (N= procento neinfikovaných zvířat;
0,05=95% pravděpodobnost záchytu)
Velikost vzorku při různých hladinách pravděpodobnosti (2)
Předpokládané
% výskytu onemocnění 95% 99% 99,9%
10 29 44 66
20 14 21 31
30 10 13 20
40 6 10 14
50 5 7 10
Doporučená minimální frekvence vyšetření a velikosti vzorku pro laboratorní hlodavce a králíky
FELASA 2001
Frekvence Stáří Počet zvířat
________________________________________
Každé 3 měsíce > 8 týdnů 10 ks
Rozsah vyšetření: bakteriologie
parazitologie
patologie
virologie (serologie)
Mikrobiologická jednotkaMicrobiological unit, Self-contained microbiological entity
• Celé zvěřincové zařízení• Místnosti v různých budovách• Klasická barierová jednotka (SPF) s několika
místnostmi• Samostatná místnost• Isolátor• IVC popřípadě systém IVC
BAKTERIOLOGIE FELASA 2001 (1)
Bakterie Metoda M R Gp H Rb
Bordetella bronchiseptica Kultura ■■ ■■ ■■
Citrobacter rodentium Kultura ■■
Clostridium piliforme ELISA,Pathol ■■ ■■ ■ ■■ ■■
Corynebacterium kutscheri
Kultura ■■ ■■ ■■ ■
Chlamydia psittaci ELISA, KFR ■■
Mycoplasma spp. ELISA, Kult. ■■ ■■
Mycoplasma pulmonis ELISA, Kult. ■■ ■■
Pasteurella spp. Kultura ■■ ■■ ■■ ■■ ■■
BAKTERIOLOGIE FELASA 2001 (2)
Bakterie Metoda M R Gp H Rb
Pasteurella pneumotropica Kultura ■■ ■■ ■■ ■■
Pasteurella multocida Kultura ■■ ■■
Salmonella spp. Kultura ■■ ■■ ■■ ■■ ■■
Streptococci β-haemolyt.
(bez skupiny D)
Kultura ■■ ■■ ■■
Streptococcus pneumoniae Kultura ■■ ■■ ■■
Helicobacter spp.
(hepaticus, bilis,typhlonicus)
PCR ■ ■ ■
Streptobacillus moniliformis Kultura ■ ■■ ■■
Yersinia pseudotuberculosis Kultura ■■
MYKOLOGIE FELASA 2001
Agens Metoda M R Gp H Rb
Dermatofyta Kultura mikroskopie
■■ ■■
Pneumocystis carinii* PCR Histologie
■ ■
VIROLOGIE/SEROLOGIE FELASA 2001 (1)
Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb
Mouse hepatitis virus
Coronaviridae (RNA)
MHV ELISA
IFA■■
Rat corona virus/ Sialodacryoadenitis virus
RCV
SDA
ELISA
IFA■■
Mouse Rota virus
Reoviridae (RNA)
EDIM ELISA
IFA■■
Reovirus 3 REO3 ELISA
IFA■ ■
Rabbit Rota virus Rb ROTA
ELISA ■■
Sendai virus
Paramyxoviridae (RNA)
SEND ELISA
IFA■■ ■■ ■■ ■■
VIROLOGIE/SEROLOGIE FELASA 2001(2)
Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb
Pneumonia virus of mice PVM ELISA
IFA■■ ■■
Kilham Rat virus
Parvoviridae (DNA)
KRV ELISA
IFA■■
Toolan‘s virus H-1 H-1 ELISA
IFA■■
Minute virus of mice MVM ELISA
IFA■■
Mouse parvovirus MPV ELISA
IFA■■
Rat parvovirus RPV ELISA
IFA■■
VIROLOGIE/SEROLOGIE FELASA (3)
Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb
Theiler‘s murine encephalomyelitis virus
Picornaviridae (RNA)
GD 7
TMEV
ELISA
IFA■■
Lymphocytic choriomeningitis virus
Arenaviridae (RNA)
LCMV ELISA
IFA
■ ■■
Mouse cytomegalovirus
Herpesviridae (DNA)
MCMV ELISA
IFA■
Guinea pig cytomegalovirus
GpCMV IFA ■
Ectromelia virus
Poxviridae (DNA) ECTRO
ELISA
IFA■
VIROLOGIE/SEROLOGIE FELASA 2001 (4)
Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb
Mouse adenovirus (FL+K87)
Adenoviridae (DNA)
MAD
1+2
ELISA
IFA ■ ■
Guinea pig adenovirus GpAD ELISA
IFA■■
Hantaan virus
Bunyaviridae (RNA)
HANT ELISA
IFA■
Rabbit haemorhagic disease virus
Caliciviridae (RNA)
RHDV ELISA ■■
PARAZITOLOGIE FELASA 2001
Agens Zkr. Metoda M R Gp H Rb
Ektoparazité Ecto Mikrosk. ■■ ■■ ■■ ■■ ■■
Protozoa Mikrosk.
ELISA
PCR
■■ ■■ ■■ ■■ ■■
Červi Helm Filtrace
Flotace
Mikrosk.
■■ ■■ ■■ ■■ ■■