كننده به گياهاني مهارهاامروزه انتقال ژن پروتيينكننده فيزيولوژيو توليد گياهان مقاوم بر پايه مختل
مي روشگوارش حشرات از -هاي جديد كنترل آفات. (Oppert, 2000, Oppert et al., 2000)باشد
و- اين مقاله بررسي سه آنزيم مهم آلفا آميالز، آلفابرگلو- بتا رسي كوزيداز را در روده مياني الرو كرم خراطهاي موجود در اين مقاله كه دادهاميد است. كندمي
.كمك شاياني به مديريت كنترل اين آفت را فراهم آوردو روش هامواد
جمع آوري الرو كرم خراطيشگاه هاي آلوده به خسارت كرم خراط به آزما شاخه
و پس از شكافتن شاخه الرو در حال فعاليت،هامنتقلي آلوده در هر شاخهعموماً. به ظرف تشريح منتقل شدو جداسازي روده.يك الرو فعال وجود داشت تشريح
درجه4مياني الروها درون آب مقطر سرد با دماي را الرو به كمك پنس بدن سپس قرار گرفتند، لسيوسس
و براي جدا كردن روده مياني از سيستم نگه داشته قسمت انتهايي بدن از هم باز،شي توسط پنس ديگرگوارت روده مياني بطور كامل آشكار كه در اين حالگرددميهاي هاي جدا شده در داخل ميكروتيوببافت. شودمي
قرار داده شدند ميلي ليتر آب مقطر سرد نيمحاوي ).1شكل(
هاي مختلف دستگاه گوارش الرو پروانه فري بخش-1شكل
عصاره آنزيميتهيهيك روده هاي مياني جداشده از بدن الرو توسطشدساز دستي شيشه همگنه هاي همگنه. اي همگن
و در نهايت g×16000حاصل در شرايط سانتريفوژ شدش حاصل به عنوان عصارهرونشين بهـي آنزيمي جدا و د
درجه-20هاي بعدي در دماي منظور آزمايش.سلسيوس نگهداري شد
ن فعاليت آميلوليتيكي در روده مياني تعييبا-جهت تعيين فعاليت آلفا آميالز از روش بيكربدين . (Baker J.E. 1991) اندكي تغييرات استفاده شد
1،1391، شماره43دوره ايران پزشكي دانش گياهمجله 100
ميكروليتر از عصاره آنزيمي به همراه20منظور مقداردر1 ميكروليتر سوبستراي 20 درصد نشاسته
مخلوط.دش ميكروليتر بافر ريخته80ميكروتيوب حاوي30 درجه سلسيوس به مدت37آزمايش در دماي
ميكروليتر معرف رنگي50 سپس مقدارودقيقه انكوبه به مخلوط واكنش (DNS) دي نيتروساليسيليك اسيد
ميكروتيوب حاوي مخلوط واكنش به نهايتاً.دشافزوده درجه 100 دقيقه در حمام آب جوش در دماي10مدت
ها در طول موج جذب نمونه.دشسلسيوس قرار داده Elx)مدل ريدر توسط دستگاه ميكروپليت نانومتر540هاي كنترل همزمان با نمونه. گرديدگيري اندازه(808
هاي اين تفاوت كه آنزيم در نمونهباشدتيمارها انجام تمامي.دگرديمي اضافه DNS بعد از افزودن شاهدشد3درهامونآز . تكرار انجام
گلوكوزيداز-و بتاگلوكوزيداز- فعاليت آلفاتعيين-و بتاگلوكوزيداز-هاي آلفاليت آنزيمتعيين فعاو) 1977( بر اساس روش سيگن تالر گلوكوزيداز و لووها انجام با اندكي تغيير در آن روش) 1986(همكاران
-دهد كه بيشترين فعاليـت آلفـاج نشان مي اين نتايفعاليـت آنـزيم در محـيط. آميالز در محيط قليايي است
تواند به شـرايط يدي بسيار كم است كه اين عامل مي اس اسيديته محيط روده ميـاني در بالپولكـداران كـه عمـدتاً
1،1391، شماره43دوره ايران پزشكي دانش گياهمجله 102
كـ. قليايي است هم برگردد ه فعاليـت الزم به ذكر اسـتو محيط اسـيدي آميالز در اسيديته-آلفا ي بسيار قلياييدر) به پايين6( زياد نسبتاً بسيار پايين است طوري كـه
pH 10مي40 ميزان فعاليت به زير در درصد و pHرسداز. اين فعاليت به صفر مي رسد 11 pH 3در طرف ديگر. درصد كاهش يافتـه اسـت40ميزان فعاليت به زير6تا
بــاالترين فعاليــت را از خــود بــروز دادهpH 8 در نهايتــاًهاي ما در ايـن زمينـه بـا برخـي از مطالعـات داده.است
pHبـه عنـوان مثـال. صورت گرفته قرابت نزديكي ندارد بدسـت آمـدHypothenemus hampei 5بهينـه بـراي
.(Valencia-Jimenez et al., 2000)ي يا در بررسي ديگر بهينـه pHانجـام شـد Brachynema germariكه روي
و غدد بزاقـي بـه ترتيـب بدسـت6و5براي روده مياني,Ramzi and Hosseininaveh) آمـد همچنـين .(2010pH 5.4 ــراي ــات Tribolium castaneum ب طــي مطالع
هاي كنترلي با گوارش، فهم ما را جهت طراحي سيستمءها با منشاهاي مهاركننده اين آنزيماستفاده از پروتيين
...كربوهيدرازهاي گوارشي در الرو كرم:و همكاران وطن پرست107
هاي به نظر ما بررسي.بردگياهي، به طور بالقوه باال ميو حشرات مشابه كه نحوه اين گونه براي اين حشره
. الزم استخسارت آنها مانند كرم خراط است، بسيارو چرا كه اگر حتي بخواهيم از آخرين راهكارها
ها كه همان مبارزه شيميايي با آفات است هم تاكتيكاستفاده كنيم، اجراي آنها براي اين آفات به دليل
و نحوه خسارت آنها بسيار سخت مي باشد لذا. بيولوژياستفاده از ارقام مقاوم كه در راس رسيدن به آنها
بيوشيميايي روي تغذيه آفات مي باشد بسيار هاي بررسيو فعاليت آلفا.مهم است آميالز،- در مطالعه حاضر حضور
و بتا-آلفا گلوكوزيداز را در روده مياني كرم- گلوكوزيدازو همچنين به بررسي برخي از خراط نشان داده شد
. ها پرداخته شده استخصوصيات بيوشيميايي اين آنزيماي را در جهت هاي تازهات راهاميد است اين مطالع
.كنترل سالم اين آفت فراهم آورد
REFERENCES 1. 1.Aghajari, N., Feller, G., Gerday, C.h., & Haser, R. (1998). Crystal structures of the psychrophilic α-
amylase from Alteromonas haloplanctis in its native form and complexed with an inhibitor. Protein Science, 7, 564–572.
2. Ascher, K .R. S. (1993). Nonconventional insecticidal effects of pesticides available from the Neem tree, Azadirachta indica. Archives of Insect Biochemistry and Physiology, 22, 433- 449.
3. Applebaum, S. W. & Konijn, A. M. (1965). The utilization of starch by larvae of the flour beetle, Tribolium castaneum. Journal of Nutrition, 85, 275–282.
4. Baker, J. E. (1983). Properties of amylases from midgets of larvae of Sitophilus zeamais and Sitophilus granarius. Insect Biochemistry, 13 (4), 421–428.
5. Baker, J. E. (1991) Purification and partial characterization of α-amylase allozymes from the lesser grain borer, Rhyzopertha dominica. Insect Biochemistry, 21(3), 303–313.
6. Balachowsky, A., & Mesnil L.(1935). Les insects nuisibles aux plantes cultivées. Paul Lechevalier, Paris,697 pp.
7. Breuer, M. & De Loof, A. (2000). In: Kleeberg H, Zebitz CPW, (2000). Practice oriented results on use and production of neem ingredients and pheromonesVIII. Giessen: Druk and Graphic; p. 23.
8. Buonocore, V., Poerio, E., Silano, V., & Tomasi, M. (1976). Physical and catalytic properties of α-amylase from Tenebrio molitor L. larvae. Biochemistry Journal, 153, 621–625.
9. Campos, F.A.P., Xavier-Filho, J., Silva, C.P., & Ary, M.B. ( 1989). Resolution and partial characterization of proteinases and α-amylases from midguts of larvae of the bruchid beetle Callosobruchus maculatus (F). Comparative Biochemistry and Physiology, 92, 51–57.
10. Carter D.J. (1984). Pest Lepidoptera of Europe with special reference to the British Islands (Series Entomologica). Springer, 31, 438 pp.
11. 11 .Casey Sclar, D. (1994). Neem: Mode of action of compounds present in extracts and formulations of Azadirachta indica seeds and their efficacy to pests of ornamental plants and to non-target species. Retrieved October 12, 2005 from
12. http://www.colostate.edu/Depts Entomology/Courses/en570/Papers_1994/sclar.html 13. Chen, M.S., Feng, G., Zen, K.C., Richardson, M., Valdes-Rodriguez, S., Reeck, G.R., & Kramer, K.J.
(1992). α-amylases from three species of stored grain Coleoptera and their inhibition by wheat and corn proteinaceous inhibitors. Insect Biochemistry Molecular Biology, 22 (3), 261–268.
14. Doane, W.W. (1969). Amylase variants in Drosophila melanogaster: linkage studies and characterization of enzyme extracts. Journal of Experimental Zoology. 171, 321–342
15. Gatwick J. (1992). Crop pests in the UK. p. 126–127. In: Chapman, Hall (eds) Collected Edition of MAFF Leaflets, London.
16. Ghadamyari, M., Hosseininaveh, V. & Sharifi, M. (2010). Partial biochemical characterization of α- and β-glucosidases of lesser mulberry pyralid, Glyphodes pyloalis Walker (Lep.:Pyralidae). Comptes Rendus Biologies, 333, 197–204.
17. Grossi, D.S. M., & Chrispeels, M.J. (1997). Molecular cloning of bruchid (Zabrotes subfasciatus) α-amylase cDNA and interactions of the expressed enzyme with bean amylase inhibitors. Insect Biochemistry and Molecular Biology, 27 (4), 271–281.
18. Huerta, A., Chiffelle, I., Puga, K., Azua, F. & Araya, J.E. (2010). Toxicity and repellence of aqueous and ethanolic extracts from Schinusmolle on elm leaf beetle Xanthogaleruca luteola. Crop Protection,29, 1118-1123.
20. Kanekatsu, R., (1978). Studies on further properties for an alkaline amylase in the digestive juice of the silkworm, Bombyx mori. Biocontrol Science and Technology. (Series E) 76 (9), 1–21.
21. Kutinkova, H., Andreev, R., Arnaoudov, V. (2006). The leopard moth borer, Zeuzera pyrina L. (lep.: cossidae) important pest in bulgaria. Journal of Plant Protection Research, 46(2), 111-116.
22. Lemos, F. J. A., Campos, F. A. P., Silva, C. P. & Xavier-Filho, J. (1990) Proteinases and amylases of larval midgut of Zabrotes subfasciatus reared on cowpea (Vigna unguiculata) seeds. Entomologia Experimentalis et Applicata, 56 (3), 219–227.
23. Low, N. H., Vong, V. & Spornest, P. (1986). A new enzyme, β-glucosidase, in honey. Journal of Apical Research, 25, 178-181.
24. Lystrup, J., Sacramento Tree Foundation Martin J. Fitch, City of Sacramento Department of Neighborhood Services.(1999). Implementation of integrated pest management for the Elm Leaf Beetle, Xanthogaleruca luteola (Col.: Chrysomelidae), in a large urban area (Sacramento), prepared for California Department of Pesticide Regulation.
25. MacGregor, E. A. (1993). Relationships between structure and activity in the α-amylase family of starchmetabolizing enzymes. Starch, 45, 232–237.
26. MacGregor, E.A., Janecek, S., &Svensson, B. (2001). Relationship of sequence and structure to specificity in the α-amylase family of enzymes. Biochimica et Biophysica Acta, 1546, 1–20.
27. Mendiola-Olaya, E., Valencia-Jimenez, A., Valdes-Rodrigues, S., Delano-Frier, J. & Blanco-Labra, A. (2000). Digestive amylase from the larger grain borer, Prostephanus truncates Horn. Comparative Biochemistry and Physiology B, 126, 425–433.
28. Nakonieczny, M., Michalczyk, K., & Kedziorski, A. (2006). Midgut glycosidases activities in monophagous larvae of Apollo butterfly, Parnassius apollo ssp. Frankenbergeri, Cell Biology, 329, 765–774.
29. Oppert, B. (2000). Transgenic plants expressing enzyme inhibitors and the prospects for biopesticide development. In: Koul O, Dhaliwal GS (eds) Advances in Biopesticide Research, pp.83–95. Hardwood Academic, Amsterdam
30. Oppert, B., Hartzer, K., Smith, C. M. (2000). Digestive proteinases of alfalfa weevil, Hypera postica (Gyllenhal) (Coleoptera; Curculionidae). Transactions of the Kansas Academy of Science (1903-), 103 (3/4), 99–110.
31. Pratviel-Sosa, F., Clemont, S., Percheron, F. & Chararas, C. (1986). Studies on glycosidases and glucanases in Thaumetopoea pitycocampa larvae. Part1. Purification and some properties of the a-glucosidase. Comparative Biochemistry and Physiology, 84, 77–81.
32. Podoler, H., & Applebaum, S. W. (1971). The α-amylase of the beetle Callosobruchus chinensis.Biochemistry Journal, 121, 321–325.
33. Yapi, Assoi. Y., Gnakri, D., Lamine, L., & Patrice, N. l. (2009). Purification and biochemical characterization of a specific β- glucosidase from the digestive fluid of larvae of the palm weevil, Rhynchophorus palmarum. Journal of Insect Science, 9(4), 1-13.
34. Ramzi, S., & Hosseininaveh, V., (2010). Biochemical characterization of digestive a-amylase, α-glucosidase and β-glucosidase inpistachio green stink bug, Brachynema germari Kolenati (Hem.: Pentatomidae). Journal of Asia-Pacific Entomology, 13(3), 215–219.
35. Regnault-Roger, C., Staff, V., Philogene, B., Terron, P., Vincent, C.(2004). Biopesticidas de origen vegetal. Ediciones Mundi-Prensa, Madrid.
36. Rodriguez, C., Silva, G. & Djair, V., (2003). Bases para el manejo racional de insecticidas: Insecticidas de origen vegetal. Facultad de Agronomia, Universidad de Concepcion,yFundacionpara la InnovacionAgraria, Concepcion, Chile.
37. Siegentaler, U. (1977). Eine einfache and rasche methode zur bestimmung de α-glucosidase (saccharase) in honing. Mitt. Gebiere Lebesm. Hyg, 68, 251 – 258.
38. Silva, C. P., Terra, W. R., Grossi de Sa, M. F. G., Samuels, R. I., Isejima, E. M., Bifano, T. D. et al. (2001a). Induction of digestive α-amylases inlarvae of Zabrotes subfasciatus (Col.: Bruchidae) inresponse to ingestion of common bean α-amylase inhibitor І. Journal of Insect Physiology, 47 (11), 1283–1290.
39. Strobl, S., Maskos, K., Wiegand, G., Huber, R., Gomis-Ruth, F. & Glockshuber, R. (1998). A novel strategy for inhibition of α-amylases: Yellow meal worm α-amylase in complex with Ragi bifunctional inhibitor at 2.5 Å resolution. Structure, 6, 911-921.
40. Terra, W. R., & Ferreira, C. (1994). Insect digestive enzymes: properties, compartmentalization and function. Comparative Biochemistry and Physiology B, 109, 1–62.
41. Valencia-Jimenez, A., Bustillo, A. E., Ossa, G. A. & Chrispeels, M. J. (2000). α-amylases of the coffee berry borer (Hypothenemus hampei) and their inhibition by two plant amylase inhibitors. Insect Biochemistry and Molecular Biology, 30, 207–213.
...كربوهيدرازهاي گوارشي در الرو كرم:و همكاران وطن پرست109
42. 41.Vatanparast, M., Hosseininaveh, V., (2010). Digestive amylase and pectinase activity in the larvae of alfalfa weevil Hypera postica (Col.: Curculionidae). Entomological Research, 40 (6), 328-335.
43. Zeng, F., & Cohen, A.C. (2001). Induction of elastase in a zoophagous heteropteran, Lygus hesperus,Annals of the Entomological Society of America, 94,141-156.
![] Ó [ 6¢ 6 - Ministry of Finance, Nepal · 1. ˘ ˇˆ˙ ˝ ˛˚ ( ˇ˛˜-19) # $ˆ % ˝ &ˇ' (˝ ( )˘ *)' +, -./˛ * % 01 # $ ) ˇ˝+,$ -˝ 2ˇˆ˙ 3 45 67 3˝3 %.8 9 :ˇ' 6 ˛](https://static.dokumenty.site/doc/80x56/5f5a85e1683adc329758e1ed/-6-6-ministry-of-finance-nepal-1-oe-19-.jpg)
![ROZVOJ PRAHY ANEB CO CHCEME V PRAZE POSTAVIT? · S˚˛˝˙ˆˇ˝˘ ˙ ˇ ˇ˝ ˙ V˛ ˝ˇ ˇ, ˚ ˙ ˇ ˛˝ ˙ ˆ ˛˝ˇ S ˙ • ˆ ˛˝ˇ ↓ O˛ˇ ˙ [R1] P •˙ ˝˚ € Plán](https://static.dokumenty.site/doc/80x56/5f439ca6ce88304489319fd3/rozvoj-prahy-aneb-co-chceme-v-praze-postavit-s-v.jpg)
