vyšetřenímoči
Zdravotnická škola, Hradec KrálovéStredná zdravotnícka škola, Bánská Bystrica
klinicko-biochemická diagnostika a metody stanovení
tvorba moči
funkce ledvin:
vylučování odpadních látek rozpustných ve vodě
(konečných produktů metabolizmu)
regulace chemického složení tělních tekutin,
udržování vnitřního prostředí
pomáhají udržovat acidobazickou rovnováhu
endokrinní funkce (produkce hormonu – renin)
tvorba moči
nefrony - funkční jednotky ledvin (v ledvině cca 1 mil.) skládají se z těchto částí:
Bowmanův váček: uvnitř klubko krevních kapilár, tzv. glomerulus; filtrační části nefronů, filtrují krev (plazmu) a vytvářejí primární moč (glomeruly proteče cca 1500 l krve/den, při čemž vznikne 180 l primární moči); v primární moči nejsou obsaženy bílkoviny
proximální a distální tubulus: zde se vstřebává více než 99 % primární moči, vstřebávají glukózu, aminokyseliny, ionty a voduz tubulů je moč aktivně transportována přes sběrný kanálek a ústí do ledvinové pánvičky do močového ústrojí
děje pro regulaci vnitřního prostředí: glomerulární filtrace tubulární zpětná resorpce tubulární sekrece
ledviny
schéma:
odběr moči
jednorázový odběr moči:
nejvhodnější je první ranní moč
provádí se do čisté nádobky (bez zbytků čisticích prostředků
a dalších chemikálií); nádobka je označena jménem a rodným číslem pacienta, datem a časem odběru
po omytí zevních genitálií vodou se provádí odběr středníhoproudu moči (u žen platí, že odběr by měl být proveden mimoobdobí menstruace)
moč je třeba do laboratoře dopravit do 1-2 hod. po odběru
nesmí se konzervovat ani zmrazovat
odběr moči
časový odběr moči:
sbírá se moč za určité časové období (3 h, 6 h, 12 h, 24 h)
nejprve se pacient vymočí do WC, poté sbírá moč do čistésběrné nádoby po definovaný časový úsek
naposled se do ní vymočí při konci sběrného období
konzervace moči:
chladem (4 °C, popř. zmrazení na -20 °C)HCl, thymolem, chloroformem
analýzy se vždy provádějí z dobře promíchané moči!
základní vyšetření moči
fyzikální vyšetření (barva, pěna, zápach, zákal, objem vyloučený ve sledovaném období, stanovení hustoty, pH)
chemické vyšetření
morfologické vyšetření močových elementů
mikroskopické vyšetření
mikrobiologické vyšetření
vyšetřování moči slouží jako:
screening (prevence onemocnění)
ukazatel onemocnění a jeho dynamiky
ukazatel terapie
fyzikální vyšetření moči - objem
ukazatel koncentrační a zřeďovací schopnosti ledvin
objem moči závisí:
na příjmu tekutin
objemu vyloučené vody potem, stolicí (průjmy), dýcháním
funkčním stavu ledvin
věku
normální hodnoty objemu moči:
novorozenci: 30-60ml/denně
děti: cca 700 ml/denně
dospělí: 500-2 000 ml/denně (4/5 moči ve dne, 1/5 v noci)
stanovení denního množství moči – odměrným válcem
fyzikální vyšetření moči - objem patologické stavy
polyurie: zvýšená diuréza (objem větší než 2 000 ml/denně)
vyskytuje se u nadměrného příjmu tekutin nebo látek s diuretickýmúčinkem (káva, čaj, alkohol), diabetes insipidus (žíznivka) – 10-20l/denně, tj. porucha hormonální regulace vodního hospodářství
oligurie: snížená diuréza (objem < 300-500 ml/denně)
anurie: zástava tvorby moči (objem moči < 100 ml/denně)
příčiny oligurie a anurie: horečnatá onemocnění, těžké průjmy a zvracení, záněty ledvin, otravy při poškození ledvin, u pac. v šoku
retence moči: moč se tvoří normálně, ale je bráněno jejímu odtoku – přepážka v močových cestách (ucpání - obstrukce močové trubice kamenem, tumor rekta či gynekologického ca, hypertrofie prostaty)
nykturie: zvýšená tvorba moči v noci (onemocnění ledvin, srdeční selhávání)
polakizurie: časté nucení k močení (průvodní znak zánětů či nádorů)
způsobena žlutými pigmenty – urochromy (bilirubin, urobilin)
závisí na množství vyloučené moči
přítomnosti barevných pigmentů z potravy
přítomnosti léků či patologických součástí moči
příčina jaterních či ledvinových onemocnění
normální barva: světle žlutá až zlatě žlutá
hodnocení moči: barva posuzována v čerstvé moči, zjišťuje se, zda se zbarvení vyskytuje ihned po vymočení, nebo až stáním
fyzikální vyšetření moči - barva
fyzikální vyšetření moči - barva
léky obsahující methylenovou modř, porucha metabolizmu tryptofanu
léky obsahující methylenovou modř, porucha metabolizmu tryptofanumodrozelená, modrámodrozelená, modrá
po organických rozpouštědlechpo organických rozpouštědlechzelenázelená
hemoglobinurie, myoglobinurie, hematurie, ery,rostlinná barviva (borůvky, červená řepa)
hemoglobinurie, myoglobinurie, hematurie, ery,rostlinná barviva (borůvky, červená řepa)červená, červenohnědáčervená, červenohnědá
oxidace melanogenu na melanin (vylučován při melanomu)oxidace melanogenu na melanin (vylučován při melanomu)tmavne na vzduchutmavne na vzduchu
urologický čaj, alkaptonurie (kyselina homogentisová), taninurologický čaj, alkaptonurie (kyselina homogentisová), taninhnědne až černá stánímhnědne až černá stáním
bilirubin, methemoglobin, melanin, kresolbilirubin, methemoglobin, melanin, kresolhnědá (barva černého piva)hnědá (barva černého piva)
bilirubinuriebilirubinurietmavě žlutá až hnědátmavě žlutá až hnědá
požití analgetik (antipyrin, aminopyrin)požití analgetik (antipyrin, aminopyrin)cihlová až hnědácihlová až hnědá
vitamin B2 (riboflavin), vitaminové směsi, B komplexvitamin B2 (riboflavin), vitaminové směsi, B komplexsytě žlutásytě žlutá
zvýšené množství urátů a kyseliny močovézvýšené množství urátů a kyseliny močovéoranžová s cihlově červenou sraženinou
oranžová s cihlově červenou sraženinou
vitamin A, karoteny z potravyvitamin A, karoteny z potravyoranžováoranžová
nedostatek vody, zahuštění organizmunedostatek vody, zahuštění organizmužlutohnědá, hnědavážlutohnědá, hnědavá
diabetes melitus, polyuriediabetes melitus, polyurienápadně světlá až bezbarvánápadně světlá až bezbarvá
příčinapříčinabarvabarva
fyzikální vyšetření moči - barva
pěna moči v moči zdravého člověka je pěna bezbarvá a rychle se ztrácí
žlutou až žlutohnědou pěnu způsobuje bilirubin
větší množství bezbarvé pěny – moč obsahující bílkovinu nebo glukózu
zápach hodnocení: mírně zamáváme nad nádobou rukou a opatrně přičichneme
slabý zápach moči zdravého člověka způsobují organické kyseliny
vyšetřuje se pouze u čerstvé moči (starší moč má rozkladem amoniakální zápach)
závisí na složení přijaté potravy
není rozhodujícím ukazatelem diagnózy
fyzikální vyšetření moči – pěna, zápach
otravy nikotinemotravy nikotinemtabákovýtabákový
cystinuriecystinuriesirovodíksirovodík
fenylketonuriefenylketonuriemyšinamyšina
vitamin B2vitamin B2mléčná čokoládamléčná čokoláda
porucha vylučování AK - leucin, isoleucin, valinporucha vylučování AK - leucin, isoleucin, valinmaggi - polévkové kořenímaggi - polévkové koření
otravy kyanidyotravy kyanidyhořké mandlehořké mandle
bakteriurie, proteinurie, záněty močových cestbakteriurie, proteinurie, záněty močových cesthnilobný, po amoniakuhnilobný, po amoniaku
otravy terpentýnemotravy terpentýnemfialkyfialky
česnek, otravy fosforem, arzenem a teluremčesnek, otravy fosforem, arzenem a teluremčesnekovýčesnekový
otravy alkoholemotravy alkoholemalkoholovýalkoholový
ketonurie, diabetes mellitus, hladověníketonurie, diabetes mellitus, hladověníacetonovýacetonový
příčinapříčinazápachzápach
fyzikální vyšetření moči – pěna, zápach
zákal moči
čerstvá moč je čirá nebo jen velmi slabě zakalená
vlivem fosfátů, urátů a mucinových látek
zákal, který vzniká při chladnutí moči několikahodinovým
stáním, nemá patologický význam
(způsobují ho epitelie, leukocyty, hlen – usadí se v podobě
lehkého obláčku – Tammův-Horsfalův mukoprotein
– bílkoviny ovlivňující vznik válců)
vylučuje-li se zakalená moč – patologický stav
zákal se rozliší po okyselení, přídavku NaOH nebo varem,
přesněji mikroskopicky v močovém sedimentu
fyzikální vyšetření moči - zákal
fyzikální vyšetření moči - zákal
v přítomnosti tuků (odstraní se vytřepáním do směsi alkoholu a éteru 1:3)
v přítomnosti tuků (odstraní se vytřepáním do směsi alkoholu a éteru 1:3)mléčný zákalmléčný zákal
zákal neodstranitelný filtracízákal neodstranitelný filtracíbakteriebakterie
červenohnědý sedimentčervenohnědý sedimentkrevkrev
těžký hlenovitý bělavý sediment (přídavkem kyselin se rozpustí,
přídavkem NaOH a zahřátím zgelifikuje)
těžký hlenovitý bělavý sediment (přídavkem kyselin se rozpustí,
přídavkem NaOH a zahřátím zgelifikuje)hnishnis
těžký bílý sediment amorfních fosfátů (okyselením kyselinou octovou se rozpustí)těžký bílý sediment amorfních fosfátů
(okyselením kyselinou octovou se rozpustí)alkalická močalkalická moč
bílý nebo načervenalý sediment amorfních urátů (varem či přidáním NaOH mizí)
bílý nebo načervenalý sediment amorfních urátů (varem či přidáním NaOH mizí)kyselá močkyselá moč
hodnocení zákalu moči
fyzikální vyšetření moči – specifická hmotnost (hustota)
ukazatel koncentrační a ředicí schopnosti ledvin, závisí na množství rozpuštěných látek (chloridy, močovina) a na objemu vylučované kapaliny
vyjadřována bezrozměrným číslem – udává měrnou hmotnost moči k hmotnosti destilované vody, též se udává v kg.m-3, nebo v g.cm-3
normální rozmezí: 1,01-1,025
nízká hustota – chronická onemocnění ledvin
zvýšená hustota – diabetes (vlivem vyšší koncentrace glukózy), vysoký obsah bílkovin v moči
patologie
fyzikální vyšetření moči – specifická hmotnost (hustota)
urinometrem (hustoměr kalibrovaný od 1,000 do 1,060) moč se nalévá do válce tak, aby nevznikla pěna, příp. ji odstraníme pomocí filtračního papíru; dolní okraj menisku hladiny moči určuje hustotu na stupnici hustoměru
močovými proužky – test je založen na změně barvy z modrozelené na zelenožlutou nebo hnědou v závislosti na koncentraci iontových složek v moči (zóna obsahuje: dibrom-3-hydroxy-4-izopropyl-toluen-sulfoftalein)
interference: vysoká koncentrace kyseliny askorbové
osmometricky
stanovení
normální rozmezí: 5-7 jednotek, je ovlivněno potravou (rostlinná – moč alkalizuje, živočišná - acidifikuje)
patologické hodnoty: u poruch acidobazické rovnováhy, bakteriálních infekcí ledvin a močových cest
hodnocení: vždy v čerstvé nekonzervované moči (starší moč má vlivem amoniakálního rozpadu slabě alkalickou reakci)
stanovení: pH-metrem (skleněná a kalomelová elektroda) diagnostickými proužky – zóna papírku obsahuje acidobazické indikátory methylčerveň a bromthymolovou modř, reagují na koncentraci H+ změnou svého zbarvení z oranžovočerveného zbarvení (silně kyselé pH) přes žlutozelenou až k modré (silně alkalické)
fyzikální vyšetření moči - pH
vyšetřovací močové proužky
určeny pro „in vitro“ diagnostické použití
činidla jsou v suchém stavu imobilizována na reakčních ploškách a po namočení proužku do moči reagují za vzniku barevné kolorimetrické reakce, kterou je možno odečíst v předepsaném čase
screeningový test při diabetu, onemocnění jater, ledvin, žlučových a močových cest, metabolických a acidobazických poruchách
pro analýzu pH, specifické hmotnosti, glukózy, ketonů, bílkoviny, krve, nitritů, leukocytů, bilirubinu a urobilinogenu
vyhodnocovány subjektivně okem či speciálními reflexními fotometry (automatické zpracování a objektivní vyhodnocení papírkových testů)
vyšetřovací močové proužkyvýznam v ordinacích praktického lékaře
provedení testu diagnostickým proužkem: - vzorky vytemperujte na laboratorní teplotu - nedotýkejte se testovacích zón proužků- po vyjmutí požadovaného množství proužků tubu ihned dobře uzavřete - proužek ponořte krátce do moči a ihned vytáhněte, aby nedošlo k vymytí reagencií- proužek inkubujte ve vodorovné poloze - je třeba dodržet dobu odečtu u jednotlivých parametrů - při porovnání zabarveného políčka s přiloženou škálou na obalu tuby postupujte co nejrychleji (výsledky odečtené po dvou minutách mohou být zkreslené)
diagnostické proužky se skladují v dobře uzavřeném originálním balení na suchém, temném místě při teplotách pod 30 °C (ne v ledničce), neodstraňujte vysoušecí prostředek z víčka tuby; proužky nesmějí být ve vlhku, vystaveny přímému slunečnímu světlu, zvýšené teplotě a chemickým vlivům
chemické vyšetření moči
rutinně se provádí důkaz na přítomnost bílkovin
krve
glukózy
ketolátek
bilirubinu a urobilinogenu
důkazy se provádějí: diagnostickými proužky
zkumavkovými metodami
práškovými činidly
chemické vyšetření moči pomocí diagnostických proužkůje jednoduché a nenáročné
v praxi se běžně provádí v ordinacích praktických lékařů
chemické vyšetření moči v praxi
bílkovina v moči (proteinurie)
fyziologické množství bílkovindo moči se běžně dostává 0,1-0,15 g bílkovin/den (glomeruly nepropouštějí proteiny s vyšším obsahem negativněnabitých skupin - albumin-zadržen)množství větší než 0,2 g je považováno za patologické
rozdělení proteinurieprerenální proteinurie: u pacientů, kteří mají v plazmě zvýšené množství bílkovin z M <60000, patologický proces probíhá jinde než v ledvinách
renální proteinurie: doprovází poškození glomerulů, u těžkých proteinurií je složení moči podobné plazmě, při vylučování > 4 g bílkovin/ den - těžká proteinurie
postrenální proteinurie: vzniká při krvácení do vývodu močových cest, v moči najdeme všechny typy plazmat. bílkovin (s krví jde do moči i plazma)
důkaz bílkoviny v moči
zkouška kyselinou sulfosalicylovou bílkovina se působením kyseliny sulfosalicylové denaturuje = tvorba zákalu až sraženiny (dle koncentrace bílkoviny) hodnotí se intenzita zákalu z boku zkumavky
nad 4,0nad 4,044++++++++sraženinasraženina
2,0-4,02,0-4,033++++++zákal je mléčný a tvoří se v něm vločkyzákal je mléčný a tvoří se v něm vločky
0,25-2,00,25-2,022++++zákal je neprůhlednýzákal je neprůhledný
0,1-0,250,1-0,2511++zákal je průhledný a můžeme skrz něj číst podložený textzákal je průhledný a můžeme skrz něj číst podložený text
do 0,1do 0,100stopystopyopalescence hodnotitelná pouze v bočním světle proti černému pozadíopalescence hodnotitelná pouze v bočním světle proti černému pozadí
semikvant.hodnocení
g/l
semikvant.hodnocení
g/larbitrárníjednotkyarbitrárníjednotkyhodnocení zákaluhodnocení zákalu
důkaz bílkoviny v močiglykoproteiny se touto metodou nedají zjistit, nesrážejí se
Hellerova zkouška - bílkoviny se denaturují koncentrovanou kyselinou dusičnou moč okyselíme kys. octovou 30%, na konc.kys.dusičnou (1 ml) navrstvíme okyselenou moč po skle; jestliže se objeví na rozhraní bílý prstenec - pozitivní reakce na bílkovinu (zelený prstenec – přítomen bilirubin, červenohnědý prstenec – přítomnost močových barviv)
pomocí diagnostických proužků
využívá se tzv. proteinové chyby speciálních pH-indikátorů, které se při pH < 3,5 barví jasně žlutě. Kyselé pH zajišťuje pufr obsažený v indikační zóně. Při přítomnosti bílkovin reagují H+ ionty (z pufru v zóně) alkalicky a zůstávají fixovány na bílkovinu. Menší citlivost pro globuliny, paraproteiny, hemoglobin. Indikátory – terbromfenolová modř, sulfoftaleiny. Změnou pH (H+ iontů) dochází k barevné změně – mění se pH papírku: bez přítomnosti bílkoviny žlutě x přítomnost bílkovin = pozitivní reakce - vzniká barva zelená až modrá (současně se měří i pH > 8 a pozitivní bílkovina – potřeba zředit moč kys.octovou na pH = 5-6)
krev v moči (hematurie)
hematurie (výskyt krve v moči) – erytrocyturie, hemioglobinurie
fyziologicky se v moči krevní barviva nevyskytují
erytrocyturie: ery v moči, normální 2-3 ery v 1 ml moči
zánět ledvin, močové kameny, hemofilie, skorbut, ca prostaty, onemocnění močových cest, infekční a oběhové choroby (ledvinové a oběhové poruchy, ca močových cest a ledvin) při výrazných poruchách glomerulů též ↑ proteinurie
hemoglobinurie: volný hemoglobin v moči při všech stavech doprovázených intravaskulárním rozpadem erytrocytů (anemie, popáleniny, námaha, otrava houbami či inkompatibilita při transfuzích)
krev v moči (hematurie)
chemicky nelze rozeznat od erytrocyturie (vyšetřením sedimentu)
hematurie: mikroskopická (skrytá, okultní)
– nezjistitelná pouhým okem
makroskopická
– růžová až červená moč, přítomnost zákalu
podle příčin se hematurie dělí na: prerenální (vždy hemoglobinurie)
- otravy, sepse, zvýšená hemolýza
renální – úrazy, nádory
postrenální – kameny, zánět
krev v moči (hematurie)
důkaz krve v moči: diagnostické proužky – krevní barvivo
princip metody: zóna obsahuje organický hydroperoxid a chromogen (o-tolidin), který za přítomnosti hemoglobinu oxiduje na modře zbarvené produkty (tzv. pseudooxidázový účinek hemoglobinu – hemoglobin katalyzuje oxidaci vhodných substrátů peroxidem vodíku obdobně jako enzym peroxidáza; tuto schopnost hemoglobin neztrácí ani po tepelné denaturaci, důkaz se má tedy provádět v převařených vzorcích, aby se vyloučila případná enzymová katalýza peroxidázami z leukocytů)
chromogen-H2chromogen-H2oxidovaná forma
chromogenuoxidovaná forma
chromogenu
specificita: ery, Hb, myoglobincitlivost: 3-5 ery/1 mlhodnocení: po 1 minutěfalešně negativní výsledky: za přítomnosti redukujících látek (vit.C) nebo urátůfalešně pozitivní výsledky: v přítomnosti Fe3+ solí, jodidů nebo stop oxid. prostředků, peroxidázy některých druhů bakterií a plísní
H2O2H2O2+peroxidáza
Hb, myoglobin 2H2O2H2O+
glukóza v moči (glykosurie)nejčastější cukr v moči, ostatní méně časté
fyziologické množství glukózy v moči: u dospělých lidí 0,72 mmol/24 (jde o glukózu, která se nestačí vstřebat v tubulech, toto množství běžnými metodami nelze zjistit)
renální (ledvinový) práh jde o koncentraci glukózy v krvi, při které tubuly nezvládají vstřebávat glukózu zpět do krve
glukóza z enterocytů je transportována glukóza-Na+ transportérem difuzí a účinkem Na+/K+ ATPázovou pumpou → do krve → glomerulární filtrace v ledvinách (v primární moči je veškerá glukóza), dále ledvinové tubuly → vstřebání zpět do krve, patologicky do moči
fyziologicky do definitivní moči 0,11-0,83 mmol/l - referenční hodnoty glykosurie (nižší hodnoty při bakteriurii)
glykosurie – vylučování glukózy močí při překročení ledvinového prahu, kapacita tubulárních buněk pro resorpci glukózy je 9-11 mmol/l v plazmě, tzv. ledvinový práh
glukóza v moči (glykosurie)
klinický význam: rozlišuje se: glykosurie, fruktosurie, laktosurie, …
vyšší koncentrace glukózy v moči:
PRERENÁLNÍ GLYKOSURIE alimentární glykosurie (přechodně po požití většího množství jednoduchých cukrů, glykemie překročí hodnotu 10 mmol/l po dobu 15 minut) diabetes mellitus
RENÁLNÍ GLYKOSURIE – ledvinový práh pro glukózu snížen pod 9 mmol/l za fyziologických hodnot glukózy v plazmě, tj. ↑ glykosurie za normální glykemie (těhotenství, porucha ledvinových tubulů)
další příčiny glykosurie: stres, acidóza, poruchy jater (cirhóza, infekční žloutenka), podání ACTH, kortikoidů,...
důkaz glukózy v moči
specifická enzymatická reakce využívá se enzymů glukózaoxidázy (GOD) a peroxidázy (POD)
glukóza je oxidována vzdušným kyslíkem za katalýzy GOD na
glukonolakton a H2O2
H2O2 oxiduje za katalýzy POD chromogenní systém (barvivo), to se projeví červeným zbarvením
redukční zkouška - Benediktova, Fehlingovaglukóza redukuje roztoky solí těžkých kovů, redukci způsobívolná aldehydická či ketonická skupina (ketonická – v blízkosti musí být primární alkoholická skupina –CH2-OH)
před reakcí nutno zjistit, zda moč neobsahuje větší množství bílkoviny (též redukují); obsahuje-li, nutno deproteinovat (odstranit varem a důkaz glukózy provádět ve filtrátu)
Benediktova zkouška: s CuSO4 (redukce Cu2+ na Cu+, vyloučení sraženiny Cu2O)
důkaz glukózy v moči
Fehlingova zkouška: Fehlingovo činidlo (roztok modré skalice s hydroxidem sodným se Seignettovou solí – vínan draselno-sodný) se uplatňuje v oxidačně-redukční reakci v činidle se redukuje Cu a substrát se oxiduje
Fehlingovo činidlo se přidá k moči, zahřívá se a kapalina se barví nejprve zeleně, nakonec se vylučuje červený oxid měďný
měď se redukuje (z +2 na +1), uhlík ve formaldehydu se formálně oxiduje
2C4H2(OH)2(COO)2KNa2C4H2(OH)2(COO)2KNa
2C4H2(OH)2(COO)2Cu2C4H2(OH)2(COO)2Cu
2CuSO4.5H2O2CuSO4.5H2O+
Na2SO4Na2SO4+ + K2SO4K2SO4 10H2O10H2O+
důkaz glukózy v moči
atomární kyslík oxiduje u proužků Glukophan a Tetraphan o-toluidin (chromogen); tyto proužky obsahují také redoxníindikátor, který prozradí přítomnost vitaminu C, který reakci brzdí
Diaphan, Pentaphan a Heptaphan mají chromogen, který sebarví v přítomnosti glukózy červenohnědě; u těchto proužkůnení redoxní indikátor, protože tato tzv. TRINDEROVA reakce není citlivá na přítomnost vitaminu C
diagnostické proužky:
glukózaglukóza O2O2+ glukózaoxidáza kyselina glukuronovákyselina glukuronová
H2OH2O+H2O2H2O2 + chromogenchromogen peroxidáza barvivobarvivo
H2O2H2O2+
žlučová barviva
žlučová barviva se vyskytují v moči:
při obstrukci žlučových cest (kamenem, nádorem)
při hepatitidě (koncentrace v krvi 20x vyšší)
vznikají odbouráváním hemoglobinu
mezi žlučová barviva zařazujeme: bilirubin urobilinogen, sterkobilinogen – tzv. Ehrlich pozitivní látky urobilin, sterkobilin – tzv. Schlesinger pozitivní látky
žlučová barviva
bilirubin konjugovaný bilirubin (přímý) vzniká v játrech konjugací s kyselinou sulfo-glukuronovou, ledvinový práh 30-34 mol/l
nekonjugovaný bilirubin (nepřímý) vzniká odbouráváním hemu, hemolytické žloutenky, do moči neproniká!
na vzduchu a světle samovolně oxiduje na biliverdin
v moči za patologických stavů pouze konjugovaný (přímý)
↑ bilirubin: obstrukční ikterus (žlučníkový kámen, ca žlučových cest) parenchymatózní ikterus (hepatitida, mononukleóza, cirhóza jater)
žlučová barvivaurobilinogen společný název pro urobilinogen + mezobilinogen + sterkobilinogen - tzv. Ehrlich pozitivní látky poskytují s aldehydickým Ehrlichovým činidlem (1,4-dimethylaminobenzaldehyd a HCl) červený komplex
katabolický produkt hemoglobinu (hemolytická anemie, poruchy funkce jater, hepatitida, cirhóza jater, tumory) vzniká v tlustém střevě bakteriální redukcí bilirubinu, většinou přeměňován v játrech referenční hodnoty: < 17 mol/l
vzorek moči nutno chránit před světlem!!!
též označován jako „pigment nemoci jater“
↑ koncentrace: virová hepatitida, cirhóza či toxické poškození jater, hemolytický ikterus a hemolytická anemie
↓ koncentrace: při uzávěru žlučových cest a při zástavě odtoku žluči (obstrukční ikterus – negativní nález)
žlučová barviva
urobilin, sterkobilin název „Schlesinger pozitivní látky“ (s octanem zinečnatým reagují za vzniku zeleně fluoreskující sloučeniny)
močí se nevylučují
vznikají v ní oxidací urobilinogenu a sterkobilinogenu
jsou přítomny ve vzorcích moči déle stojících
na vzduchu a světle
moč je tmavá a má bezbarvou pěnu
žlučová barviva - stanovení
bilirubin princip stanovení: bilirubin je oxidován za změny zbarvení
Rosinova zkouška – oxidace s alkoholovým roztokem jóduprincip: bilirubin je oxidován jódem na zelený biliverdin reakce je málo citlivá (od 200 mol/l),falešně pozitivní výsledky: po podání fenazonu či tetracyklin. atb.moč ve zkumavce se převrství přibližně 2 ml alkohol. roztoku jódu; roztok musí zůstat nad močí a vytvořit ostré rozhraní
v přítomnosti bilirubinu vznikne na styčné ploše zelený prstenec
Naumannova zkouškaprincip: bilirubin je absorbován na talek; působením Fe3+ iontů se oxiduje při pozitivní reakci na modrý bilicyanin
diagnostické proužky - bilirubin (Biliphan, Heptaphan, Ictophan) princip: testovací zóna obsahuje činidlo (diazoniovou sůl), které s bilirubinem v kyselém prostředí poskytuje růžové až karmínově červené zbarvení citlivost: test je na bilirubin specifický (citlivost 30 mol/l)
biliverdinbiliverdinbilirubinbilirubin
bilicyaninbilicyaninbilirubinbilirubin
žlučová barviva - stanoveníurobilinogen
Ehrlichova reakce reakce není specifická, reaguje i indol, skatol, léčiva (sulfonamidy)princip metody: Ehrlich pozitivní látky reagují s 1,4-dimethylaminobenzaldehydem v silně kyselém prostředí (HCl) za vzniku třešňově červeného zbarvení
za současné přítomnosti bilirubinu → zelený Ehrlich, melanogenů → červenofialové zbarvení, dusitanů → žlutá až oranžová sraženina
diagnostické proužky - urobilinogen (UbgPhan, HeptaPhan)princip metody: reakční zóna proužku obsahuje aromatickou diazonivou sůl v kyselém pufru, která reaguje s urobili- nogenem za vzniku růžového až karmínově červeného azobarviva
hodnocení: po 30 s, zbarvení vzniklé po 3 minutách falešně pozitivní! V přítomnosti bilirubinu se zóna barví žlutě a přechází do modrozelené.Citlivost: od 5 mmol/l (zachycuje i fyziologické hodnoty)
žlučová barviva - stanovení
urobilin, sterkobilin
Schlesingerova reakce:
provádí se při negativní Ehrlichově reakci nebo u starších vzorků moči
ketolátky
ketonurie – vylučování ketolátek do moči vznikají v játrech jako meziprodukt při metabolizmu lipidů - intermediární metabolity zahrnující kyselinu acetooctovou (ACA), kyselinu 3()-hydroxymáselnou (HMA) a aceton (AC)
vylučují se v poměru: AC:ACA:HMA = 0,78 : 0,2 : 0,02 tento poměr je téměř konstantní, takže stačí sledovat aceton a určí se i další
analýzy v čerstvé moči!
fyziologicky výskyt: pouze ve stopách, tj. 0,19 mmol/l
klinický význam: včasné rozpoznání metabolické dekompenzace diabetiků
ketolátky
hladovění – redukční diety, námaha
nadbytek tuků a bílkovin v potravě
diabetická ketoacidóza (ketonurie + hyperglykemie)
– vázne přeměna glukózy, potřeba energie se kryje
odbouráváním mastných kyselin, vzniká tak více ketolátek,
které organizmus nestačí zpracovat na H2O a CO2,
jejich hladina v krvi vzrůstá a vylučují se do moči (znak špatně léčeného diabetu)
horečnaté stavy, dlouhodobé zvracení a průjmy,
gravidita, pooperační stavy
příčiny ↑ koncentrace ketolátek:
ketolátky
Lestradetova zkouška
princip metody: ketolátky reagují v alkalickém prostředí s nitroprusidem sodným za vzniku červenofialového zbarvení
hodnocení: lehce narůžovělé, růžové, fialové až modrofialové ± (stopy)++ + až + + +012-3
Langeho zkouška
princip metody: nitroprusid sodný s acetonem vytváří na rozhraní s vrstvou amoniaku červenofialový prstenec
hodnocení: pozitivní výsledek – na styčné ploše vzniká purpurový prstenec
stanovení:
ketolátky
diagnostické proužky
princip metody: základem je Legalova reakce testovací zóna obsahuje nitroprusid sodný v silně alkalickém prostředí (Na2CO3) indikátor za přítomnosti změnou zbarvení z krémového přes růžovou do temně fialovéhodnocení: porovnání intenzity zbarvení po 1 minutě
citlivost: hlavně na kyselinu acetooctovou – od 0,3 mmol/l (na aceton méně citlivé, s kys. 3-hydroxymáselnou nereaguje)
falešně pozitivní výsledky: v přítomnosti kyseliny fenylpyrohroznové (u fenylketonurie), dále léčiva obsahující fenolftalein a fenolsulfoftalein
stanovení:
bakteriebakteriurie
přítomnost bakterií v moči
močové ústrojí běžně neobsahuje bakterie, jejich nález v čerstvé moči je považován za patologický
rozlišuje se:
asymptomatická – nevyskytuje se žádná klinická symptomatologie, jde o kolonizaci sliznice močových cest bez přítomnosti zánětu a invaze bakterií do sliznice
symptomatická - při přítomnosti více než 10 na 5 mikrobů/ml předpokládá se přítomnost infekce močového traktu (důvodem může být uretritida, cystitida, prostatitida nebo pyelonefritida) infekce močových cest může vést k poruše a selhání funkce ledvin
bakterie
důkaz je založen na tom, že většina bakterií přítomných v močovém ústrojí je schopná redukovat dusičnany na dusitany
dusitany reagují v kyselém prostředí s kyselinou sulfosalicy-lovou na diazoniovou sůl, která reaguje s -naftylaminem na barvivo
přítomnost indikuje významnou, především gramnegativní bakteriurii (cca nad 100 000 kultivačních colony forming units - CFU v 1 ml moči)
důkaz bakterií v moči
leukocytová esteráza
indikátor zánětu v močovém ústrojí (infekce močového systému - pyelonefritidy, pyelitidy, cystitidy)
odhaluje zvýšené množství leukocytů v moči (obvyklá hodnota je do 5 leukocytů/1l, za patologický nález se považuje >10 leu/1l)
důkaz leukocytů v moči – diagnostický proužekIndoxyl-esterázovou reakcí se stanovují téměř výhradněneutrofilní granulocyty a makrofágy
lymfocyty reakci neposkytují
leukocytová esteráza se uvolňuje z neutrofilů, štěpí estery a tvoří pyrol
pyrol reaguje s diazoniovými solemi za vzniku azobarviva
vhodně doplňuje, ale zcela nenahrazuje mikroskopické vyšetření
leukocyturie
chemické vyšetření v klinických laboratořích
v klinických laboratořích se k chemickému
vyšetření moči využívají speciální diagnostické
proužky; tyto proužky jsou poté automaticky
vyhodnocovány pomocí reflexních
spektrofotometrů
spektrofotometry provádějí kvalitativní
i kvantitativní analýzu moči a hodnoty zapisují
přímo do laboratorního informačního systému
chemické vyšetření v klinických laboratořích
vyšetření močového sedimentu
vyšetření močového sedimentu
po pozitivním chemickém vyšetření moči se provádí vyšetření močového sedimentu
močový sediment se získává centrifugací (10 minut, 500 g) a následným odsátím supernatantu (koncentrace sedimentu),
následuje Sternheimerovo barvení (Alciánová modř a Pyronin B)
– barvivo se nanese na sklíčko, vkápne se 10 l močového sedimentu tak, aby se obě kapky promíchaly, překryje se krycím sklíčkem a mikroskopuje (100x a 400x zvětšení)
vyšetření močového sedimentu
buňky - jejichž původ je v krevním oběhu a buňky pocházející z ledvin nebo z močových cest
počet erytrocytůpočet leukocytůepitelové buňky (dlaždicové, přechodné, renální)dále bakterie, kvasinky, trichomonády
válce (hyalinní, voskové…) vznikají precipitací Tammova-Horsfallova mukoproteinu (glykoprotein, který chrání povrch epitelové výstelky renálního tubulu, který může za určitých okolností v tubulu precipitovat a vytvořit tak odlitky tubulů, které se uvolňují do moči)
krystalické složky (kyselina močová, uráty, fosfáty, uhličitan vápenatý, cystin, tyrosin, leucin, cholesterol, bilirubin,…)
artefakty
v sedimentu se hodnotí:
erytrocyty
převzato z : http://www.mnof.cz/sediment/převzato z : http://www.mnof.cz/sediment/
vyšetření močového sedimentu
leukocyty
převzato z : http://www.mnof.cz/sediment/převzato z : http://www.mnof.cz/sediment/
vyšetření močového sedimentu
epitelie (dlaždicové)
převzato z : http://www.mnof.cz/sediment/převzato z : http://www.mnof.cz/sediment/
vyšetření močového sedimentu
válcegranulovanébuněčné
hyalinní voskové
převzato z : http://www.mnof.cz/sediment/převzato z : http://www.mnof.cz/sediment/
vyšetření močového sedimentu
kvantitativně
metoda stanovení – tzv. Hamburgerův sediment
počet vyloučených elementů za sekundu
biologický materiál – sbíraná moč za 3 hodiny
postup: jako vyšetření sedimentů, v Bürkerově komůrce se hodnotí počet elementů
výpočet: M = (X ∙ 1000 ∙ V) / (0,9 ∙ 10 ∙ 10 800) (M – počet elementů /s, X – počet stanovených elementů,
1000 – objem sedimentu v ul, V – objem moči za 3 hod (tj. 10 800s) v ml, 0,9 – objem Bürkerovy komůrky)
referenční hodnoty: erytrocyty < 35/s leukocyty < 70/s válce < 1/s
vyšetření močového sedimentu
en.wikipedia.org/wikien.wikipedia.org/wiki
renálnírenálníssvoskovévoskovérrpřechodnépřechodnéttdlaždicovédlaždicovédd
epitelové buňky
epitelové buňkyaaleukocytyleukocytyoohepatocytyhepatocytyeeerytrocytyerytrocytyii
hypoglykemiehypoglykemiegghyperglykémiehyperglykémiewwketonurieketonurieqqdiabetická
ketoacidózadiabetická
ketoacidózahh
Ehrlichova reakce
Ehrlichova reakcettsterkobuilinogensterkobuilinogenssurobilinogenurobilinogenff
Schlesingerova reakce
Schlesingerova reakcerr
hematuriehematurieaaerytrocyturieerytrocyturieeeglykemieglykemieuuproteinurieproteinurieyy
diagnostické proužky
diagnostické proužkyrrHellerova zkouškaHellerova zkouškattkys.sulfosalicylovákys.sulfosalicylováff
Rosinova zkouška
Rosinova zkouškabb
bílkovinabílkovinaggpHpHmmketolátkyketolátkyddbilirubinbilirubinbb
zákalzákaluuzápachzápachoobarvabarvaeeglukózaglukózaaa
glukózaglukózahhglomerulusglomerulussstubulustubuluskknefronnefronDD
návod k vyluštění tajenky pro 3+1:návod k vyluštění tajenky pro 3+1:V každém řádku jsou uvedena 4 slova (tj. 3+1). Před každým slovem je v rámečku uvedeno nějaké písmeno. 3 slova k sobě logicky patří a 1 k nim nepatří a je tudíž odlišné. Písmeno v rámečku, které je u odlišného slova se zapisuje do tajenky, která je v dolní části obrázku.
V každém řádku jsou uvedena 4 slova (tj. 3+1). Před každým slovem je v rámečku uvedeno nějaké písmeno. 3 slova k sobě logicky patří a 1 k nim nepatří a je tudíž odlišné. Písmeno v rámečku, které je u odlišného slova se zapisuje do tajenky, která je v dolní části obrázku.