Využití rutinního stanovení koncentrací moderních hypotenziv metodou LC/MS/MS v léčbě i v monitorování

efektu léčby u jedinců s hypertenzí

B. Sokolová, T. Gucký, M. Branný, V. Krečman, H. Skřičíková, L. Hebká, D. Stejskal,

Hypertenze – vysoký krevní tlak

nejčastější kardiovaskulární onemocnění

diagnóza  hypertenze  je  založena  na  opakovaném  a  reprodukovatelném zjištění zvýšeného krevního tlaku

trvalá arteriální hypertenze poškozuje krevní cévy v ledvinách, v srdci a mozku, zvyšuje  incidenci  ledvinového  selhání,  ischemické choroby  srdeční,  srdečního selhání a iktu.

epidemiologické studie ukazují, že rizika poškození ledvin, srdce i mozku jsou v přímé souvislosti s mírou zvýšení krevního tlaku

konkrétní příčinu hypertenze  lze určit pouze u 10 – 15 % pacientů (stenóza renální arterie, Cushingova choroba,…)

u pacientů, u nichž se organická příčina hypertenze  zjistit nedá, hovoříme o esenciální hypertenzi  – zvýšení krevního  tlaku  bývá obvykle  způsobeno kombinací četných faktorů

genetické faktorypsychický stresfaktory prostředí a výživy (zvýšený přívod kuchyňské soli, snížený    přísun 

draslíku a vápníku)

bylo  zjištěno,  že  účinné medikamentózní snížení krevního  tlaku  zabraňuje poškození krevních cév a podstatně snižuje morbiditu a mortalitu

hypertenze  je multifaktoriální onemocnění, a proto  se k  její léčbě používajílátky s různým mechanismem účinku, které jsou rozděleny do 5 skupin 

1) Diuretika 

2) Látky blokující sympatický nervový systém  

3) Blokátory vápníkových kanálů

4) Inhibitory  angiotensin  konvertujícího  enzymu  (ACEI)  a  antagonistéangiotensinu II (AATII)

5) Vazodilatační látky

Často se k léčbě používá dvojkombinace nebo trojkombinace antihypertenziv (vyjímkou ale nejsou ani čtyři nebo pět současně užívaných antihypertenziv)

Diuretika

snižují krevní tlak tím, že snižují množství sodíku v organismupostačují zajistit  přiměřenou  farmakoterapii  při  mírné a  středně závažné

hypertenzi.při těžších hypertenzích se používají v kombinaci s dalšími antihypertenzivy

furosemid hydrochlorothiazid

chlorthalidon

Látky blokující sympatický nervový systém

Centrálně působící látky

tlumí funkci sympatického nervového systému. Přesný mechanismus účinku není dosud přesně znám.u pacientů se středně těžkou až těžkou hypertenzí

klonidin

moxonidin

rilmenidin

Látky blokující sympatický nervový systém

β‐sympatolytika

působí inhibičně na adrenergní β‐receptoryu pacientů se středně těžkou až těžkou hypertenzí

metoprolol

bisoprolol

betaxolol

carvedilol

Blokátory vápníkových kanálů

inhibují vstup vápníku do buněk hladkého svalstva artériímají rovněž antianginózní a antiarytmické účinky

amlodipin felodipin

verapamil

Inhibitory angiotensin konvertujícího enzymu (ACEI)

tyto látky inhibují enzym, který je zodpovědný za vznik angiotenzinu II (způsobuje arteriální vazokonstrikci a zvyšuje retenci sodíku)

trandolapril ramipril

perindopril

Antagonisté angiotensinu II (AATII)

působí selektivněji něž ACEImají schopnost  blokovat  účinky  angiotenzinu dokonaleji,  protože  vytvořit 

angiotenzin II mohou i jiné enzymy

telmisartan valsartan

losartan

Proč stanovovat antihypertenziva

při terapii více léčiv je častá non‐compliance pacientů

nutnost monitoringu  antihypertenziv  u  osob  s  torpidní hypertenzí,  u kterých se přikročí k terapii metodou renální denervace

metoda se může uplatnit při intoxikaci léky uvedených skupin

Příprava vzorku

50 μl séra se smíchá s 10 μl IS (klonidin‐d4, carvedilol‐d4, furosemid‐d5). vzorek se precipituje 50 μl 10% kyseliny trichloroctovécentrifugace 10 min při 10000 ot.50 μl supernatantu se přepituje do vialky5 μl se nastříkne do LC/MS/MS systému

LC/MS/MS metoda

LC – Waters 2695, MS ‐ QuatroPremierkolona: Synergy Polar (150 x 2,6 mm)MFA: 0,01 M octan amonný s 0,1% kys. mravenčí, MFB: ACNgradientový mód: 0 ‐ 7 min: 25% MFB – 90% MFB, 7‐10 min: zpět na výchozí

podmínky

ESI + , ESI‐ (furosemid, hydrochlorothiazid)

Látka Rt (min) Přechod (m/z) Mód

Metoprolol 3.89 268 → 115 pozitivní

Bisoprolol 6.04 326 → 115 pozitivní

Betaxolol 7.43 308 →115 pozitivní

Carvedilol 9.17 407 →223 pozitivní

Amlodipin 8.43 431 →234 pozitivní

Felodipin 10.22 338 →300 pozitivní

Verapamil 9.03 455 →165 pozitivní

Perindopril 6.64 369 →172 pozitivní

Trandolapril 8.58 431 →233 pozitivní

Ramipril 8.02 417 →234 pozitivní

Losartan 8.25 423 →207 pozitivní

Valsartan 8.81 436 →235 pozitivní

Telmisartan 10.00 515 →275 pozitivní

Moxonidin 3.31 242 →205 pozitivní

Rilmenidin 6.58 181 →95 pozitivní

Klonidin 4.72 230 →213 pozitivní

Furosemid 10.80 329 →204 negativní

Hydrochlorothiazid 5.14 296 → 269 negativní

Chlorthalidon 4.84 322 →240 pozitivní

Clonidin‐d4 (IS) 4.78 234 → 216 pozitivní

Carvedilol‐d4 (IS) 9.10 411 → 228 pozitivní

Furosemid‐d5 (IS) 10.87 334 → 226 negativní

Diuretika

Chlorthalidon

Centrálně působící látky

β‐sympatolytika

Amlodipin

Felodipin

Verapamil

Blokátory vápníkových kanálů

Inhibitory angiotensin konvertujícího enzymu (ACEI)

T im e2 .0 0 4 .0 0 6 .0 0 8 .0 0 1 0 .0 0 1 2 .0 0 1 4 .0 0

%

0

1 0 0

2 .0 0 4 .0 0 6 .0 0 8 .0 0 1 0 .0 0 1 2 .0 0 1 4 .0 0

%

0

1 0 0

2 .0 0 4 .0 0 6 .0 0 8 .0 0 1 0 .0 0 1 2 .0 0 1 4 .0 0

%

0

1 0 01 2 0 6 2 1 s a r ta n y_ 1 0 0 4 : M R M o f 1 C h a n n e l E S +

T IC6 .0 8 e 3

1 0 .0 0

1 2 0 7 3 0 v a ls a r ta n 1 : M R M o f 1 C h a n n e l E S + T IC

3 .0 4 e 48 .8 1

1 2 0 7 1 7 lo s a r ta n 1 1 S m (M n , 5 x 4 ) M R M o f 1 C h a n n e l E S + T IC

1 .0 2 e 38 .2 5

2 .1 6 1 4 .3 2

Losartan

Valsartan

Telmisartan

Antagonisté angiotensinu II (AATII)

Blízká budoucnost

převedení metody na nový přístroj QTRAP 4500 (Ab Sciex)stanovení dalších látek

perindoprilátramipriláttrandolaprilátspironolakton a metaboitemindapamidamilorid

Děkuji za pozornost