Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ ELISA – 2016
Kvalitativní detekce virové infekce v rostlinném materiálu
Poskytovatel zkoušení způsobilosti č. 7005 akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043
ÚKZÚZ, Národní referenční laboratoř, Oddělení mezilaboratorních porovnávacích zkoušek, Hroznová 2, 656 06 Brno
Ústřední kontrolní a zkušební ústav zemědělský Oddělení mezilaboratorních porovnávacích zkoušek
Poskytovatel zkoušení způsobilosti č.7005 akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043
Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ pro analytické laboratoře
Výsledky v roce 2016
Označení programu: MPZ ÚKZÚZ ELISA - 2016
Kvalitativní detekce virové infekce v rostlinném materiálu
Osoba autorizující výsledkové přehledy: RNDr. Jaroslava Srnková, vedoucí oddělení Datum: 3. 5. 2016 Podpis: Kontaktní údaje: RNDr. Jaroslava Srnková tel.: 543 548 220, e-mail: [email protected] ÚKZÚZ, Národní referenční laboratoř, Oddělení mezilaboratorních porovnávacích zkoušek Hroznová 2, 656 06 Brno
Obsah
Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ ELISA – kvalitativní detekce virové infekce v rostlinném materiálu (MPZ ÚKZÚZ ELISA)
Str.
1 Stručné informace o MPZ ÚKZÚZ ELISA 1
1.1 Podmínky MPZ ÚKZÚZ ELISA 1
1.2 Příprava vzorků 1
1.3 Předávání výsledků - výsledkové protokoly 2
2 Informace k MPZ ÚKZÚZ ELISA v roce 2016 3
2.1 Průvodní dopis účastníkům MPZ ÚKZÚZ ELISA 3
2.2 Rozeslané vzorky 4
2.3 Seznam zúčastněných laboratoří 4
3 Výsledky MPZ ÚKZÚZ ELISA v roce 2016 4
1
Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ – kvalitativní detekce virové infekce v rostlinném materiálu (MPZ ÚKZÚZ ELISA)
1 Stručné informace o MPZ ÚKZÚZ ELISA
1.1 Podmínky MPZ ÚKZÚZ ELISA
Náplň a organizace MPZ ÚKZÚZ vychází jednak z požadavků ČIA na akreditované poskytovatele programů zkoušení způsobilosti podle ČSN EN ISO/IEC 17043 Posuzování shody – Všeobecné požadavky na zkoušení způsobilosti a jednak z požadavků účastníků. Účelem porovnávacích zkoušek je především zajistit externí kontrolu kvality analytické laboratoře, pomoc při validaci modifikovaných postupů apod. Cílem porovnávacích zkoušek je ukázat odchylky i rozptyl při standardní práci laboratoře, proto by i vzorky mezilaboratorního porovnání měly být zpracovávány zcela standardním postupem. V rámci MPZ ÚKZÚZ ELISA na kvalitativní detekci virové infekce v rostlinném materiálu jsou od roku 2012 rozesílány lyofilizované vzorky jádrovin a peckovin. Množství vzorku (0,40 g v každé mikrozkumavce) je dostatečné pro provedení analýz. Termín pro zaslání výsledků je vždy uveden v průvodním dopise. Všechny došlé protokoly se archivují. V rámci MPZ ÚKZÚZ ELISA je zaručena úplná anonymita účastníků systémem číselného kódování. Přidělené kódové číslo je číslo laboratoře v databázi účastníků a slouží k předávání výsledků laboratoře k vyhodnocení a orientaci účastníků ve výsledkové tabulce. Pořadí laboratoří uvedených v seznamu účastníků nemá žádný vztah k přiděleným kódovým číslům. Zpracované výsledky MPZ ÚKZÚZ ELISA jsou rozesílány v pdf formátu pouze v digitální podobě a jsou předány účastníkům bez komentáře. Některé činnosti potřebné k realizaci MPZ ELISA mohou být zadány kompetentním subdodavatelům, za tyto práce odpovídá OMPZ. Konkrétně se jedná o provedení testů homogenity, subdodavatelsky zajištěných v NRL ÚKZÚZ, ve zkušební laboratoři č. 1071 akreditované ČIA. MPZ ÚKZÚZ ELISA není uveden ve výčtu programů v příloze k osvědčení o akreditaci č. 109/2013 akreditovaného subjektu č. 7005. 1.2 Příprava vzorků
Pro MPZ ÚKZÚZ ELISA byly použity listy jádrovin (jeden pozitivní vzorek na virus ApMV a jeden vzorek na tento virus negativní) a listy peckovin (dva vzorky pozitivní a jeden vzorek negativní na virus ApMV). Vzorky jádrovin dodala Ing. Jana Suchá z VŠÚO Holovousy. Ing. Věra Holleinová ze Zahradnické fakulty Mendlovy univerzity v Lednici poskytla vzorky peckovin.
2
Listy jádrovin i peckovin byly upraveny v lyofilizátoru. Bez předchozího zamražení byly listy umístěny do otevřených mikrotenových sáčků tak, aby jejich vrstva byla přibližně 1,5 cm. Teplota poliček v lyofilizátoru byla nastavena na 20°C, tlak 0,1 mBa, doba lyofilizace 24 hodin. K lyofilizaci byl použit lyofilizátor ALPHA 1. Po skončení lyofilizace byly listy zhomogenizovány v celém objemu na homogenizátoru RETCH GM 200 a následně byly provedeny testy homogenity. Po provedení testů homogenity byly vzorky rozváženy po 0,40 g do mikrozkumavek Eppendorf a takto uchovávány v mrazničce při teplotě -80o C. Před rozesláním účastníkům byly vzorky připravené v roce 2014 znovu přetestovány. Vzorky byly testovány dle JPP ÚKZÚZ [1] za použití diagnostiky Bioreba AG. Všechny negativní vzorky vykázaly negativní reakci a všechny pozitivní vzorky vykázaly pozitivní reakci na ApMV. 1.3 Předávání výsledků - výsledkové protokoly
Vzorek je označen vždy číslem vzorku a písmenem J (jádrovina) nebo P (peckovina). Po analýze vzorků je výsledkový protokol vyplněn následujícím způsobem: pozitivní nález + , negativní nález – . Při předávání výsledků prostřednictvím elektronické pošty je nezbytné zaslat organizátorovi vyplněné a naskenované výsledkové formuláře opatřené razítkem laboratoře a podpisem odpovědného pracovníka. Tyto formuláře slouží pro případné reklamace ze strany účastníka a pro účely archivace. Literatura: 1. Bartušková I., Ryšavý P., Kopotová J., Suchomelová M., Stehlíková J.: Jednotné pracovní postupy ÚKZÚZ – Stanovení rostlinných viróz metodou DAS ELISA a stanovení přítomnosti GMO metodou PCR, ÚKZÚZ, Brno 2007
3
2 Informace k MPZ ÚKZÚZ ELISA 2016 2.1 Průvodní dopis účastníkům MPZ ÚKZÚZ ELISA
4
2.2 Rozeslané vzorky Byly použity vzorky, které byly upraveny liofilizací v roce 2014. Lyofilizované vzorky byly uchovány po celou dobu v mrazničce při teplotě -80 °C. V měsíci únoru 2016 byly vzorky opětovně otestovány na pracovišti OMB Brno.
vzorek J+ jádrovina pozitivní na virus ApMV vzorek J- jádrovina negativní na virus ApMV vzorek P1+ peckovina pozitivní na virus ApMV vzorek P2+ peckovina pozitivní na virus ApMV vzorek P- peckovina negativní na virus ApMV 2.3 Seznam zúčastněných laboratoří
Chmelařský institut s.r.o., Žatec, ČR Mendelova univerzita v Brně, Zahradnická fakulta, Lednice, ČR ÚKZÚZ Brno, oddělení OMB, ČR ÚKZÚZ Olomouc, diagnostická laboratoř, referát virologie, ČR V. F. Humulus, s.r.o., Žatec, ČR Výzkumný a šlechtitelský ústav ovocnářský Holovousy s.r.o., ČR
3 Výsledky MPZ ÚKZÚZ ELISA 2016 Výsledky jsou zpracovány v tabulce č.1. Pracoviště jsou uvedena pod kódovými čísly, pod kterými se porovnání zúčastnila. V prvním řádku je vyznačen druh vzorku a přítomnost či nepřítomnost viru ApMV ve vzorku, který byl laboratoři zaslán, ve druhém řádku je zjištění laboratoře. Žádná z laboratoří neuvedla neshodný výsledek.
5
Kód
ové
čísl
ola
bora
toře
Ozn
ačen
í vz
orku
Ozn
ačen
í vz
orku
Ozn
ačen
í vz
orku
Ozn
ačen
í vz
orku
Ozn
ačen
í vz
orku
před
áno
P2+
před
áno
J+př
edán
oJ-
před
áno
P1+
před
áno
P-
nale
zeno
P+
nale
zeno
J+na
leze
noJ-
nale
zeno
P+
nale
zeno
P-
před
áno
J+př
edán
oJ-
před
áno
P2+
před
áno
P-
před
áno
P1+
nale
zeno
J+na
leze
noJ-
nale
zeno
P+
nale
zeno
P-
nale
zeno
P+
před
áno
J-př
edán
oJ+
před
áno
P-
před
áno
P1+
před
áno
P2+
nale
zeno
J-na
leze
noJ+
nale
zeno
P-
nale
zeno
P+
nale
zeno
P+
před
áno
P-
před
áno
P2+
před
áno
J-př
edán
oJ+
před
áno
P1+
nale
zeno
P-
nale
zeno
P+
nale
zeno
J-na
leze
noJ+
nale
zeno
P+
před
áno
P1+
před
áno
P-
před
áno
J+př
edán
oP
2+př
edán
oJ-
nale
zeno
P+
nale
zeno
P-
nale
zeno
J+na
leze
noP
+na
leze
noJ-
před
áno
J-př
edán
oP
1+př
edán
oP
-př
edán
oJ+
před
áno
P2+
nale
zeno
J-na
leze
noP
+na
leze
noP
-na
leze
noJ+
nale
zeno
P+
Lege
nda
vzor
ek J
+
jád
rovi
na p
oziti
vní
vzor
ek J
-
jád
rovi
na n
egat
ivní
vz
orek
P1+
pe
ckov
ina
pozi
tivní
vz
orek
P2+
pe
ckov
ina
pozi
tivní
vz
orek
P-
p
ecko
vina
neg
ativ
ní
Vzo
rek
č. 5
vz.č
.5
vz.č
.5
vz.č
.5
vz.č
.5
vz.č
.5
vz.č
.5
vz.č
.4
vz.č
.3
vz.č
.3
vz.č
.3
vz.č
.3
vz.č
.3
vz.č
.3
vz.č
.4
vz.č
.4
vz.č
.4
vz.č
.4
vz.č
.4
vz.č
.1
vz.č
.2
vz.č
.2
vz.č
.2
vz.č
.2
vz.č
.2
vz.č
.2
vz.č
.1
vz.č
.1
vz.č
.1
vz.č
.1
Tabu
lka
č.1:
Výs
ledk
ová
tabu
lka
MP
Z Ú
KZÚ
Z - E
LIS
A 2
016
Vzo
rek
č. 3
Vzo
rek
č. 2
Vzo
rek
č. 1
vz.č
.1
Vzo
rek
č. 4
01 02 03 04 05 06
Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ – ELISA Výsledky v roce 2016
Vydal : Ústřední kontrolní a zkušební ústav zemědělský v roce 2016 Odpovědný redaktor : RNDr. Jaroslava Srnková Technická spolupráce: Hana Srbová Počet stran: 5 Texty neprošly jazykovou úpravou.
