Lenka Zdražilová Dubská,

Ladislava Bačíková,

Kateřina Pilátová

Oddělení laboratorní medicíny,

Masarykův onkologický ústav, Brno

Hematologické abnormality

v mikroskopu a průtokovém cytometru

hematologické abnormality v mikroskopu a průtokovém cytometru

Automatický KO + diff.

Mikroskopie nátěru na sklo

Morfologie (např. tvar erytrocytů, přítomnost buněčných

inkluzí, struktura jádra aj.)

Přítomnost parazitů, artefaktů aj.

Flowcytometrie

Subpopulace lymfocytů (T- a B-lymfocyty, NK

buňky…)

Imunofenotyppatologických lymfocytů

Přítomnost CD34+ buněk

03/2017 preventivníprohlídka – patologiev krevním obrazu

Rodinná anamnéza: Zhoubnýnádor v rodině: matka +69letech na CLL, otec otce +52 letech ca žaludku

Kazuistika 1 muž 73 let

leukocyty:relativni lymfocytóza,

reaktivní lymfocyty, velkégranulární lymfocyty(LGL), atypické lymfocyty

erytrocyty:bez abnormalit

trombocyty: makrotrombocyty

res.: lymfocytózas atypickýmilymfocyty

Kazuistika 1 muž 56 letmorfologie

Kazuistika 1 - průtoková cytometrie záchyt B-lymfocytózy 56%

z celkových lymfocytů, B-lymfo sevyskytují ve dvou populacích:

1/ 40% normální imunofenotyp 2/ 60% abnormální CD45low+

CD19+ CD20-/low+ sIg- CD5+CD23+ CD79b- FMC7- CD38-CD10- CD200+odpovídající B-lymfoproliferaci zezralých buněk bezexprese prognosticky negativníhoznaku CD38, mírnáT-lymfopenie

res.: nový záchyt indolentní B-lymfoproliferace

ze zralých buněk typuB-CLL/SCL

Počet lymfocytů 4,73 x 10(9)/L

Počet B-lymfocytů 0,56 x 4,73 = 2,65 x 10(9)/L

Počet klonálních B-lymfocytů 0,6 x 2,65 = 1,59 x 10(9)/L

monoclonal B lymphocytosis (MBL) (B-LUS)

monoclonal B lymphocytosis (MBL) is defined as the presence of a clonal B-cell population in the peripheral blood with fewer than 5 × 109/L B-cells and no other signs of a lymphoproliferative disorder. Detection of a monoclonal B-cell population in the peripheral blood with light chain restriction Presence of a disease-specific immunophenotype Absolute B-cell count less than 5 x 109/L No other features of lymphoproliferative disorder (no lymph nodes, spleen and/or liver enlargement,

no B-symptoms, such as fever, weight loss or nighttime sweating) No autoimmune or infectious disease

CLL-like phenotype (75% of cases), in which cells are indistinguishable from that of CLL cases in that they coexpress CD5, CD19, CD23, and CD20dim, and with surface immunoglobulin (sIg) expression at low levels;

atypical CLL phenotype: CD5 and CD19 coexpression, CD20bright expression and/or CD23 negativity, light chain restriction with moderate/bright sIg expression;

non-CLL phenotype: CD5 negativity, expression of CD20, light chain restriction with moderate/bright sIg expression. In atypical forms, it is mandatory to exclude t(11;14) to rule out mantle cell lymphoma.

Monoklonální B-lymfocytóza MBL Prevalence roste s věkem. 3,5-6,7% (40-60), 5-9% nad 60 let, závislost na technice detekce; 30% u infikovaných HCV genetická predispozice, 2-7x vyšší prevalence

Low- vs high- count MBL 0,5 x 10(9)/L klonálních B-

lymfocytů Low-count MBL high-count MBL

1-2% roční riziko progrese do CLL n. SCL

1x ročně KO, LN Infekce, karcinomy

kazuistika 2 žena 76 let

2008 - Invazivní duktální karcinom vpunkční biopsii mammy, v.s. G2.;

adj. cht (AC), RT, hormonoterapie,dispenzarizace na MOÚ

od 03/2017 doporučeny dále cestoupraktického lékaře

při vyšetření krevního obrazu vMOÚ zjištěna trombocytopenie avýrazná neutropenie

dle diferenciálního rozpočtuleukocytů zjištěno podezření naakutní leukémii

leukocyty: četné blasty (36 %) v periferní krvi– středně velké, s bazofilní, ojediněle granulovanoucytoplazmou, některé s vakuolami

kazuistika 2 žena 76 letmorfologie periferní krev

Kazuistika 2 žena 76 letprůtokový cytometr

ve flowcytometrickém došetření zachycena populace cca 35 % abnormálních buněk s fenotypem CD45low+

z toho 1/3 (tedy 15% z celkového počtujaderných buněk) tvoří buňkyCD45low+CD34+CD33+CD19-CD3-CD4-CD8-CD14-CD56-HLADr-

2/3 buněk jsou pak imunofenotypu: CD45low+CD34-CD33-CD19-CD3-CD4-CD8-CD14-CD56-HLADr-

res.: dle flowcytometrie 15 % blastů vperiferní krvi odpovídajícíchimunofenotypem myeloblastům a 20 %nediferencovaných CD45low+ buněknejasného imunofenotypu

AML spojená s léčbou

WHO klasifikace

Kazuistika 3 muž 20 let

03/2017 - pacient přichází do konziliární ambulance MOÚ

výrazný algický syndrom při lymafadenopatii na krku

periferní lymfadenopatie bez splenomegalie, testes bezpatologie

kompletní odběry - FW,CRP, KO+ diff, biochemie,B2M,CRP, koagulace, HBsAg, hepatitidy včetně CMV, EBV,AFP, HCG, objednáno PET/CT

Kazuistika 3 muž 20 lethematologický analyzátor

Kazuistika 3 muž 20 letmorfologie

leukocyty: lymfocyty s výrazně reaktivní morfologií

erytrocyty: bez abnormalit

trombocyty:makrotrombocyty

res.: lymfocytózas četnými atypickýmilymfocyty reaktivníhovzhledu

kazuistika 3 muž 20 letprůtokový cytometr

lymfocytóza s abnormálními lymfocyty

zmnožení cytotoxických CD8+ T-lymfocytů

s výraznější expresí aktivačníhoznaku HLA-DR

jedná se o buňkys imunofenotypem CD3+ CD8+HLA-DR+ CD45RO- CD27+CCR7- CD56- CD16-

imunofenotypem odpovídajíaktivovaným cytotoxickým T-lymfocytům

res.: expanze cytotoxických T-lymfocytů, nález jekompatibilní s virovoureaktivací/primoinfekcínapříklad herpesviry

kazuistika 3 muž 20 let___Heterofilní protilátky (Paul-Bunnel)_______________________________________

IM-test pozitivní 1:160 arb.j. 0 - 15

OCH-test pozitivní 1:120 0 – 15

___Cytomegalovirus (CMV) - protilátky_________________________________________

CMV IgG negativní 0 - 0,9

CMV IgM negativní 0 - 0,9

___Epstein-Baarové virus (EBV) - protilátky___________________________________

EBVVCA IgG pozitivní 2,20 0 - 0,9

EBVVCA IgM pozitivní 6,50 arb.j. 0 - 0,9

EBV EBNA 1 IgG negativní arb.j. 0 - 0,9

Memo k metodám: EBVVCA IgM: Akutní primární EBV