Post on 15-Oct-2021
transcript
1
SROVNAacuteVACIacute PRŮŘEZOVAacute STUDIE SEacuteROPREVALENCE PROTILAacuteTEK
PROTI SARS-COV-2 V OKRESECH PIacuteSEK A STRAKONICE
1562020
2
Srovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS- CoV -2 v okresech Piacutesek a Strakonice v květnu 2020
Zadavatel studie Jihočeskyacute kraj
OIG POWER spol s r o
Spolupracujiacuteciacute instituce Laboratoře Nemocnice Strakonice as
Mikrobiologickaacute laboratoř Nemocnice Piacutesek as
Krajskaacute hygienickaacute stanice Jihočeskeacuteho kraje
Armaacuteda Českeacute republiky
HZS Jihočeskeacuteho kraje - okresů Strakonice a Piacutesek
Zaacutechrannaacute služba Jihočeskeacuteho kraje
Policie ČR - Jihočeskyacute kraj
Garanti studie PharmDr Eva Šimečkovaacute - primaacuteřka Centraacutelniacutech laboratořiacute Nemocnice Strakonice as
MUDr Věra Kůrkovaacute - primaacuteřka Mikrobiologickeacute laboratoře Nemocnice Piacutesek as
RNDr Jana Fleischmannovaacute PhD - bioanalytička Centraacutelniacutech laboratořiacute Nemocnice Strakonice
MUDr Pavel Malina PhD - leacutekař Nemocnice Piacutesek as
MUDr Michal Peliacutešek MBA - leacutekař Nemocnice Strakonice as
Doc MUDr Květoslava Kotrbovaacute PhD - Krajskaacute hygienickaacute stanice Jihočeskeacuteho kraje
RNDr Zuzana Kraacutetkaacute PhD ndash imunolog Imunologickaacute laboratoř GENNET sro Praha Centrum pro bayesovskou inferenci 4BIN
RNDr Tomaacuteš Fuumlrst PhD ndash matematik Katedra matematickeacute analyacutezy a aplikaciacute matematiky Přiacuterodovědeckaacute fakulta Univerzita Palackeacuteho v Olomouci Centrum pro bayesovskou inferenci 4BIN
MUDr Martin Kuba - OIG Power
Ciacutel studie Ciacutelem studie bylo určit prevalenci jedinců s proběhlou infekciacute koronavirem SARS-CoV-2 ve vybranyacutech skupinaacutech v okrese Piacutesek a Strakonice na zaacutekladě stanoveniacute přiacutetomnosti protilaacutetek
ČAacuteST 1 - Epidemiologickaacute situace v okresech Strakonice a Piacutesek Studie proběhla v okresech Strakonice a Piacutesek Oba okresy majiacute přibližně stejnyacute počet obyvatel ndash okres Piacutesek 71 587 a okres Strakonice 70 772 (1) Vybraacuteny byly na zaacutekladě epidemiologickeacute situace ze dne 12 dubna 2020 kdy v Piacutesku byl nejnižšiacute kumulativniacute počet osob s prokaacutezanyacutem SARS-CoV-2 virem pomociacute reverzniacute PCR (12 PCR pozitivniacutech osob 100 tisiacutec obyvatel) a ve Strakoniciacutech byl nejvyššiacute počet pozitivniacutech PCR pozitivniacutech osob v Jihočeskeacutem kraji (466 PCR pozitivniacutech osob 100 tisiacutec obyvatel) Zaacutesadniacute rozdiacutel mezi těmito okresy byl na sameacutem počaacutetku koronaviroveacute epidemie Ve Strakoniciacutech byli prvniacutemi pacienty s COVID-19 čtyři zdravotniacuteci na poliklinice (diagnostikovaacuteni byli ve dnech 14-16 3 2020) a kvůli jejich četnyacutem kontaktům došlo k nastartovaacuteniacute epidemie v tomto okrese (Graf č 1) O 11
3
dnů později (253) byli laboratorně potvrzeni prvniacute pacienti v Piacutesku V obou okresech byl největšiacute naacuterůst počtu PCR pozitivniacutech osob do konce března V dubnu a květnu byl již vyacuteskyt novyacutech přiacutepadů v obou okresech minimaacutelniacute Kumulativniacute počet PCR pozitivniacutech osob v jednotlivyacutech tyacutednech je uveden v Grafu č2 Okresy se mezi sebou lišily takeacute v zaacutevažnosti průběhu onemocněniacute U strakonickyacutech pacientů byly zaznamenaacuteny vaacutežnějšiacute klinickeacute průběhy (vyššiacute počet hospitalizaciacute horečka a dokonce i uacutemrtiacute pacienta) než v Piacutesku (Tabulka č 1) Graf č 1 - Počet nově zachycenyacutech PCR pozitivniacutech osob v okresech Strakonice a Piacutesek
Graf č 2 - Kumulativniacute počet PCR pozitivniacutech osob ve Strakoniciacutech a Piacutesku
0
5
10
15
Po
čet
oso
b
Počet nově diagnostikovanyacutechpacientů s COVID-19
PCR+ osoby Strakonice PCR+ osoby Piacutesek
4
zdroj httpsonemocneni-aktualnemzcrczcovid-19 Tabulka č 1 ndash Klinickeacute přiacuteznaky u pacientů s COVID-19 v Piacutesku a Strakoniciacutech
Klinika Piacutesek Strakonice
Uacutemrtiacute 0 1
Hospitalizace 1 8
Horečka 2 5
Lehkyacute průběh 9 18
Bez přiacuteznaků 0 2
Vyššiacute riziko infekce vedlo takeacute k tomu že bylo na Strakonicku provedeno do konce dubna viacutec PCR testů než na Piacutesecku (Graf č 3) Graf č 3 - Počet PCR vyšetřenyacutech obyvatel strakonickeacuteho a piacuteseckeacuteho okresu v laboratořiacutech nemocnic Strakonice a Piacutesek
0
10
20
30
40
Ku
mu
lp
oče
t P
CR
+Kumulativniacute počet PCR+ osob
Strakonice Piacutesek
0
100
200
300
400
500
Po
čet
oso
b
Počet osob s provedenyacutem PCR vyšetřeniacutem
Strakonice Piacutesek
5
Čaacutest 2 ndash Navrženiacute studie a metodika studie
Vyacuteběr osob v dobrovolnickeacute a profesniacute skupině Studie byla zahaacutejena v prvniacutem tyacutednu v květnu tedy šest tyacutednů od počaacutetku epidemie ve Strakoniciacutech resp pět tyacutednů od počaacutetku epidemie v Piacutesku Ve studii bylo vyšetřeno 1011 osob v okresu Strakonice a 1000 osob v okresu Piacutesek Ve Strakoniciacutech se jednalo o 143 všech obyvatel okresu V Piacutesku se jednalo o 140 všech obyvatel okresu Vyšetřovali jsme dvě skupiny osob ndash profesniacute skupinu (P) a dobrovolnickou skupinu (D) Do profesniacute skupiny byli zařazeni hasiči policisteacute řidiči v dopravniacutech službaacutech uacuteředniacuteci zdravotniacuteci zaměstnanci obchodů pracovniacuteci v sociaacutelniacutech službaacutech pracovniacuteci městskyacutech služeb uacuteředniacuteci a pracovniacuteci ve školstviacute Vyacuteběr se miacuterně lišil mezi Strakonicemi a Piacuteskem Zařazeniacute lideacute v době koronaviroveacute epidemie chodili do praacutece tedy byli exponovaniacute viroveacute naacutekaze a byl u nich předpoklad že se s virem mohli setkat infekci prodělat a tudiacutež mohou miacutet protilaacutetky Skupina dobrovolnickaacute (D) byla vybiacuteraacutena s ohledem na věkovou skladbu obyvatelstva okresů Strakonice a Piacutesek Vyacuteběr probiacutehal tak že se dobrovolniacuteci sami hlaacutesili na webovou straacutenku nemocnic a z přihlaacutešenyacutech osob byly naacutesledně vybraacuteny osoby tak aby se naplnil předem danyacute počet osob ndash mužů a žen ndash v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech Doporučeneacute počty osob v danyacutech věkovyacutech skupinaacutech jsou uvedeneacute v Tabulce č 2 Ve Strakoniciacutech bylo vyšetřeno 493 osob v profesniacute skupině (P) a 518 osob mezi dobrovolniacuteky (D) V Piacutesku bylo vyšetřeno 500 osob z profesniacute skupiny a 500 dobrovolniacuteků
Podmiacutenky zařazeniacute probandů do studie Podmiacutenkou zařazeniacute osob do studie bylo
middot věk 5-89 let middot bez akutniacutech zdravotniacutech potiacutežiacute middot bez potvrzeneacute diagnoacutezy COVID-19 metodou PCR middot trvalyacute pobyt přiacutepadně vyacutekon povolaacuteniacute v daneacutem okresu middot podepsanyacute informovanyacute souhlas se studiiacute middot vyplněniacute dotazniacuteku
Tabulka č 2 ndash Počty vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech v okresech Strakonice a Piacutesek
Strakonice dobrovolniacuteci
Piacutesek dobrovolniacuteci
5 ndash 9 let 17 15
10 ndash 19 let 40 35
20 ndash 29 let 62 49
30 ndash 39 let 77 59
40 ndash 49 let 89 98
50 ndash 59 let 76 91
60 ndash 69 let 80 74
70 ndash 79 let 53 59
80+ let 24 20
Celkem 518 500
6
Všechny osoby ktereacute byly testovaacuteny vyplnily před odběrem dotazniacutek Ten zahrnoval otaacutezky mimo jineacute na to zda v posledniacutech čtyřech měsiacuteciacutech dotyčnyacute vycestoval do zahraničiacute a do ktereacute země zda měl nějakeacute zdravotniacute potiacuteže jakeacute klinickeacute přiacuteznaky měl a kdy (ve ktereacutem měsiacuteci) je měl Data z dotazniacuteků byla zpracovaacutena do databaacuteziacute v anonymizovaneacute formě
Diagnostickeacute metody akutniacute nebo proběhleacute infekce koronavirem SARS-CoV-2
PCR test Provedeniacutem vyacutetěru nosohltanu a naacuteslednou reversniacute PCR detekciacute viru SARS-CoV-2 zjistiacuteme ktereacute osoby jsou PCR pozitivniacute tedy u kteryacutech s vysokou pravděpodobnostiacute probiacutehaacute infekce koronavirem Mezi zbylyacutemi PCR negativniacutemi osobami však nedokaacutežeme rozlišit ty ktereacute se s infekciacute ještě nesetkaly už zdraveacute osoby nebo osoby s falešně negativniacutem testem Uvaacutediacute se že reversniacute PCR je pozitivniacute u 59 ndash 782 pacientů s COVID-19 ale i tento uacutedaj zaacutevisiacute na mnoha okolnostech (2)
Stanoveniacute protilaacutetek Při stanoveniacute specifickyacutech protilaacutetek metodou ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) nebo pomociacute imunochromatografickyacutech testů (tzv rychlotestů) zaacutevisiacute interpretace vyacutesledku na tom kdy (z pohledu rozvoje onemocněniacute) byl odběr krve proveden Imunitniacute systeacutem reaguje na virovou infekci tvorbou specifickyacutech protilaacutetek Při viroveacute infekci rozlišujeme tři zaacutekladniacute typy protilaacutetek IgM IgA a IgG Každyacute z nich se maacute trochu jinou roli v potlačeniacute viroveacute infekce Jejich vyacutevoj (tzv seacuterokonverze) trvaacute 8-21 dniacute (počiacutetaacuteno od prvniacutech symptomů onemocněniacute) a neniacute proto možneacute spolehlivě detekovat protilaacutetky u osob v začaacutetku onemocněniacute (34) U většiny pacientů jsou protilaacutetky detekovatelneacute po 14 dnech Při styku s virovou infekciacute se nejprve tvořiacute IgM ktereacute byacutevajiacute detekovatelneacute už od 3 až 7 dne (23) Hned vzaacutepětiacute se tvořiacute IgA protilaacutetky ktereacute se uplatňujiacute hlavně na slizniciacutech S určityacutem zpožděniacutem přibyacutevajiacute IgG protilaacutetky Zatiacutemco IgM a IgA po proběhleacute infekci postupně klesajiacute (viz Obraacutezek č 1) IgG protilaacutetky přetrvaacutevajiacute po řadu měsiacuteců Tvorba protilaacutetek se může jedince od jedince lišit ale většina z naacutes by po proběhleacute infekci měla miacutet detekovatelneacute protilaacutetky IgM IgA a IgG pokud se imunitniacute systeacutem s virovou naacutekazou nějakyacute čas potyacutekal Imunitniacute systeacutem reaguje takeacute aktivaciacute tzv buněčneacute imunity Při niacute se aktivujiacute cytotoxickeacute Tc lymfocyty a NK buňky (67) Bohužel zatiacutem nemaacuteme k dispozici testy ktereacute by naacutem umožnily tuto druhou bojovou strategii imunitniacuteho systeacutemu proti SARS-CoV-2 detekovat Obraacutezek č 1 ndash Scheacutema počtu virovyacutech čaacutestic a kinetiky tvorby protilaacutetek při viroveacute infekci
7
Při stanovovaacuteniacute protilaacutetek anti-SARS-CoV-2 můžeme použiacutet levnějšiacute rychlotesty s menšiacute přesnostiacute nebo spolehlivějšiacute ale dražšiacute ELISA testy (5) Zatiacutemco pozitivniacute naacutelezy protilaacutetek v ideaacutelniacutem přiacutepadě znamenajiacute kontakt imunitniacuteho systeacutemu s virem negativniacute naacutelezy by měly znamenat že se osoba s virovou infekciacute dosud nesetkala nebo že u niacute dosud neproběhl vyacutevoj protilaacutetek Při niacutezkeacute prevalenci infekce v populaci je však nutneacute si uvědomit že i některeacute z pozitivniacutech vyacutesledků je projevem falešneacute pozitivity i když jsou použiteacute špičkoveacute diagnostickeacute testy
Stanoveniacute protilaacutetek IgG a IgA metodou ELISA EUROIMMUN Testovanyacutem osobaacutem byla odebraacutena žilniacute krev V seacuterech byly stanoveny protilaacutetky proti SARS-CoV-2 izotypu IgG a IgA Byla použita metoda ELISA kity firmy EUROIMMUN Specificita a senzitivita těchto testů jsou uvedeny v Tabulce č 3 uvedeneacute jsou hodnoty z naacutevodu vyacuterobce (verze 4 ze dne 7 5 2020) Vyacutesledkem testu je čiacuteselnaacute hodnota (OD ratio) kteraacute udaacutevaacute poměr množstviacute protilaacutetek ve vzorku a v kalibraacutetoru Pokud je OD ratio lt 08 pak je test negativniacute Hodnoty 08-11 znamenajiacute hraničniacute vyacutesledek Hodnoty nad 11 jsou pozitivniacute Tabulka č 3 ndash Senzitivita (podle doby od nakaženiacute) a specificita ELISA testů EUROIMMUN
Senzitivita (10-20 den)
Senzitivita gt20 dniacute
Specificita
Vyšetřeniacute IgA
917 100 924
Vyšetřeniacute IgG
750 938 996
Test IgG protilaacutetek se vyznačuje velmi vysokou specificitou (996 ) proto je doporučovaacuten pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute Pozitivniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek je považovaacuten za důkaz prodělaneacute infekce SARS-CoV-2 Hraničniacute vyacutesledek IgG je třeba posuzovat opatrně v kontextu dalšiacutech informaciacute Naopak test IgA maacute nižšiacute specificitu (924 ) a pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute se nehodiacute z důvodu vysokeacuteho rizika falešně pozitivniacutech vyacutesledků Vyacutehodou stanoveniacute IgA je vysokaacute senzitivita tedy možnost zachyceniacute všech potencionaacutelně nemocnyacutech osob Pozitivniacute vyacutesledky IgA protilaacutetek je však třeba hodnotit společně s vyacutesledky IgG Osoby ktereacute majiacute pouze pozitivniacute IgA a nemajiacute IgG protilaacutetky považujeme v našiacute studii v teacuteto chviacuteli za negativniacute ale budeme je daacutele sledovat U těchto osob jsme doplnili PCR vyšetřeniacute a tiacutem ověřili zda nejsou infekčniacute O tom zda tyto osoby infekci koronavirem SARS-CoV-2 prodělaly rozhodne až opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek v časoveacutem odstupu protože jednotliveacute typy protilaacutetek v průběhu viroveacute infekce postupně narůstajiacute některeacute z nich přetrvaacutevajiacute a jineacute postupně klesajiacute Tvorba IgA předchaacuteziacute tvorbě IgG takže můžeme předpoklaacutedat že pokud IgA souviselo s infekciacute koronavirem budou o několik dnů tyacutednů později stoupat i hladiny specifickyacutech IgG protilaacutetek (viz Obraacutezek č1)
ČAacuteST 3 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek v okresech Piacutesek a Strakonice
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Piacutesek V Piacutesku bylo celkem vyšetřeno 1 000 osob V Tabulce č 4 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 4 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Piacutesek
8
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 897 37 43
IgG hran 7 0 4
IgG pos 7 0 5
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 897 osob (897 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 12 osob (12 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami (modře) - z nich mělo 5 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky a 7 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem Tedy neměli akutniacute infekci
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 11 osob (11 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 4 osoby měly IgA pozitivniacute tedy u nich je vyššiacute riziko že prodělaly infekci 7 osob nemělo IgA protilaacutetky Jejich vyacutesledek považujeme za neprůkaznyacute zatiacutem předpoklaacutedaacuteme že infekci neprodělali U těchto osob bude s časovyacutem odstupem proveden kontrolniacute odběr s ciacutelem zjistit zda došlo ke změnaacutem hladin protilaacutetek (seacuterokonverzi)
POUZE POZITIVNIacute IgA 43 osob (43 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 37 osob (37 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG Tyto osoby pravděpodobně majiacute falešně pozitivniacute vyacutesledek vyšetřeniacute a jejich IgA protilaacutetky jsou jen svou strukturou velmi podobneacute protilaacutetkaacutem proti koronaviru Ale několik osob bude miacutet specifickeacute IgA protilaacutetky U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Strakonice Ve Strakoniciacutech bylo celkem vyšetřeno 1011 osob V Tabulce č 5 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 5 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Strakonice
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 855 77 46
IgG hran 7 1 1
IgG pos 10 3 11
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 855 osob (846 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 24 osob (237 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami z nich mělo 11 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky 3 osoby měly hraničně pozitivniacute IgA a 10 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 9 osob (089 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 1 osoba měla IgA pozitivniacute tedy je možneacute uvažovat o prodělaneacute infekci U 7 osob s negativniacutem IgA a 1 osoby s hraničniacutem IgA se kloniacuteme spiacuteše k tomu že infekci koronavirem SARS-Cov-2 neprodělaly
POUZE POZITIVNIacute IgA 46 osob (455 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 77 osob (761 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG U osob s pozitivniacutem IgA bylo provedeno PCR vyšetřeniacute U žaacutedneacute osoby nebyla detekovaacuten SARS-CoV-2 U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
9
Opakovaneacute odběry Opakovaneacute odběry plaacutenujeme proveacutest 1-2 měsiacutece po prvniacutem vyšetřeniacute U jedneacute osoby jsme již opakovanyacute odběr provedli V prvniacutem odběru bylo zjištěno pozitivniacute IgA ale IgG bylo negativniacute Ve druheacutem odběru (po měsiacuteci) jsme zjistili naacuterůst IgA a IgG ktereacute je již hraničniacute (Graf č 4) Tento konkreacutetniacute přiacuteklad potvrzuje že osoby s pozitivniacutemi IgA a s negativniacutemi nebo hraničniacutemi IgG je třeba přetestovat Neniacute možneacute je v teacuteto chviacuteli považovat za pozitivniacute ale nelze je označit ani za osoby ktereacute COVID-19 neprodělaly Většinu z nich bude možneacute zařadit do spraacutevně či falešně pozitivniacutech skupin až po druheacutem odběru
Graf č 4 ndash Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek u osoby s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG
Zaacutevěry vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek v okresech Strakonice a Piacutesek Celkovyacute přehled vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek je uveden v Tabulce č 6
1 Na Strakonicku bylo zjištěno viacutec osob s protilaacutetkami IgG proti SARS-CoV-2 než v Piacutesku (237 vs 12 ) Jednaacute se s vysokou pravděpodobnostiacute o osoby ktereacute prodělaly infekci SARS-CoV-2 Žaacutednaacute z nich již neměla v době studie virus přiacutetomnyacute
2 Hraničniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek a pozitivniacute vyacutesledek IgA byl zjištěn u jedneacute osoby na
Strakonicku (01 ) a čtyř osob na Piacutesecku (04 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
3 Pozitivniacute IgA protilaacutetky a negativniacute IgG protilaacutetky byly zjištěny u 46 osob na Strakonicku (46 ) a 43 osob na Piacutesecku (43 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
4 Ostatniacute hraničniacute vyacutesledky považujeme za spiacuteše nespecifickeacuteZcela bez protilaacutetek bylo 855 osob
na Strakonicku (8457 ) a 897 osob na Piacutesecku (897 )
5 Je pravděpodobneacute že pozitivniacutech osob tedy ještě přibude O jakyacute počet se bude celkově jednat neniacute nyniacute možneacute odhadnout Finaacutelniacute vyacutesledky budeme znaacutet po druhyacutech odběrech cca v půlce července
0
05
1
15
2
25
IgA IgG
OD
RA
TIO
Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek
652020
962020
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
2
Srovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS- CoV -2 v okresech Piacutesek a Strakonice v květnu 2020
Zadavatel studie Jihočeskyacute kraj
OIG POWER spol s r o
Spolupracujiacuteciacute instituce Laboratoře Nemocnice Strakonice as
Mikrobiologickaacute laboratoř Nemocnice Piacutesek as
Krajskaacute hygienickaacute stanice Jihočeskeacuteho kraje
Armaacuteda Českeacute republiky
HZS Jihočeskeacuteho kraje - okresů Strakonice a Piacutesek
Zaacutechrannaacute služba Jihočeskeacuteho kraje
Policie ČR - Jihočeskyacute kraj
Garanti studie PharmDr Eva Šimečkovaacute - primaacuteřka Centraacutelniacutech laboratořiacute Nemocnice Strakonice as
MUDr Věra Kůrkovaacute - primaacuteřka Mikrobiologickeacute laboratoře Nemocnice Piacutesek as
RNDr Jana Fleischmannovaacute PhD - bioanalytička Centraacutelniacutech laboratořiacute Nemocnice Strakonice
MUDr Pavel Malina PhD - leacutekař Nemocnice Piacutesek as
MUDr Michal Peliacutešek MBA - leacutekař Nemocnice Strakonice as
Doc MUDr Květoslava Kotrbovaacute PhD - Krajskaacute hygienickaacute stanice Jihočeskeacuteho kraje
RNDr Zuzana Kraacutetkaacute PhD ndash imunolog Imunologickaacute laboratoř GENNET sro Praha Centrum pro bayesovskou inferenci 4BIN
RNDr Tomaacuteš Fuumlrst PhD ndash matematik Katedra matematickeacute analyacutezy a aplikaciacute matematiky Přiacuterodovědeckaacute fakulta Univerzita Palackeacuteho v Olomouci Centrum pro bayesovskou inferenci 4BIN
MUDr Martin Kuba - OIG Power
Ciacutel studie Ciacutelem studie bylo určit prevalenci jedinců s proběhlou infekciacute koronavirem SARS-CoV-2 ve vybranyacutech skupinaacutech v okrese Piacutesek a Strakonice na zaacutekladě stanoveniacute přiacutetomnosti protilaacutetek
ČAacuteST 1 - Epidemiologickaacute situace v okresech Strakonice a Piacutesek Studie proběhla v okresech Strakonice a Piacutesek Oba okresy majiacute přibližně stejnyacute počet obyvatel ndash okres Piacutesek 71 587 a okres Strakonice 70 772 (1) Vybraacuteny byly na zaacutekladě epidemiologickeacute situace ze dne 12 dubna 2020 kdy v Piacutesku byl nejnižšiacute kumulativniacute počet osob s prokaacutezanyacutem SARS-CoV-2 virem pomociacute reverzniacute PCR (12 PCR pozitivniacutech osob 100 tisiacutec obyvatel) a ve Strakoniciacutech byl nejvyššiacute počet pozitivniacutech PCR pozitivniacutech osob v Jihočeskeacutem kraji (466 PCR pozitivniacutech osob 100 tisiacutec obyvatel) Zaacutesadniacute rozdiacutel mezi těmito okresy byl na sameacutem počaacutetku koronaviroveacute epidemie Ve Strakoniciacutech byli prvniacutemi pacienty s COVID-19 čtyři zdravotniacuteci na poliklinice (diagnostikovaacuteni byli ve dnech 14-16 3 2020) a kvůli jejich četnyacutem kontaktům došlo k nastartovaacuteniacute epidemie v tomto okrese (Graf č 1) O 11
3
dnů později (253) byli laboratorně potvrzeni prvniacute pacienti v Piacutesku V obou okresech byl největšiacute naacuterůst počtu PCR pozitivniacutech osob do konce března V dubnu a květnu byl již vyacuteskyt novyacutech přiacutepadů v obou okresech minimaacutelniacute Kumulativniacute počet PCR pozitivniacutech osob v jednotlivyacutech tyacutednech je uveden v Grafu č2 Okresy se mezi sebou lišily takeacute v zaacutevažnosti průběhu onemocněniacute U strakonickyacutech pacientů byly zaznamenaacuteny vaacutežnějšiacute klinickeacute průběhy (vyššiacute počet hospitalizaciacute horečka a dokonce i uacutemrtiacute pacienta) než v Piacutesku (Tabulka č 1) Graf č 1 - Počet nově zachycenyacutech PCR pozitivniacutech osob v okresech Strakonice a Piacutesek
Graf č 2 - Kumulativniacute počet PCR pozitivniacutech osob ve Strakoniciacutech a Piacutesku
0
5
10
15
Po
čet
oso
b
Počet nově diagnostikovanyacutechpacientů s COVID-19
PCR+ osoby Strakonice PCR+ osoby Piacutesek
4
zdroj httpsonemocneni-aktualnemzcrczcovid-19 Tabulka č 1 ndash Klinickeacute přiacuteznaky u pacientů s COVID-19 v Piacutesku a Strakoniciacutech
Klinika Piacutesek Strakonice
Uacutemrtiacute 0 1
Hospitalizace 1 8
Horečka 2 5
Lehkyacute průběh 9 18
Bez přiacuteznaků 0 2
Vyššiacute riziko infekce vedlo takeacute k tomu že bylo na Strakonicku provedeno do konce dubna viacutec PCR testů než na Piacutesecku (Graf č 3) Graf č 3 - Počet PCR vyšetřenyacutech obyvatel strakonickeacuteho a piacuteseckeacuteho okresu v laboratořiacutech nemocnic Strakonice a Piacutesek
0
10
20
30
40
Ku
mu
lp
oče
t P
CR
+Kumulativniacute počet PCR+ osob
Strakonice Piacutesek
0
100
200
300
400
500
Po
čet
oso
b
Počet osob s provedenyacutem PCR vyšetřeniacutem
Strakonice Piacutesek
5
Čaacutest 2 ndash Navrženiacute studie a metodika studie
Vyacuteběr osob v dobrovolnickeacute a profesniacute skupině Studie byla zahaacutejena v prvniacutem tyacutednu v květnu tedy šest tyacutednů od počaacutetku epidemie ve Strakoniciacutech resp pět tyacutednů od počaacutetku epidemie v Piacutesku Ve studii bylo vyšetřeno 1011 osob v okresu Strakonice a 1000 osob v okresu Piacutesek Ve Strakoniciacutech se jednalo o 143 všech obyvatel okresu V Piacutesku se jednalo o 140 všech obyvatel okresu Vyšetřovali jsme dvě skupiny osob ndash profesniacute skupinu (P) a dobrovolnickou skupinu (D) Do profesniacute skupiny byli zařazeni hasiči policisteacute řidiči v dopravniacutech službaacutech uacuteředniacuteci zdravotniacuteci zaměstnanci obchodů pracovniacuteci v sociaacutelniacutech službaacutech pracovniacuteci městskyacutech služeb uacuteředniacuteci a pracovniacuteci ve školstviacute Vyacuteběr se miacuterně lišil mezi Strakonicemi a Piacuteskem Zařazeniacute lideacute v době koronaviroveacute epidemie chodili do praacutece tedy byli exponovaniacute viroveacute naacutekaze a byl u nich předpoklad že se s virem mohli setkat infekci prodělat a tudiacutež mohou miacutet protilaacutetky Skupina dobrovolnickaacute (D) byla vybiacuteraacutena s ohledem na věkovou skladbu obyvatelstva okresů Strakonice a Piacutesek Vyacuteběr probiacutehal tak že se dobrovolniacuteci sami hlaacutesili na webovou straacutenku nemocnic a z přihlaacutešenyacutech osob byly naacutesledně vybraacuteny osoby tak aby se naplnil předem danyacute počet osob ndash mužů a žen ndash v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech Doporučeneacute počty osob v danyacutech věkovyacutech skupinaacutech jsou uvedeneacute v Tabulce č 2 Ve Strakoniciacutech bylo vyšetřeno 493 osob v profesniacute skupině (P) a 518 osob mezi dobrovolniacuteky (D) V Piacutesku bylo vyšetřeno 500 osob z profesniacute skupiny a 500 dobrovolniacuteků
Podmiacutenky zařazeniacute probandů do studie Podmiacutenkou zařazeniacute osob do studie bylo
middot věk 5-89 let middot bez akutniacutech zdravotniacutech potiacutežiacute middot bez potvrzeneacute diagnoacutezy COVID-19 metodou PCR middot trvalyacute pobyt přiacutepadně vyacutekon povolaacuteniacute v daneacutem okresu middot podepsanyacute informovanyacute souhlas se studiiacute middot vyplněniacute dotazniacuteku
Tabulka č 2 ndash Počty vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech v okresech Strakonice a Piacutesek
Strakonice dobrovolniacuteci
Piacutesek dobrovolniacuteci
5 ndash 9 let 17 15
10 ndash 19 let 40 35
20 ndash 29 let 62 49
30 ndash 39 let 77 59
40 ndash 49 let 89 98
50 ndash 59 let 76 91
60 ndash 69 let 80 74
70 ndash 79 let 53 59
80+ let 24 20
Celkem 518 500
6
Všechny osoby ktereacute byly testovaacuteny vyplnily před odběrem dotazniacutek Ten zahrnoval otaacutezky mimo jineacute na to zda v posledniacutech čtyřech měsiacuteciacutech dotyčnyacute vycestoval do zahraničiacute a do ktereacute země zda měl nějakeacute zdravotniacute potiacuteže jakeacute klinickeacute přiacuteznaky měl a kdy (ve ktereacutem měsiacuteci) je měl Data z dotazniacuteků byla zpracovaacutena do databaacuteziacute v anonymizovaneacute formě
Diagnostickeacute metody akutniacute nebo proběhleacute infekce koronavirem SARS-CoV-2
PCR test Provedeniacutem vyacutetěru nosohltanu a naacuteslednou reversniacute PCR detekciacute viru SARS-CoV-2 zjistiacuteme ktereacute osoby jsou PCR pozitivniacute tedy u kteryacutech s vysokou pravděpodobnostiacute probiacutehaacute infekce koronavirem Mezi zbylyacutemi PCR negativniacutemi osobami však nedokaacutežeme rozlišit ty ktereacute se s infekciacute ještě nesetkaly už zdraveacute osoby nebo osoby s falešně negativniacutem testem Uvaacutediacute se že reversniacute PCR je pozitivniacute u 59 ndash 782 pacientů s COVID-19 ale i tento uacutedaj zaacutevisiacute na mnoha okolnostech (2)
Stanoveniacute protilaacutetek Při stanoveniacute specifickyacutech protilaacutetek metodou ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) nebo pomociacute imunochromatografickyacutech testů (tzv rychlotestů) zaacutevisiacute interpretace vyacutesledku na tom kdy (z pohledu rozvoje onemocněniacute) byl odběr krve proveden Imunitniacute systeacutem reaguje na virovou infekci tvorbou specifickyacutech protilaacutetek Při viroveacute infekci rozlišujeme tři zaacutekladniacute typy protilaacutetek IgM IgA a IgG Každyacute z nich se maacute trochu jinou roli v potlačeniacute viroveacute infekce Jejich vyacutevoj (tzv seacuterokonverze) trvaacute 8-21 dniacute (počiacutetaacuteno od prvniacutech symptomů onemocněniacute) a neniacute proto možneacute spolehlivě detekovat protilaacutetky u osob v začaacutetku onemocněniacute (34) U většiny pacientů jsou protilaacutetky detekovatelneacute po 14 dnech Při styku s virovou infekciacute se nejprve tvořiacute IgM ktereacute byacutevajiacute detekovatelneacute už od 3 až 7 dne (23) Hned vzaacutepětiacute se tvořiacute IgA protilaacutetky ktereacute se uplatňujiacute hlavně na slizniciacutech S určityacutem zpožděniacutem přibyacutevajiacute IgG protilaacutetky Zatiacutemco IgM a IgA po proběhleacute infekci postupně klesajiacute (viz Obraacutezek č 1) IgG protilaacutetky přetrvaacutevajiacute po řadu měsiacuteců Tvorba protilaacutetek se může jedince od jedince lišit ale většina z naacutes by po proběhleacute infekci měla miacutet detekovatelneacute protilaacutetky IgM IgA a IgG pokud se imunitniacute systeacutem s virovou naacutekazou nějakyacute čas potyacutekal Imunitniacute systeacutem reaguje takeacute aktivaciacute tzv buněčneacute imunity Při niacute se aktivujiacute cytotoxickeacute Tc lymfocyty a NK buňky (67) Bohužel zatiacutem nemaacuteme k dispozici testy ktereacute by naacutem umožnily tuto druhou bojovou strategii imunitniacuteho systeacutemu proti SARS-CoV-2 detekovat Obraacutezek č 1 ndash Scheacutema počtu virovyacutech čaacutestic a kinetiky tvorby protilaacutetek při viroveacute infekci
7
Při stanovovaacuteniacute protilaacutetek anti-SARS-CoV-2 můžeme použiacutet levnějšiacute rychlotesty s menšiacute přesnostiacute nebo spolehlivějšiacute ale dražšiacute ELISA testy (5) Zatiacutemco pozitivniacute naacutelezy protilaacutetek v ideaacutelniacutem přiacutepadě znamenajiacute kontakt imunitniacuteho systeacutemu s virem negativniacute naacutelezy by měly znamenat že se osoba s virovou infekciacute dosud nesetkala nebo že u niacute dosud neproběhl vyacutevoj protilaacutetek Při niacutezkeacute prevalenci infekce v populaci je však nutneacute si uvědomit že i některeacute z pozitivniacutech vyacutesledků je projevem falešneacute pozitivity i když jsou použiteacute špičkoveacute diagnostickeacute testy
Stanoveniacute protilaacutetek IgG a IgA metodou ELISA EUROIMMUN Testovanyacutem osobaacutem byla odebraacutena žilniacute krev V seacuterech byly stanoveny protilaacutetky proti SARS-CoV-2 izotypu IgG a IgA Byla použita metoda ELISA kity firmy EUROIMMUN Specificita a senzitivita těchto testů jsou uvedeny v Tabulce č 3 uvedeneacute jsou hodnoty z naacutevodu vyacuterobce (verze 4 ze dne 7 5 2020) Vyacutesledkem testu je čiacuteselnaacute hodnota (OD ratio) kteraacute udaacutevaacute poměr množstviacute protilaacutetek ve vzorku a v kalibraacutetoru Pokud je OD ratio lt 08 pak je test negativniacute Hodnoty 08-11 znamenajiacute hraničniacute vyacutesledek Hodnoty nad 11 jsou pozitivniacute Tabulka č 3 ndash Senzitivita (podle doby od nakaženiacute) a specificita ELISA testů EUROIMMUN
Senzitivita (10-20 den)
Senzitivita gt20 dniacute
Specificita
Vyšetřeniacute IgA
917 100 924
Vyšetřeniacute IgG
750 938 996
Test IgG protilaacutetek se vyznačuje velmi vysokou specificitou (996 ) proto je doporučovaacuten pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute Pozitivniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek je považovaacuten za důkaz prodělaneacute infekce SARS-CoV-2 Hraničniacute vyacutesledek IgG je třeba posuzovat opatrně v kontextu dalšiacutech informaciacute Naopak test IgA maacute nižšiacute specificitu (924 ) a pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute se nehodiacute z důvodu vysokeacuteho rizika falešně pozitivniacutech vyacutesledků Vyacutehodou stanoveniacute IgA je vysokaacute senzitivita tedy možnost zachyceniacute všech potencionaacutelně nemocnyacutech osob Pozitivniacute vyacutesledky IgA protilaacutetek je však třeba hodnotit společně s vyacutesledky IgG Osoby ktereacute majiacute pouze pozitivniacute IgA a nemajiacute IgG protilaacutetky považujeme v našiacute studii v teacuteto chviacuteli za negativniacute ale budeme je daacutele sledovat U těchto osob jsme doplnili PCR vyšetřeniacute a tiacutem ověřili zda nejsou infekčniacute O tom zda tyto osoby infekci koronavirem SARS-CoV-2 prodělaly rozhodne až opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek v časoveacutem odstupu protože jednotliveacute typy protilaacutetek v průběhu viroveacute infekce postupně narůstajiacute některeacute z nich přetrvaacutevajiacute a jineacute postupně klesajiacute Tvorba IgA předchaacuteziacute tvorbě IgG takže můžeme předpoklaacutedat že pokud IgA souviselo s infekciacute koronavirem budou o několik dnů tyacutednů později stoupat i hladiny specifickyacutech IgG protilaacutetek (viz Obraacutezek č1)
ČAacuteST 3 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek v okresech Piacutesek a Strakonice
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Piacutesek V Piacutesku bylo celkem vyšetřeno 1 000 osob V Tabulce č 4 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 4 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Piacutesek
8
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 897 37 43
IgG hran 7 0 4
IgG pos 7 0 5
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 897 osob (897 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 12 osob (12 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami (modře) - z nich mělo 5 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky a 7 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem Tedy neměli akutniacute infekci
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 11 osob (11 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 4 osoby měly IgA pozitivniacute tedy u nich je vyššiacute riziko že prodělaly infekci 7 osob nemělo IgA protilaacutetky Jejich vyacutesledek považujeme za neprůkaznyacute zatiacutem předpoklaacutedaacuteme že infekci neprodělali U těchto osob bude s časovyacutem odstupem proveden kontrolniacute odběr s ciacutelem zjistit zda došlo ke změnaacutem hladin protilaacutetek (seacuterokonverzi)
POUZE POZITIVNIacute IgA 43 osob (43 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 37 osob (37 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG Tyto osoby pravděpodobně majiacute falešně pozitivniacute vyacutesledek vyšetřeniacute a jejich IgA protilaacutetky jsou jen svou strukturou velmi podobneacute protilaacutetkaacutem proti koronaviru Ale několik osob bude miacutet specifickeacute IgA protilaacutetky U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Strakonice Ve Strakoniciacutech bylo celkem vyšetřeno 1011 osob V Tabulce č 5 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 5 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Strakonice
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 855 77 46
IgG hran 7 1 1
IgG pos 10 3 11
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 855 osob (846 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 24 osob (237 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami z nich mělo 11 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky 3 osoby měly hraničně pozitivniacute IgA a 10 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 9 osob (089 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 1 osoba měla IgA pozitivniacute tedy je možneacute uvažovat o prodělaneacute infekci U 7 osob s negativniacutem IgA a 1 osoby s hraničniacutem IgA se kloniacuteme spiacuteše k tomu že infekci koronavirem SARS-Cov-2 neprodělaly
POUZE POZITIVNIacute IgA 46 osob (455 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 77 osob (761 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG U osob s pozitivniacutem IgA bylo provedeno PCR vyšetřeniacute U žaacutedneacute osoby nebyla detekovaacuten SARS-CoV-2 U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
9
Opakovaneacute odběry Opakovaneacute odběry plaacutenujeme proveacutest 1-2 měsiacutece po prvniacutem vyšetřeniacute U jedneacute osoby jsme již opakovanyacute odběr provedli V prvniacutem odběru bylo zjištěno pozitivniacute IgA ale IgG bylo negativniacute Ve druheacutem odběru (po měsiacuteci) jsme zjistili naacuterůst IgA a IgG ktereacute je již hraničniacute (Graf č 4) Tento konkreacutetniacute přiacuteklad potvrzuje že osoby s pozitivniacutemi IgA a s negativniacutemi nebo hraničniacutemi IgG je třeba přetestovat Neniacute možneacute je v teacuteto chviacuteli považovat za pozitivniacute ale nelze je označit ani za osoby ktereacute COVID-19 neprodělaly Většinu z nich bude možneacute zařadit do spraacutevně či falešně pozitivniacutech skupin až po druheacutem odběru
Graf č 4 ndash Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek u osoby s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG
Zaacutevěry vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek v okresech Strakonice a Piacutesek Celkovyacute přehled vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek je uveden v Tabulce č 6
1 Na Strakonicku bylo zjištěno viacutec osob s protilaacutetkami IgG proti SARS-CoV-2 než v Piacutesku (237 vs 12 ) Jednaacute se s vysokou pravděpodobnostiacute o osoby ktereacute prodělaly infekci SARS-CoV-2 Žaacutednaacute z nich již neměla v době studie virus přiacutetomnyacute
2 Hraničniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek a pozitivniacute vyacutesledek IgA byl zjištěn u jedneacute osoby na
Strakonicku (01 ) a čtyř osob na Piacutesecku (04 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
3 Pozitivniacute IgA protilaacutetky a negativniacute IgG protilaacutetky byly zjištěny u 46 osob na Strakonicku (46 ) a 43 osob na Piacutesecku (43 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
4 Ostatniacute hraničniacute vyacutesledky považujeme za spiacuteše nespecifickeacuteZcela bez protilaacutetek bylo 855 osob
na Strakonicku (8457 ) a 897 osob na Piacutesecku (897 )
5 Je pravděpodobneacute že pozitivniacutech osob tedy ještě přibude O jakyacute počet se bude celkově jednat neniacute nyniacute možneacute odhadnout Finaacutelniacute vyacutesledky budeme znaacutet po druhyacutech odběrech cca v půlce července
0
05
1
15
2
25
IgA IgG
OD
RA
TIO
Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek
652020
962020
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
3
dnů později (253) byli laboratorně potvrzeni prvniacute pacienti v Piacutesku V obou okresech byl největšiacute naacuterůst počtu PCR pozitivniacutech osob do konce března V dubnu a květnu byl již vyacuteskyt novyacutech přiacutepadů v obou okresech minimaacutelniacute Kumulativniacute počet PCR pozitivniacutech osob v jednotlivyacutech tyacutednech je uveden v Grafu č2 Okresy se mezi sebou lišily takeacute v zaacutevažnosti průběhu onemocněniacute U strakonickyacutech pacientů byly zaznamenaacuteny vaacutežnějšiacute klinickeacute průběhy (vyššiacute počet hospitalizaciacute horečka a dokonce i uacutemrtiacute pacienta) než v Piacutesku (Tabulka č 1) Graf č 1 - Počet nově zachycenyacutech PCR pozitivniacutech osob v okresech Strakonice a Piacutesek
Graf č 2 - Kumulativniacute počet PCR pozitivniacutech osob ve Strakoniciacutech a Piacutesku
0
5
10
15
Po
čet
oso
b
Počet nově diagnostikovanyacutechpacientů s COVID-19
PCR+ osoby Strakonice PCR+ osoby Piacutesek
4
zdroj httpsonemocneni-aktualnemzcrczcovid-19 Tabulka č 1 ndash Klinickeacute přiacuteznaky u pacientů s COVID-19 v Piacutesku a Strakoniciacutech
Klinika Piacutesek Strakonice
Uacutemrtiacute 0 1
Hospitalizace 1 8
Horečka 2 5
Lehkyacute průběh 9 18
Bez přiacuteznaků 0 2
Vyššiacute riziko infekce vedlo takeacute k tomu že bylo na Strakonicku provedeno do konce dubna viacutec PCR testů než na Piacutesecku (Graf č 3) Graf č 3 - Počet PCR vyšetřenyacutech obyvatel strakonickeacuteho a piacuteseckeacuteho okresu v laboratořiacutech nemocnic Strakonice a Piacutesek
0
10
20
30
40
Ku
mu
lp
oče
t P
CR
+Kumulativniacute počet PCR+ osob
Strakonice Piacutesek
0
100
200
300
400
500
Po
čet
oso
b
Počet osob s provedenyacutem PCR vyšetřeniacutem
Strakonice Piacutesek
5
Čaacutest 2 ndash Navrženiacute studie a metodika studie
Vyacuteběr osob v dobrovolnickeacute a profesniacute skupině Studie byla zahaacutejena v prvniacutem tyacutednu v květnu tedy šest tyacutednů od počaacutetku epidemie ve Strakoniciacutech resp pět tyacutednů od počaacutetku epidemie v Piacutesku Ve studii bylo vyšetřeno 1011 osob v okresu Strakonice a 1000 osob v okresu Piacutesek Ve Strakoniciacutech se jednalo o 143 všech obyvatel okresu V Piacutesku se jednalo o 140 všech obyvatel okresu Vyšetřovali jsme dvě skupiny osob ndash profesniacute skupinu (P) a dobrovolnickou skupinu (D) Do profesniacute skupiny byli zařazeni hasiči policisteacute řidiči v dopravniacutech službaacutech uacuteředniacuteci zdravotniacuteci zaměstnanci obchodů pracovniacuteci v sociaacutelniacutech službaacutech pracovniacuteci městskyacutech služeb uacuteředniacuteci a pracovniacuteci ve školstviacute Vyacuteběr se miacuterně lišil mezi Strakonicemi a Piacuteskem Zařazeniacute lideacute v době koronaviroveacute epidemie chodili do praacutece tedy byli exponovaniacute viroveacute naacutekaze a byl u nich předpoklad že se s virem mohli setkat infekci prodělat a tudiacutež mohou miacutet protilaacutetky Skupina dobrovolnickaacute (D) byla vybiacuteraacutena s ohledem na věkovou skladbu obyvatelstva okresů Strakonice a Piacutesek Vyacuteběr probiacutehal tak že se dobrovolniacuteci sami hlaacutesili na webovou straacutenku nemocnic a z přihlaacutešenyacutech osob byly naacutesledně vybraacuteny osoby tak aby se naplnil předem danyacute počet osob ndash mužů a žen ndash v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech Doporučeneacute počty osob v danyacutech věkovyacutech skupinaacutech jsou uvedeneacute v Tabulce č 2 Ve Strakoniciacutech bylo vyšetřeno 493 osob v profesniacute skupině (P) a 518 osob mezi dobrovolniacuteky (D) V Piacutesku bylo vyšetřeno 500 osob z profesniacute skupiny a 500 dobrovolniacuteků
Podmiacutenky zařazeniacute probandů do studie Podmiacutenkou zařazeniacute osob do studie bylo
middot věk 5-89 let middot bez akutniacutech zdravotniacutech potiacutežiacute middot bez potvrzeneacute diagnoacutezy COVID-19 metodou PCR middot trvalyacute pobyt přiacutepadně vyacutekon povolaacuteniacute v daneacutem okresu middot podepsanyacute informovanyacute souhlas se studiiacute middot vyplněniacute dotazniacuteku
Tabulka č 2 ndash Počty vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech v okresech Strakonice a Piacutesek
Strakonice dobrovolniacuteci
Piacutesek dobrovolniacuteci
5 ndash 9 let 17 15
10 ndash 19 let 40 35
20 ndash 29 let 62 49
30 ndash 39 let 77 59
40 ndash 49 let 89 98
50 ndash 59 let 76 91
60 ndash 69 let 80 74
70 ndash 79 let 53 59
80+ let 24 20
Celkem 518 500
6
Všechny osoby ktereacute byly testovaacuteny vyplnily před odběrem dotazniacutek Ten zahrnoval otaacutezky mimo jineacute na to zda v posledniacutech čtyřech měsiacuteciacutech dotyčnyacute vycestoval do zahraničiacute a do ktereacute země zda měl nějakeacute zdravotniacute potiacuteže jakeacute klinickeacute přiacuteznaky měl a kdy (ve ktereacutem měsiacuteci) je měl Data z dotazniacuteků byla zpracovaacutena do databaacuteziacute v anonymizovaneacute formě
Diagnostickeacute metody akutniacute nebo proběhleacute infekce koronavirem SARS-CoV-2
PCR test Provedeniacutem vyacutetěru nosohltanu a naacuteslednou reversniacute PCR detekciacute viru SARS-CoV-2 zjistiacuteme ktereacute osoby jsou PCR pozitivniacute tedy u kteryacutech s vysokou pravděpodobnostiacute probiacutehaacute infekce koronavirem Mezi zbylyacutemi PCR negativniacutemi osobami však nedokaacutežeme rozlišit ty ktereacute se s infekciacute ještě nesetkaly už zdraveacute osoby nebo osoby s falešně negativniacutem testem Uvaacutediacute se že reversniacute PCR je pozitivniacute u 59 ndash 782 pacientů s COVID-19 ale i tento uacutedaj zaacutevisiacute na mnoha okolnostech (2)
Stanoveniacute protilaacutetek Při stanoveniacute specifickyacutech protilaacutetek metodou ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) nebo pomociacute imunochromatografickyacutech testů (tzv rychlotestů) zaacutevisiacute interpretace vyacutesledku na tom kdy (z pohledu rozvoje onemocněniacute) byl odběr krve proveden Imunitniacute systeacutem reaguje na virovou infekci tvorbou specifickyacutech protilaacutetek Při viroveacute infekci rozlišujeme tři zaacutekladniacute typy protilaacutetek IgM IgA a IgG Každyacute z nich se maacute trochu jinou roli v potlačeniacute viroveacute infekce Jejich vyacutevoj (tzv seacuterokonverze) trvaacute 8-21 dniacute (počiacutetaacuteno od prvniacutech symptomů onemocněniacute) a neniacute proto možneacute spolehlivě detekovat protilaacutetky u osob v začaacutetku onemocněniacute (34) U většiny pacientů jsou protilaacutetky detekovatelneacute po 14 dnech Při styku s virovou infekciacute se nejprve tvořiacute IgM ktereacute byacutevajiacute detekovatelneacute už od 3 až 7 dne (23) Hned vzaacutepětiacute se tvořiacute IgA protilaacutetky ktereacute se uplatňujiacute hlavně na slizniciacutech S určityacutem zpožděniacutem přibyacutevajiacute IgG protilaacutetky Zatiacutemco IgM a IgA po proběhleacute infekci postupně klesajiacute (viz Obraacutezek č 1) IgG protilaacutetky přetrvaacutevajiacute po řadu měsiacuteců Tvorba protilaacutetek se může jedince od jedince lišit ale většina z naacutes by po proběhleacute infekci měla miacutet detekovatelneacute protilaacutetky IgM IgA a IgG pokud se imunitniacute systeacutem s virovou naacutekazou nějakyacute čas potyacutekal Imunitniacute systeacutem reaguje takeacute aktivaciacute tzv buněčneacute imunity Při niacute se aktivujiacute cytotoxickeacute Tc lymfocyty a NK buňky (67) Bohužel zatiacutem nemaacuteme k dispozici testy ktereacute by naacutem umožnily tuto druhou bojovou strategii imunitniacuteho systeacutemu proti SARS-CoV-2 detekovat Obraacutezek č 1 ndash Scheacutema počtu virovyacutech čaacutestic a kinetiky tvorby protilaacutetek při viroveacute infekci
7
Při stanovovaacuteniacute protilaacutetek anti-SARS-CoV-2 můžeme použiacutet levnějšiacute rychlotesty s menšiacute přesnostiacute nebo spolehlivějšiacute ale dražšiacute ELISA testy (5) Zatiacutemco pozitivniacute naacutelezy protilaacutetek v ideaacutelniacutem přiacutepadě znamenajiacute kontakt imunitniacuteho systeacutemu s virem negativniacute naacutelezy by měly znamenat že se osoba s virovou infekciacute dosud nesetkala nebo že u niacute dosud neproběhl vyacutevoj protilaacutetek Při niacutezkeacute prevalenci infekce v populaci je však nutneacute si uvědomit že i některeacute z pozitivniacutech vyacutesledků je projevem falešneacute pozitivity i když jsou použiteacute špičkoveacute diagnostickeacute testy
Stanoveniacute protilaacutetek IgG a IgA metodou ELISA EUROIMMUN Testovanyacutem osobaacutem byla odebraacutena žilniacute krev V seacuterech byly stanoveny protilaacutetky proti SARS-CoV-2 izotypu IgG a IgA Byla použita metoda ELISA kity firmy EUROIMMUN Specificita a senzitivita těchto testů jsou uvedeny v Tabulce č 3 uvedeneacute jsou hodnoty z naacutevodu vyacuterobce (verze 4 ze dne 7 5 2020) Vyacutesledkem testu je čiacuteselnaacute hodnota (OD ratio) kteraacute udaacutevaacute poměr množstviacute protilaacutetek ve vzorku a v kalibraacutetoru Pokud je OD ratio lt 08 pak je test negativniacute Hodnoty 08-11 znamenajiacute hraničniacute vyacutesledek Hodnoty nad 11 jsou pozitivniacute Tabulka č 3 ndash Senzitivita (podle doby od nakaženiacute) a specificita ELISA testů EUROIMMUN
Senzitivita (10-20 den)
Senzitivita gt20 dniacute
Specificita
Vyšetřeniacute IgA
917 100 924
Vyšetřeniacute IgG
750 938 996
Test IgG protilaacutetek se vyznačuje velmi vysokou specificitou (996 ) proto je doporučovaacuten pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute Pozitivniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek je považovaacuten za důkaz prodělaneacute infekce SARS-CoV-2 Hraničniacute vyacutesledek IgG je třeba posuzovat opatrně v kontextu dalšiacutech informaciacute Naopak test IgA maacute nižšiacute specificitu (924 ) a pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute se nehodiacute z důvodu vysokeacuteho rizika falešně pozitivniacutech vyacutesledků Vyacutehodou stanoveniacute IgA je vysokaacute senzitivita tedy možnost zachyceniacute všech potencionaacutelně nemocnyacutech osob Pozitivniacute vyacutesledky IgA protilaacutetek je však třeba hodnotit společně s vyacutesledky IgG Osoby ktereacute majiacute pouze pozitivniacute IgA a nemajiacute IgG protilaacutetky považujeme v našiacute studii v teacuteto chviacuteli za negativniacute ale budeme je daacutele sledovat U těchto osob jsme doplnili PCR vyšetřeniacute a tiacutem ověřili zda nejsou infekčniacute O tom zda tyto osoby infekci koronavirem SARS-CoV-2 prodělaly rozhodne až opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek v časoveacutem odstupu protože jednotliveacute typy protilaacutetek v průběhu viroveacute infekce postupně narůstajiacute některeacute z nich přetrvaacutevajiacute a jineacute postupně klesajiacute Tvorba IgA předchaacuteziacute tvorbě IgG takže můžeme předpoklaacutedat že pokud IgA souviselo s infekciacute koronavirem budou o několik dnů tyacutednů později stoupat i hladiny specifickyacutech IgG protilaacutetek (viz Obraacutezek č1)
ČAacuteST 3 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek v okresech Piacutesek a Strakonice
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Piacutesek V Piacutesku bylo celkem vyšetřeno 1 000 osob V Tabulce č 4 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 4 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Piacutesek
8
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 897 37 43
IgG hran 7 0 4
IgG pos 7 0 5
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 897 osob (897 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 12 osob (12 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami (modře) - z nich mělo 5 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky a 7 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem Tedy neměli akutniacute infekci
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 11 osob (11 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 4 osoby měly IgA pozitivniacute tedy u nich je vyššiacute riziko že prodělaly infekci 7 osob nemělo IgA protilaacutetky Jejich vyacutesledek považujeme za neprůkaznyacute zatiacutem předpoklaacutedaacuteme že infekci neprodělali U těchto osob bude s časovyacutem odstupem proveden kontrolniacute odběr s ciacutelem zjistit zda došlo ke změnaacutem hladin protilaacutetek (seacuterokonverzi)
POUZE POZITIVNIacute IgA 43 osob (43 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 37 osob (37 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG Tyto osoby pravděpodobně majiacute falešně pozitivniacute vyacutesledek vyšetřeniacute a jejich IgA protilaacutetky jsou jen svou strukturou velmi podobneacute protilaacutetkaacutem proti koronaviru Ale několik osob bude miacutet specifickeacute IgA protilaacutetky U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Strakonice Ve Strakoniciacutech bylo celkem vyšetřeno 1011 osob V Tabulce č 5 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 5 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Strakonice
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 855 77 46
IgG hran 7 1 1
IgG pos 10 3 11
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 855 osob (846 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 24 osob (237 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami z nich mělo 11 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky 3 osoby měly hraničně pozitivniacute IgA a 10 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 9 osob (089 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 1 osoba měla IgA pozitivniacute tedy je možneacute uvažovat o prodělaneacute infekci U 7 osob s negativniacutem IgA a 1 osoby s hraničniacutem IgA se kloniacuteme spiacuteše k tomu že infekci koronavirem SARS-Cov-2 neprodělaly
POUZE POZITIVNIacute IgA 46 osob (455 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 77 osob (761 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG U osob s pozitivniacutem IgA bylo provedeno PCR vyšetřeniacute U žaacutedneacute osoby nebyla detekovaacuten SARS-CoV-2 U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
9
Opakovaneacute odběry Opakovaneacute odběry plaacutenujeme proveacutest 1-2 měsiacutece po prvniacutem vyšetřeniacute U jedneacute osoby jsme již opakovanyacute odběr provedli V prvniacutem odběru bylo zjištěno pozitivniacute IgA ale IgG bylo negativniacute Ve druheacutem odběru (po měsiacuteci) jsme zjistili naacuterůst IgA a IgG ktereacute je již hraničniacute (Graf č 4) Tento konkreacutetniacute přiacuteklad potvrzuje že osoby s pozitivniacutemi IgA a s negativniacutemi nebo hraničniacutemi IgG je třeba přetestovat Neniacute možneacute je v teacuteto chviacuteli považovat za pozitivniacute ale nelze je označit ani za osoby ktereacute COVID-19 neprodělaly Většinu z nich bude možneacute zařadit do spraacutevně či falešně pozitivniacutech skupin až po druheacutem odběru
Graf č 4 ndash Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek u osoby s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG
Zaacutevěry vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek v okresech Strakonice a Piacutesek Celkovyacute přehled vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek je uveden v Tabulce č 6
1 Na Strakonicku bylo zjištěno viacutec osob s protilaacutetkami IgG proti SARS-CoV-2 než v Piacutesku (237 vs 12 ) Jednaacute se s vysokou pravděpodobnostiacute o osoby ktereacute prodělaly infekci SARS-CoV-2 Žaacutednaacute z nich již neměla v době studie virus přiacutetomnyacute
2 Hraničniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek a pozitivniacute vyacutesledek IgA byl zjištěn u jedneacute osoby na
Strakonicku (01 ) a čtyř osob na Piacutesecku (04 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
3 Pozitivniacute IgA protilaacutetky a negativniacute IgG protilaacutetky byly zjištěny u 46 osob na Strakonicku (46 ) a 43 osob na Piacutesecku (43 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
4 Ostatniacute hraničniacute vyacutesledky považujeme za spiacuteše nespecifickeacuteZcela bez protilaacutetek bylo 855 osob
na Strakonicku (8457 ) a 897 osob na Piacutesecku (897 )
5 Je pravděpodobneacute že pozitivniacutech osob tedy ještě přibude O jakyacute počet se bude celkově jednat neniacute nyniacute možneacute odhadnout Finaacutelniacute vyacutesledky budeme znaacutet po druhyacutech odběrech cca v půlce července
0
05
1
15
2
25
IgA IgG
OD
RA
TIO
Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek
652020
962020
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
4
zdroj httpsonemocneni-aktualnemzcrczcovid-19 Tabulka č 1 ndash Klinickeacute přiacuteznaky u pacientů s COVID-19 v Piacutesku a Strakoniciacutech
Klinika Piacutesek Strakonice
Uacutemrtiacute 0 1
Hospitalizace 1 8
Horečka 2 5
Lehkyacute průběh 9 18
Bez přiacuteznaků 0 2
Vyššiacute riziko infekce vedlo takeacute k tomu že bylo na Strakonicku provedeno do konce dubna viacutec PCR testů než na Piacutesecku (Graf č 3) Graf č 3 - Počet PCR vyšetřenyacutech obyvatel strakonickeacuteho a piacuteseckeacuteho okresu v laboratořiacutech nemocnic Strakonice a Piacutesek
0
10
20
30
40
Ku
mu
lp
oče
t P
CR
+Kumulativniacute počet PCR+ osob
Strakonice Piacutesek
0
100
200
300
400
500
Po
čet
oso
b
Počet osob s provedenyacutem PCR vyšetřeniacutem
Strakonice Piacutesek
5
Čaacutest 2 ndash Navrženiacute studie a metodika studie
Vyacuteběr osob v dobrovolnickeacute a profesniacute skupině Studie byla zahaacutejena v prvniacutem tyacutednu v květnu tedy šest tyacutednů od počaacutetku epidemie ve Strakoniciacutech resp pět tyacutednů od počaacutetku epidemie v Piacutesku Ve studii bylo vyšetřeno 1011 osob v okresu Strakonice a 1000 osob v okresu Piacutesek Ve Strakoniciacutech se jednalo o 143 všech obyvatel okresu V Piacutesku se jednalo o 140 všech obyvatel okresu Vyšetřovali jsme dvě skupiny osob ndash profesniacute skupinu (P) a dobrovolnickou skupinu (D) Do profesniacute skupiny byli zařazeni hasiči policisteacute řidiči v dopravniacutech službaacutech uacuteředniacuteci zdravotniacuteci zaměstnanci obchodů pracovniacuteci v sociaacutelniacutech službaacutech pracovniacuteci městskyacutech služeb uacuteředniacuteci a pracovniacuteci ve školstviacute Vyacuteběr se miacuterně lišil mezi Strakonicemi a Piacuteskem Zařazeniacute lideacute v době koronaviroveacute epidemie chodili do praacutece tedy byli exponovaniacute viroveacute naacutekaze a byl u nich předpoklad že se s virem mohli setkat infekci prodělat a tudiacutež mohou miacutet protilaacutetky Skupina dobrovolnickaacute (D) byla vybiacuteraacutena s ohledem na věkovou skladbu obyvatelstva okresů Strakonice a Piacutesek Vyacuteběr probiacutehal tak že se dobrovolniacuteci sami hlaacutesili na webovou straacutenku nemocnic a z přihlaacutešenyacutech osob byly naacutesledně vybraacuteny osoby tak aby se naplnil předem danyacute počet osob ndash mužů a žen ndash v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech Doporučeneacute počty osob v danyacutech věkovyacutech skupinaacutech jsou uvedeneacute v Tabulce č 2 Ve Strakoniciacutech bylo vyšetřeno 493 osob v profesniacute skupině (P) a 518 osob mezi dobrovolniacuteky (D) V Piacutesku bylo vyšetřeno 500 osob z profesniacute skupiny a 500 dobrovolniacuteků
Podmiacutenky zařazeniacute probandů do studie Podmiacutenkou zařazeniacute osob do studie bylo
middot věk 5-89 let middot bez akutniacutech zdravotniacutech potiacutežiacute middot bez potvrzeneacute diagnoacutezy COVID-19 metodou PCR middot trvalyacute pobyt přiacutepadně vyacutekon povolaacuteniacute v daneacutem okresu middot podepsanyacute informovanyacute souhlas se studiiacute middot vyplněniacute dotazniacuteku
Tabulka č 2 ndash Počty vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech v okresech Strakonice a Piacutesek
Strakonice dobrovolniacuteci
Piacutesek dobrovolniacuteci
5 ndash 9 let 17 15
10 ndash 19 let 40 35
20 ndash 29 let 62 49
30 ndash 39 let 77 59
40 ndash 49 let 89 98
50 ndash 59 let 76 91
60 ndash 69 let 80 74
70 ndash 79 let 53 59
80+ let 24 20
Celkem 518 500
6
Všechny osoby ktereacute byly testovaacuteny vyplnily před odběrem dotazniacutek Ten zahrnoval otaacutezky mimo jineacute na to zda v posledniacutech čtyřech měsiacuteciacutech dotyčnyacute vycestoval do zahraničiacute a do ktereacute země zda měl nějakeacute zdravotniacute potiacuteže jakeacute klinickeacute přiacuteznaky měl a kdy (ve ktereacutem měsiacuteci) je měl Data z dotazniacuteků byla zpracovaacutena do databaacuteziacute v anonymizovaneacute formě
Diagnostickeacute metody akutniacute nebo proběhleacute infekce koronavirem SARS-CoV-2
PCR test Provedeniacutem vyacutetěru nosohltanu a naacuteslednou reversniacute PCR detekciacute viru SARS-CoV-2 zjistiacuteme ktereacute osoby jsou PCR pozitivniacute tedy u kteryacutech s vysokou pravděpodobnostiacute probiacutehaacute infekce koronavirem Mezi zbylyacutemi PCR negativniacutemi osobami však nedokaacutežeme rozlišit ty ktereacute se s infekciacute ještě nesetkaly už zdraveacute osoby nebo osoby s falešně negativniacutem testem Uvaacutediacute se že reversniacute PCR je pozitivniacute u 59 ndash 782 pacientů s COVID-19 ale i tento uacutedaj zaacutevisiacute na mnoha okolnostech (2)
Stanoveniacute protilaacutetek Při stanoveniacute specifickyacutech protilaacutetek metodou ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) nebo pomociacute imunochromatografickyacutech testů (tzv rychlotestů) zaacutevisiacute interpretace vyacutesledku na tom kdy (z pohledu rozvoje onemocněniacute) byl odběr krve proveden Imunitniacute systeacutem reaguje na virovou infekci tvorbou specifickyacutech protilaacutetek Při viroveacute infekci rozlišujeme tři zaacutekladniacute typy protilaacutetek IgM IgA a IgG Každyacute z nich se maacute trochu jinou roli v potlačeniacute viroveacute infekce Jejich vyacutevoj (tzv seacuterokonverze) trvaacute 8-21 dniacute (počiacutetaacuteno od prvniacutech symptomů onemocněniacute) a neniacute proto možneacute spolehlivě detekovat protilaacutetky u osob v začaacutetku onemocněniacute (34) U většiny pacientů jsou protilaacutetky detekovatelneacute po 14 dnech Při styku s virovou infekciacute se nejprve tvořiacute IgM ktereacute byacutevajiacute detekovatelneacute už od 3 až 7 dne (23) Hned vzaacutepětiacute se tvořiacute IgA protilaacutetky ktereacute se uplatňujiacute hlavně na slizniciacutech S určityacutem zpožděniacutem přibyacutevajiacute IgG protilaacutetky Zatiacutemco IgM a IgA po proběhleacute infekci postupně klesajiacute (viz Obraacutezek č 1) IgG protilaacutetky přetrvaacutevajiacute po řadu měsiacuteců Tvorba protilaacutetek se může jedince od jedince lišit ale většina z naacutes by po proběhleacute infekci měla miacutet detekovatelneacute protilaacutetky IgM IgA a IgG pokud se imunitniacute systeacutem s virovou naacutekazou nějakyacute čas potyacutekal Imunitniacute systeacutem reaguje takeacute aktivaciacute tzv buněčneacute imunity Při niacute se aktivujiacute cytotoxickeacute Tc lymfocyty a NK buňky (67) Bohužel zatiacutem nemaacuteme k dispozici testy ktereacute by naacutem umožnily tuto druhou bojovou strategii imunitniacuteho systeacutemu proti SARS-CoV-2 detekovat Obraacutezek č 1 ndash Scheacutema počtu virovyacutech čaacutestic a kinetiky tvorby protilaacutetek při viroveacute infekci
7
Při stanovovaacuteniacute protilaacutetek anti-SARS-CoV-2 můžeme použiacutet levnějšiacute rychlotesty s menšiacute přesnostiacute nebo spolehlivějšiacute ale dražšiacute ELISA testy (5) Zatiacutemco pozitivniacute naacutelezy protilaacutetek v ideaacutelniacutem přiacutepadě znamenajiacute kontakt imunitniacuteho systeacutemu s virem negativniacute naacutelezy by měly znamenat že se osoba s virovou infekciacute dosud nesetkala nebo že u niacute dosud neproběhl vyacutevoj protilaacutetek Při niacutezkeacute prevalenci infekce v populaci je však nutneacute si uvědomit že i některeacute z pozitivniacutech vyacutesledků je projevem falešneacute pozitivity i když jsou použiteacute špičkoveacute diagnostickeacute testy
Stanoveniacute protilaacutetek IgG a IgA metodou ELISA EUROIMMUN Testovanyacutem osobaacutem byla odebraacutena žilniacute krev V seacuterech byly stanoveny protilaacutetky proti SARS-CoV-2 izotypu IgG a IgA Byla použita metoda ELISA kity firmy EUROIMMUN Specificita a senzitivita těchto testů jsou uvedeny v Tabulce č 3 uvedeneacute jsou hodnoty z naacutevodu vyacuterobce (verze 4 ze dne 7 5 2020) Vyacutesledkem testu je čiacuteselnaacute hodnota (OD ratio) kteraacute udaacutevaacute poměr množstviacute protilaacutetek ve vzorku a v kalibraacutetoru Pokud je OD ratio lt 08 pak je test negativniacute Hodnoty 08-11 znamenajiacute hraničniacute vyacutesledek Hodnoty nad 11 jsou pozitivniacute Tabulka č 3 ndash Senzitivita (podle doby od nakaženiacute) a specificita ELISA testů EUROIMMUN
Senzitivita (10-20 den)
Senzitivita gt20 dniacute
Specificita
Vyšetřeniacute IgA
917 100 924
Vyšetřeniacute IgG
750 938 996
Test IgG protilaacutetek se vyznačuje velmi vysokou specificitou (996 ) proto je doporučovaacuten pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute Pozitivniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek je považovaacuten za důkaz prodělaneacute infekce SARS-CoV-2 Hraničniacute vyacutesledek IgG je třeba posuzovat opatrně v kontextu dalšiacutech informaciacute Naopak test IgA maacute nižšiacute specificitu (924 ) a pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute se nehodiacute z důvodu vysokeacuteho rizika falešně pozitivniacutech vyacutesledků Vyacutehodou stanoveniacute IgA je vysokaacute senzitivita tedy možnost zachyceniacute všech potencionaacutelně nemocnyacutech osob Pozitivniacute vyacutesledky IgA protilaacutetek je však třeba hodnotit společně s vyacutesledky IgG Osoby ktereacute majiacute pouze pozitivniacute IgA a nemajiacute IgG protilaacutetky považujeme v našiacute studii v teacuteto chviacuteli za negativniacute ale budeme je daacutele sledovat U těchto osob jsme doplnili PCR vyšetřeniacute a tiacutem ověřili zda nejsou infekčniacute O tom zda tyto osoby infekci koronavirem SARS-CoV-2 prodělaly rozhodne až opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek v časoveacutem odstupu protože jednotliveacute typy protilaacutetek v průběhu viroveacute infekce postupně narůstajiacute některeacute z nich přetrvaacutevajiacute a jineacute postupně klesajiacute Tvorba IgA předchaacuteziacute tvorbě IgG takže můžeme předpoklaacutedat že pokud IgA souviselo s infekciacute koronavirem budou o několik dnů tyacutednů později stoupat i hladiny specifickyacutech IgG protilaacutetek (viz Obraacutezek č1)
ČAacuteST 3 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek v okresech Piacutesek a Strakonice
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Piacutesek V Piacutesku bylo celkem vyšetřeno 1 000 osob V Tabulce č 4 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 4 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Piacutesek
8
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 897 37 43
IgG hran 7 0 4
IgG pos 7 0 5
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 897 osob (897 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 12 osob (12 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami (modře) - z nich mělo 5 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky a 7 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem Tedy neměli akutniacute infekci
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 11 osob (11 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 4 osoby měly IgA pozitivniacute tedy u nich je vyššiacute riziko že prodělaly infekci 7 osob nemělo IgA protilaacutetky Jejich vyacutesledek považujeme za neprůkaznyacute zatiacutem předpoklaacutedaacuteme že infekci neprodělali U těchto osob bude s časovyacutem odstupem proveden kontrolniacute odběr s ciacutelem zjistit zda došlo ke změnaacutem hladin protilaacutetek (seacuterokonverzi)
POUZE POZITIVNIacute IgA 43 osob (43 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 37 osob (37 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG Tyto osoby pravděpodobně majiacute falešně pozitivniacute vyacutesledek vyšetřeniacute a jejich IgA protilaacutetky jsou jen svou strukturou velmi podobneacute protilaacutetkaacutem proti koronaviru Ale několik osob bude miacutet specifickeacute IgA protilaacutetky U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Strakonice Ve Strakoniciacutech bylo celkem vyšetřeno 1011 osob V Tabulce č 5 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 5 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Strakonice
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 855 77 46
IgG hran 7 1 1
IgG pos 10 3 11
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 855 osob (846 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 24 osob (237 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami z nich mělo 11 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky 3 osoby měly hraničně pozitivniacute IgA a 10 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 9 osob (089 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 1 osoba měla IgA pozitivniacute tedy je možneacute uvažovat o prodělaneacute infekci U 7 osob s negativniacutem IgA a 1 osoby s hraničniacutem IgA se kloniacuteme spiacuteše k tomu že infekci koronavirem SARS-Cov-2 neprodělaly
POUZE POZITIVNIacute IgA 46 osob (455 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 77 osob (761 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG U osob s pozitivniacutem IgA bylo provedeno PCR vyšetřeniacute U žaacutedneacute osoby nebyla detekovaacuten SARS-CoV-2 U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
9
Opakovaneacute odběry Opakovaneacute odběry plaacutenujeme proveacutest 1-2 měsiacutece po prvniacutem vyšetřeniacute U jedneacute osoby jsme již opakovanyacute odběr provedli V prvniacutem odběru bylo zjištěno pozitivniacute IgA ale IgG bylo negativniacute Ve druheacutem odběru (po měsiacuteci) jsme zjistili naacuterůst IgA a IgG ktereacute je již hraničniacute (Graf č 4) Tento konkreacutetniacute přiacuteklad potvrzuje že osoby s pozitivniacutemi IgA a s negativniacutemi nebo hraničniacutemi IgG je třeba přetestovat Neniacute možneacute je v teacuteto chviacuteli považovat za pozitivniacute ale nelze je označit ani za osoby ktereacute COVID-19 neprodělaly Většinu z nich bude možneacute zařadit do spraacutevně či falešně pozitivniacutech skupin až po druheacutem odběru
Graf č 4 ndash Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek u osoby s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG
Zaacutevěry vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek v okresech Strakonice a Piacutesek Celkovyacute přehled vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek je uveden v Tabulce č 6
1 Na Strakonicku bylo zjištěno viacutec osob s protilaacutetkami IgG proti SARS-CoV-2 než v Piacutesku (237 vs 12 ) Jednaacute se s vysokou pravděpodobnostiacute o osoby ktereacute prodělaly infekci SARS-CoV-2 Žaacutednaacute z nich již neměla v době studie virus přiacutetomnyacute
2 Hraničniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek a pozitivniacute vyacutesledek IgA byl zjištěn u jedneacute osoby na
Strakonicku (01 ) a čtyř osob na Piacutesecku (04 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
3 Pozitivniacute IgA protilaacutetky a negativniacute IgG protilaacutetky byly zjištěny u 46 osob na Strakonicku (46 ) a 43 osob na Piacutesecku (43 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
4 Ostatniacute hraničniacute vyacutesledky považujeme za spiacuteše nespecifickeacuteZcela bez protilaacutetek bylo 855 osob
na Strakonicku (8457 ) a 897 osob na Piacutesecku (897 )
5 Je pravděpodobneacute že pozitivniacutech osob tedy ještě přibude O jakyacute počet se bude celkově jednat neniacute nyniacute možneacute odhadnout Finaacutelniacute vyacutesledky budeme znaacutet po druhyacutech odběrech cca v půlce července
0
05
1
15
2
25
IgA IgG
OD
RA
TIO
Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek
652020
962020
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
5
Čaacutest 2 ndash Navrženiacute studie a metodika studie
Vyacuteběr osob v dobrovolnickeacute a profesniacute skupině Studie byla zahaacutejena v prvniacutem tyacutednu v květnu tedy šest tyacutednů od počaacutetku epidemie ve Strakoniciacutech resp pět tyacutednů od počaacutetku epidemie v Piacutesku Ve studii bylo vyšetřeno 1011 osob v okresu Strakonice a 1000 osob v okresu Piacutesek Ve Strakoniciacutech se jednalo o 143 všech obyvatel okresu V Piacutesku se jednalo o 140 všech obyvatel okresu Vyšetřovali jsme dvě skupiny osob ndash profesniacute skupinu (P) a dobrovolnickou skupinu (D) Do profesniacute skupiny byli zařazeni hasiči policisteacute řidiči v dopravniacutech službaacutech uacuteředniacuteci zdravotniacuteci zaměstnanci obchodů pracovniacuteci v sociaacutelniacutech službaacutech pracovniacuteci městskyacutech služeb uacuteředniacuteci a pracovniacuteci ve školstviacute Vyacuteběr se miacuterně lišil mezi Strakonicemi a Piacuteskem Zařazeniacute lideacute v době koronaviroveacute epidemie chodili do praacutece tedy byli exponovaniacute viroveacute naacutekaze a byl u nich předpoklad že se s virem mohli setkat infekci prodělat a tudiacutež mohou miacutet protilaacutetky Skupina dobrovolnickaacute (D) byla vybiacuteraacutena s ohledem na věkovou skladbu obyvatelstva okresů Strakonice a Piacutesek Vyacuteběr probiacutehal tak že se dobrovolniacuteci sami hlaacutesili na webovou straacutenku nemocnic a z přihlaacutešenyacutech osob byly naacutesledně vybraacuteny osoby tak aby se naplnil předem danyacute počet osob ndash mužů a žen ndash v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech Doporučeneacute počty osob v danyacutech věkovyacutech skupinaacutech jsou uvedeneacute v Tabulce č 2 Ve Strakoniciacutech bylo vyšetřeno 493 osob v profesniacute skupině (P) a 518 osob mezi dobrovolniacuteky (D) V Piacutesku bylo vyšetřeno 500 osob z profesniacute skupiny a 500 dobrovolniacuteků
Podmiacutenky zařazeniacute probandů do studie Podmiacutenkou zařazeniacute osob do studie bylo
middot věk 5-89 let middot bez akutniacutech zdravotniacutech potiacutežiacute middot bez potvrzeneacute diagnoacutezy COVID-19 metodou PCR middot trvalyacute pobyt přiacutepadně vyacutekon povolaacuteniacute v daneacutem okresu middot podepsanyacute informovanyacute souhlas se studiiacute middot vyplněniacute dotazniacuteku
Tabulka č 2 ndash Počty vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech v okresech Strakonice a Piacutesek
Strakonice dobrovolniacuteci
Piacutesek dobrovolniacuteci
5 ndash 9 let 17 15
10 ndash 19 let 40 35
20 ndash 29 let 62 49
30 ndash 39 let 77 59
40 ndash 49 let 89 98
50 ndash 59 let 76 91
60 ndash 69 let 80 74
70 ndash 79 let 53 59
80+ let 24 20
Celkem 518 500
6
Všechny osoby ktereacute byly testovaacuteny vyplnily před odběrem dotazniacutek Ten zahrnoval otaacutezky mimo jineacute na to zda v posledniacutech čtyřech měsiacuteciacutech dotyčnyacute vycestoval do zahraničiacute a do ktereacute země zda měl nějakeacute zdravotniacute potiacuteže jakeacute klinickeacute přiacuteznaky měl a kdy (ve ktereacutem měsiacuteci) je měl Data z dotazniacuteků byla zpracovaacutena do databaacuteziacute v anonymizovaneacute formě
Diagnostickeacute metody akutniacute nebo proběhleacute infekce koronavirem SARS-CoV-2
PCR test Provedeniacutem vyacutetěru nosohltanu a naacuteslednou reversniacute PCR detekciacute viru SARS-CoV-2 zjistiacuteme ktereacute osoby jsou PCR pozitivniacute tedy u kteryacutech s vysokou pravděpodobnostiacute probiacutehaacute infekce koronavirem Mezi zbylyacutemi PCR negativniacutemi osobami však nedokaacutežeme rozlišit ty ktereacute se s infekciacute ještě nesetkaly už zdraveacute osoby nebo osoby s falešně negativniacutem testem Uvaacutediacute se že reversniacute PCR je pozitivniacute u 59 ndash 782 pacientů s COVID-19 ale i tento uacutedaj zaacutevisiacute na mnoha okolnostech (2)
Stanoveniacute protilaacutetek Při stanoveniacute specifickyacutech protilaacutetek metodou ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) nebo pomociacute imunochromatografickyacutech testů (tzv rychlotestů) zaacutevisiacute interpretace vyacutesledku na tom kdy (z pohledu rozvoje onemocněniacute) byl odběr krve proveden Imunitniacute systeacutem reaguje na virovou infekci tvorbou specifickyacutech protilaacutetek Při viroveacute infekci rozlišujeme tři zaacutekladniacute typy protilaacutetek IgM IgA a IgG Každyacute z nich se maacute trochu jinou roli v potlačeniacute viroveacute infekce Jejich vyacutevoj (tzv seacuterokonverze) trvaacute 8-21 dniacute (počiacutetaacuteno od prvniacutech symptomů onemocněniacute) a neniacute proto možneacute spolehlivě detekovat protilaacutetky u osob v začaacutetku onemocněniacute (34) U většiny pacientů jsou protilaacutetky detekovatelneacute po 14 dnech Při styku s virovou infekciacute se nejprve tvořiacute IgM ktereacute byacutevajiacute detekovatelneacute už od 3 až 7 dne (23) Hned vzaacutepětiacute se tvořiacute IgA protilaacutetky ktereacute se uplatňujiacute hlavně na slizniciacutech S určityacutem zpožděniacutem přibyacutevajiacute IgG protilaacutetky Zatiacutemco IgM a IgA po proběhleacute infekci postupně klesajiacute (viz Obraacutezek č 1) IgG protilaacutetky přetrvaacutevajiacute po řadu měsiacuteců Tvorba protilaacutetek se může jedince od jedince lišit ale většina z naacutes by po proběhleacute infekci měla miacutet detekovatelneacute protilaacutetky IgM IgA a IgG pokud se imunitniacute systeacutem s virovou naacutekazou nějakyacute čas potyacutekal Imunitniacute systeacutem reaguje takeacute aktivaciacute tzv buněčneacute imunity Při niacute se aktivujiacute cytotoxickeacute Tc lymfocyty a NK buňky (67) Bohužel zatiacutem nemaacuteme k dispozici testy ktereacute by naacutem umožnily tuto druhou bojovou strategii imunitniacuteho systeacutemu proti SARS-CoV-2 detekovat Obraacutezek č 1 ndash Scheacutema počtu virovyacutech čaacutestic a kinetiky tvorby protilaacutetek při viroveacute infekci
7
Při stanovovaacuteniacute protilaacutetek anti-SARS-CoV-2 můžeme použiacutet levnějšiacute rychlotesty s menšiacute přesnostiacute nebo spolehlivějšiacute ale dražšiacute ELISA testy (5) Zatiacutemco pozitivniacute naacutelezy protilaacutetek v ideaacutelniacutem přiacutepadě znamenajiacute kontakt imunitniacuteho systeacutemu s virem negativniacute naacutelezy by měly znamenat že se osoba s virovou infekciacute dosud nesetkala nebo že u niacute dosud neproběhl vyacutevoj protilaacutetek Při niacutezkeacute prevalenci infekce v populaci je však nutneacute si uvědomit že i některeacute z pozitivniacutech vyacutesledků je projevem falešneacute pozitivity i když jsou použiteacute špičkoveacute diagnostickeacute testy
Stanoveniacute protilaacutetek IgG a IgA metodou ELISA EUROIMMUN Testovanyacutem osobaacutem byla odebraacutena žilniacute krev V seacuterech byly stanoveny protilaacutetky proti SARS-CoV-2 izotypu IgG a IgA Byla použita metoda ELISA kity firmy EUROIMMUN Specificita a senzitivita těchto testů jsou uvedeny v Tabulce č 3 uvedeneacute jsou hodnoty z naacutevodu vyacuterobce (verze 4 ze dne 7 5 2020) Vyacutesledkem testu je čiacuteselnaacute hodnota (OD ratio) kteraacute udaacutevaacute poměr množstviacute protilaacutetek ve vzorku a v kalibraacutetoru Pokud je OD ratio lt 08 pak je test negativniacute Hodnoty 08-11 znamenajiacute hraničniacute vyacutesledek Hodnoty nad 11 jsou pozitivniacute Tabulka č 3 ndash Senzitivita (podle doby od nakaženiacute) a specificita ELISA testů EUROIMMUN
Senzitivita (10-20 den)
Senzitivita gt20 dniacute
Specificita
Vyšetřeniacute IgA
917 100 924
Vyšetřeniacute IgG
750 938 996
Test IgG protilaacutetek se vyznačuje velmi vysokou specificitou (996 ) proto je doporučovaacuten pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute Pozitivniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek je považovaacuten za důkaz prodělaneacute infekce SARS-CoV-2 Hraničniacute vyacutesledek IgG je třeba posuzovat opatrně v kontextu dalšiacutech informaciacute Naopak test IgA maacute nižšiacute specificitu (924 ) a pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute se nehodiacute z důvodu vysokeacuteho rizika falešně pozitivniacutech vyacutesledků Vyacutehodou stanoveniacute IgA je vysokaacute senzitivita tedy možnost zachyceniacute všech potencionaacutelně nemocnyacutech osob Pozitivniacute vyacutesledky IgA protilaacutetek je však třeba hodnotit společně s vyacutesledky IgG Osoby ktereacute majiacute pouze pozitivniacute IgA a nemajiacute IgG protilaacutetky považujeme v našiacute studii v teacuteto chviacuteli za negativniacute ale budeme je daacutele sledovat U těchto osob jsme doplnili PCR vyšetřeniacute a tiacutem ověřili zda nejsou infekčniacute O tom zda tyto osoby infekci koronavirem SARS-CoV-2 prodělaly rozhodne až opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek v časoveacutem odstupu protože jednotliveacute typy protilaacutetek v průběhu viroveacute infekce postupně narůstajiacute některeacute z nich přetrvaacutevajiacute a jineacute postupně klesajiacute Tvorba IgA předchaacuteziacute tvorbě IgG takže můžeme předpoklaacutedat že pokud IgA souviselo s infekciacute koronavirem budou o několik dnů tyacutednů později stoupat i hladiny specifickyacutech IgG protilaacutetek (viz Obraacutezek č1)
ČAacuteST 3 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek v okresech Piacutesek a Strakonice
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Piacutesek V Piacutesku bylo celkem vyšetřeno 1 000 osob V Tabulce č 4 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 4 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Piacutesek
8
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 897 37 43
IgG hran 7 0 4
IgG pos 7 0 5
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 897 osob (897 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 12 osob (12 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami (modře) - z nich mělo 5 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky a 7 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem Tedy neměli akutniacute infekci
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 11 osob (11 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 4 osoby měly IgA pozitivniacute tedy u nich je vyššiacute riziko že prodělaly infekci 7 osob nemělo IgA protilaacutetky Jejich vyacutesledek považujeme za neprůkaznyacute zatiacutem předpoklaacutedaacuteme že infekci neprodělali U těchto osob bude s časovyacutem odstupem proveden kontrolniacute odběr s ciacutelem zjistit zda došlo ke změnaacutem hladin protilaacutetek (seacuterokonverzi)
POUZE POZITIVNIacute IgA 43 osob (43 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 37 osob (37 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG Tyto osoby pravděpodobně majiacute falešně pozitivniacute vyacutesledek vyšetřeniacute a jejich IgA protilaacutetky jsou jen svou strukturou velmi podobneacute protilaacutetkaacutem proti koronaviru Ale několik osob bude miacutet specifickeacute IgA protilaacutetky U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Strakonice Ve Strakoniciacutech bylo celkem vyšetřeno 1011 osob V Tabulce č 5 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 5 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Strakonice
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 855 77 46
IgG hran 7 1 1
IgG pos 10 3 11
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 855 osob (846 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 24 osob (237 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami z nich mělo 11 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky 3 osoby měly hraničně pozitivniacute IgA a 10 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 9 osob (089 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 1 osoba měla IgA pozitivniacute tedy je možneacute uvažovat o prodělaneacute infekci U 7 osob s negativniacutem IgA a 1 osoby s hraničniacutem IgA se kloniacuteme spiacuteše k tomu že infekci koronavirem SARS-Cov-2 neprodělaly
POUZE POZITIVNIacute IgA 46 osob (455 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 77 osob (761 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG U osob s pozitivniacutem IgA bylo provedeno PCR vyšetřeniacute U žaacutedneacute osoby nebyla detekovaacuten SARS-CoV-2 U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
9
Opakovaneacute odběry Opakovaneacute odběry plaacutenujeme proveacutest 1-2 měsiacutece po prvniacutem vyšetřeniacute U jedneacute osoby jsme již opakovanyacute odběr provedli V prvniacutem odběru bylo zjištěno pozitivniacute IgA ale IgG bylo negativniacute Ve druheacutem odběru (po měsiacuteci) jsme zjistili naacuterůst IgA a IgG ktereacute je již hraničniacute (Graf č 4) Tento konkreacutetniacute přiacuteklad potvrzuje že osoby s pozitivniacutemi IgA a s negativniacutemi nebo hraničniacutemi IgG je třeba přetestovat Neniacute možneacute je v teacuteto chviacuteli považovat za pozitivniacute ale nelze je označit ani za osoby ktereacute COVID-19 neprodělaly Většinu z nich bude možneacute zařadit do spraacutevně či falešně pozitivniacutech skupin až po druheacutem odběru
Graf č 4 ndash Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek u osoby s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG
Zaacutevěry vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek v okresech Strakonice a Piacutesek Celkovyacute přehled vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek je uveden v Tabulce č 6
1 Na Strakonicku bylo zjištěno viacutec osob s protilaacutetkami IgG proti SARS-CoV-2 než v Piacutesku (237 vs 12 ) Jednaacute se s vysokou pravděpodobnostiacute o osoby ktereacute prodělaly infekci SARS-CoV-2 Žaacutednaacute z nich již neměla v době studie virus přiacutetomnyacute
2 Hraničniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek a pozitivniacute vyacutesledek IgA byl zjištěn u jedneacute osoby na
Strakonicku (01 ) a čtyř osob na Piacutesecku (04 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
3 Pozitivniacute IgA protilaacutetky a negativniacute IgG protilaacutetky byly zjištěny u 46 osob na Strakonicku (46 ) a 43 osob na Piacutesecku (43 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
4 Ostatniacute hraničniacute vyacutesledky považujeme za spiacuteše nespecifickeacuteZcela bez protilaacutetek bylo 855 osob
na Strakonicku (8457 ) a 897 osob na Piacutesecku (897 )
5 Je pravděpodobneacute že pozitivniacutech osob tedy ještě přibude O jakyacute počet se bude celkově jednat neniacute nyniacute možneacute odhadnout Finaacutelniacute vyacutesledky budeme znaacutet po druhyacutech odběrech cca v půlce července
0
05
1
15
2
25
IgA IgG
OD
RA
TIO
Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek
652020
962020
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
6
Všechny osoby ktereacute byly testovaacuteny vyplnily před odběrem dotazniacutek Ten zahrnoval otaacutezky mimo jineacute na to zda v posledniacutech čtyřech měsiacuteciacutech dotyčnyacute vycestoval do zahraničiacute a do ktereacute země zda měl nějakeacute zdravotniacute potiacuteže jakeacute klinickeacute přiacuteznaky měl a kdy (ve ktereacutem měsiacuteci) je měl Data z dotazniacuteků byla zpracovaacutena do databaacuteziacute v anonymizovaneacute formě
Diagnostickeacute metody akutniacute nebo proběhleacute infekce koronavirem SARS-CoV-2
PCR test Provedeniacutem vyacutetěru nosohltanu a naacuteslednou reversniacute PCR detekciacute viru SARS-CoV-2 zjistiacuteme ktereacute osoby jsou PCR pozitivniacute tedy u kteryacutech s vysokou pravděpodobnostiacute probiacutehaacute infekce koronavirem Mezi zbylyacutemi PCR negativniacutemi osobami však nedokaacutežeme rozlišit ty ktereacute se s infekciacute ještě nesetkaly už zdraveacute osoby nebo osoby s falešně negativniacutem testem Uvaacutediacute se že reversniacute PCR je pozitivniacute u 59 ndash 782 pacientů s COVID-19 ale i tento uacutedaj zaacutevisiacute na mnoha okolnostech (2)
Stanoveniacute protilaacutetek Při stanoveniacute specifickyacutech protilaacutetek metodou ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) nebo pomociacute imunochromatografickyacutech testů (tzv rychlotestů) zaacutevisiacute interpretace vyacutesledku na tom kdy (z pohledu rozvoje onemocněniacute) byl odběr krve proveden Imunitniacute systeacutem reaguje na virovou infekci tvorbou specifickyacutech protilaacutetek Při viroveacute infekci rozlišujeme tři zaacutekladniacute typy protilaacutetek IgM IgA a IgG Každyacute z nich se maacute trochu jinou roli v potlačeniacute viroveacute infekce Jejich vyacutevoj (tzv seacuterokonverze) trvaacute 8-21 dniacute (počiacutetaacuteno od prvniacutech symptomů onemocněniacute) a neniacute proto možneacute spolehlivě detekovat protilaacutetky u osob v začaacutetku onemocněniacute (34) U většiny pacientů jsou protilaacutetky detekovatelneacute po 14 dnech Při styku s virovou infekciacute se nejprve tvořiacute IgM ktereacute byacutevajiacute detekovatelneacute už od 3 až 7 dne (23) Hned vzaacutepětiacute se tvořiacute IgA protilaacutetky ktereacute se uplatňujiacute hlavně na slizniciacutech S určityacutem zpožděniacutem přibyacutevajiacute IgG protilaacutetky Zatiacutemco IgM a IgA po proběhleacute infekci postupně klesajiacute (viz Obraacutezek č 1) IgG protilaacutetky přetrvaacutevajiacute po řadu měsiacuteců Tvorba protilaacutetek se může jedince od jedince lišit ale většina z naacutes by po proběhleacute infekci měla miacutet detekovatelneacute protilaacutetky IgM IgA a IgG pokud se imunitniacute systeacutem s virovou naacutekazou nějakyacute čas potyacutekal Imunitniacute systeacutem reaguje takeacute aktivaciacute tzv buněčneacute imunity Při niacute se aktivujiacute cytotoxickeacute Tc lymfocyty a NK buňky (67) Bohužel zatiacutem nemaacuteme k dispozici testy ktereacute by naacutem umožnily tuto druhou bojovou strategii imunitniacuteho systeacutemu proti SARS-CoV-2 detekovat Obraacutezek č 1 ndash Scheacutema počtu virovyacutech čaacutestic a kinetiky tvorby protilaacutetek při viroveacute infekci
7
Při stanovovaacuteniacute protilaacutetek anti-SARS-CoV-2 můžeme použiacutet levnějšiacute rychlotesty s menšiacute přesnostiacute nebo spolehlivějšiacute ale dražšiacute ELISA testy (5) Zatiacutemco pozitivniacute naacutelezy protilaacutetek v ideaacutelniacutem přiacutepadě znamenajiacute kontakt imunitniacuteho systeacutemu s virem negativniacute naacutelezy by měly znamenat že se osoba s virovou infekciacute dosud nesetkala nebo že u niacute dosud neproběhl vyacutevoj protilaacutetek Při niacutezkeacute prevalenci infekce v populaci je však nutneacute si uvědomit že i některeacute z pozitivniacutech vyacutesledků je projevem falešneacute pozitivity i když jsou použiteacute špičkoveacute diagnostickeacute testy
Stanoveniacute protilaacutetek IgG a IgA metodou ELISA EUROIMMUN Testovanyacutem osobaacutem byla odebraacutena žilniacute krev V seacuterech byly stanoveny protilaacutetky proti SARS-CoV-2 izotypu IgG a IgA Byla použita metoda ELISA kity firmy EUROIMMUN Specificita a senzitivita těchto testů jsou uvedeny v Tabulce č 3 uvedeneacute jsou hodnoty z naacutevodu vyacuterobce (verze 4 ze dne 7 5 2020) Vyacutesledkem testu je čiacuteselnaacute hodnota (OD ratio) kteraacute udaacutevaacute poměr množstviacute protilaacutetek ve vzorku a v kalibraacutetoru Pokud je OD ratio lt 08 pak je test negativniacute Hodnoty 08-11 znamenajiacute hraničniacute vyacutesledek Hodnoty nad 11 jsou pozitivniacute Tabulka č 3 ndash Senzitivita (podle doby od nakaženiacute) a specificita ELISA testů EUROIMMUN
Senzitivita (10-20 den)
Senzitivita gt20 dniacute
Specificita
Vyšetřeniacute IgA
917 100 924
Vyšetřeniacute IgG
750 938 996
Test IgG protilaacutetek se vyznačuje velmi vysokou specificitou (996 ) proto je doporučovaacuten pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute Pozitivniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek je považovaacuten za důkaz prodělaneacute infekce SARS-CoV-2 Hraničniacute vyacutesledek IgG je třeba posuzovat opatrně v kontextu dalšiacutech informaciacute Naopak test IgA maacute nižšiacute specificitu (924 ) a pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute se nehodiacute z důvodu vysokeacuteho rizika falešně pozitivniacutech vyacutesledků Vyacutehodou stanoveniacute IgA je vysokaacute senzitivita tedy možnost zachyceniacute všech potencionaacutelně nemocnyacutech osob Pozitivniacute vyacutesledky IgA protilaacutetek je však třeba hodnotit společně s vyacutesledky IgG Osoby ktereacute majiacute pouze pozitivniacute IgA a nemajiacute IgG protilaacutetky považujeme v našiacute studii v teacuteto chviacuteli za negativniacute ale budeme je daacutele sledovat U těchto osob jsme doplnili PCR vyšetřeniacute a tiacutem ověřili zda nejsou infekčniacute O tom zda tyto osoby infekci koronavirem SARS-CoV-2 prodělaly rozhodne až opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek v časoveacutem odstupu protože jednotliveacute typy protilaacutetek v průběhu viroveacute infekce postupně narůstajiacute některeacute z nich přetrvaacutevajiacute a jineacute postupně klesajiacute Tvorba IgA předchaacuteziacute tvorbě IgG takže můžeme předpoklaacutedat že pokud IgA souviselo s infekciacute koronavirem budou o několik dnů tyacutednů později stoupat i hladiny specifickyacutech IgG protilaacutetek (viz Obraacutezek č1)
ČAacuteST 3 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek v okresech Piacutesek a Strakonice
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Piacutesek V Piacutesku bylo celkem vyšetřeno 1 000 osob V Tabulce č 4 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 4 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Piacutesek
8
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 897 37 43
IgG hran 7 0 4
IgG pos 7 0 5
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 897 osob (897 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 12 osob (12 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami (modře) - z nich mělo 5 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky a 7 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem Tedy neměli akutniacute infekci
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 11 osob (11 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 4 osoby měly IgA pozitivniacute tedy u nich je vyššiacute riziko že prodělaly infekci 7 osob nemělo IgA protilaacutetky Jejich vyacutesledek považujeme za neprůkaznyacute zatiacutem předpoklaacutedaacuteme že infekci neprodělali U těchto osob bude s časovyacutem odstupem proveden kontrolniacute odběr s ciacutelem zjistit zda došlo ke změnaacutem hladin protilaacutetek (seacuterokonverzi)
POUZE POZITIVNIacute IgA 43 osob (43 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 37 osob (37 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG Tyto osoby pravděpodobně majiacute falešně pozitivniacute vyacutesledek vyšetřeniacute a jejich IgA protilaacutetky jsou jen svou strukturou velmi podobneacute protilaacutetkaacutem proti koronaviru Ale několik osob bude miacutet specifickeacute IgA protilaacutetky U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Strakonice Ve Strakoniciacutech bylo celkem vyšetřeno 1011 osob V Tabulce č 5 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 5 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Strakonice
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 855 77 46
IgG hran 7 1 1
IgG pos 10 3 11
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 855 osob (846 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 24 osob (237 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami z nich mělo 11 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky 3 osoby měly hraničně pozitivniacute IgA a 10 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 9 osob (089 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 1 osoba měla IgA pozitivniacute tedy je možneacute uvažovat o prodělaneacute infekci U 7 osob s negativniacutem IgA a 1 osoby s hraničniacutem IgA se kloniacuteme spiacuteše k tomu že infekci koronavirem SARS-Cov-2 neprodělaly
POUZE POZITIVNIacute IgA 46 osob (455 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 77 osob (761 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG U osob s pozitivniacutem IgA bylo provedeno PCR vyšetřeniacute U žaacutedneacute osoby nebyla detekovaacuten SARS-CoV-2 U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
9
Opakovaneacute odběry Opakovaneacute odběry plaacutenujeme proveacutest 1-2 měsiacutece po prvniacutem vyšetřeniacute U jedneacute osoby jsme již opakovanyacute odběr provedli V prvniacutem odběru bylo zjištěno pozitivniacute IgA ale IgG bylo negativniacute Ve druheacutem odběru (po měsiacuteci) jsme zjistili naacuterůst IgA a IgG ktereacute je již hraničniacute (Graf č 4) Tento konkreacutetniacute přiacuteklad potvrzuje že osoby s pozitivniacutemi IgA a s negativniacutemi nebo hraničniacutemi IgG je třeba přetestovat Neniacute možneacute je v teacuteto chviacuteli považovat za pozitivniacute ale nelze je označit ani za osoby ktereacute COVID-19 neprodělaly Většinu z nich bude možneacute zařadit do spraacutevně či falešně pozitivniacutech skupin až po druheacutem odběru
Graf č 4 ndash Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek u osoby s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG
Zaacutevěry vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek v okresech Strakonice a Piacutesek Celkovyacute přehled vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek je uveden v Tabulce č 6
1 Na Strakonicku bylo zjištěno viacutec osob s protilaacutetkami IgG proti SARS-CoV-2 než v Piacutesku (237 vs 12 ) Jednaacute se s vysokou pravděpodobnostiacute o osoby ktereacute prodělaly infekci SARS-CoV-2 Žaacutednaacute z nich již neměla v době studie virus přiacutetomnyacute
2 Hraničniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek a pozitivniacute vyacutesledek IgA byl zjištěn u jedneacute osoby na
Strakonicku (01 ) a čtyř osob na Piacutesecku (04 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
3 Pozitivniacute IgA protilaacutetky a negativniacute IgG protilaacutetky byly zjištěny u 46 osob na Strakonicku (46 ) a 43 osob na Piacutesecku (43 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
4 Ostatniacute hraničniacute vyacutesledky považujeme za spiacuteše nespecifickeacuteZcela bez protilaacutetek bylo 855 osob
na Strakonicku (8457 ) a 897 osob na Piacutesecku (897 )
5 Je pravděpodobneacute že pozitivniacutech osob tedy ještě přibude O jakyacute počet se bude celkově jednat neniacute nyniacute možneacute odhadnout Finaacutelniacute vyacutesledky budeme znaacutet po druhyacutech odběrech cca v půlce července
0
05
1
15
2
25
IgA IgG
OD
RA
TIO
Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek
652020
962020
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
7
Při stanovovaacuteniacute protilaacutetek anti-SARS-CoV-2 můžeme použiacutet levnějšiacute rychlotesty s menšiacute přesnostiacute nebo spolehlivějšiacute ale dražšiacute ELISA testy (5) Zatiacutemco pozitivniacute naacutelezy protilaacutetek v ideaacutelniacutem přiacutepadě znamenajiacute kontakt imunitniacuteho systeacutemu s virem negativniacute naacutelezy by měly znamenat že se osoba s virovou infekciacute dosud nesetkala nebo že u niacute dosud neproběhl vyacutevoj protilaacutetek Při niacutezkeacute prevalenci infekce v populaci je však nutneacute si uvědomit že i některeacute z pozitivniacutech vyacutesledků je projevem falešneacute pozitivity i když jsou použiteacute špičkoveacute diagnostickeacute testy
Stanoveniacute protilaacutetek IgG a IgA metodou ELISA EUROIMMUN Testovanyacutem osobaacutem byla odebraacutena žilniacute krev V seacuterech byly stanoveny protilaacutetky proti SARS-CoV-2 izotypu IgG a IgA Byla použita metoda ELISA kity firmy EUROIMMUN Specificita a senzitivita těchto testů jsou uvedeny v Tabulce č 3 uvedeneacute jsou hodnoty z naacutevodu vyacuterobce (verze 4 ze dne 7 5 2020) Vyacutesledkem testu je čiacuteselnaacute hodnota (OD ratio) kteraacute udaacutevaacute poměr množstviacute protilaacutetek ve vzorku a v kalibraacutetoru Pokud je OD ratio lt 08 pak je test negativniacute Hodnoty 08-11 znamenajiacute hraničniacute vyacutesledek Hodnoty nad 11 jsou pozitivniacute Tabulka č 3 ndash Senzitivita (podle doby od nakaženiacute) a specificita ELISA testů EUROIMMUN
Senzitivita (10-20 den)
Senzitivita gt20 dniacute
Specificita
Vyšetřeniacute IgA
917 100 924
Vyšetřeniacute IgG
750 938 996
Test IgG protilaacutetek se vyznačuje velmi vysokou specificitou (996 ) proto je doporučovaacuten pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute Pozitivniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek je považovaacuten za důkaz prodělaneacute infekce SARS-CoV-2 Hraničniacute vyacutesledek IgG je třeba posuzovat opatrně v kontextu dalšiacutech informaciacute Naopak test IgA maacute nižšiacute specificitu (924 ) a pro screeningovaacute vyšetřeniacute populaciacute se nehodiacute z důvodu vysokeacuteho rizika falešně pozitivniacutech vyacutesledků Vyacutehodou stanoveniacute IgA je vysokaacute senzitivita tedy možnost zachyceniacute všech potencionaacutelně nemocnyacutech osob Pozitivniacute vyacutesledky IgA protilaacutetek je však třeba hodnotit společně s vyacutesledky IgG Osoby ktereacute majiacute pouze pozitivniacute IgA a nemajiacute IgG protilaacutetky považujeme v našiacute studii v teacuteto chviacuteli za negativniacute ale budeme je daacutele sledovat U těchto osob jsme doplnili PCR vyšetřeniacute a tiacutem ověřili zda nejsou infekčniacute O tom zda tyto osoby infekci koronavirem SARS-CoV-2 prodělaly rozhodne až opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek v časoveacutem odstupu protože jednotliveacute typy protilaacutetek v průběhu viroveacute infekce postupně narůstajiacute některeacute z nich přetrvaacutevajiacute a jineacute postupně klesajiacute Tvorba IgA předchaacuteziacute tvorbě IgG takže můžeme předpoklaacutedat že pokud IgA souviselo s infekciacute koronavirem budou o několik dnů tyacutednů později stoupat i hladiny specifickyacutech IgG protilaacutetek (viz Obraacutezek č1)
ČAacuteST 3 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek v okresech Piacutesek a Strakonice
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Piacutesek V Piacutesku bylo celkem vyšetřeno 1 000 osob V Tabulce č 4 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 4 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Piacutesek
8
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 897 37 43
IgG hran 7 0 4
IgG pos 7 0 5
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 897 osob (897 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 12 osob (12 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami (modře) - z nich mělo 5 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky a 7 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem Tedy neměli akutniacute infekci
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 11 osob (11 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 4 osoby měly IgA pozitivniacute tedy u nich je vyššiacute riziko že prodělaly infekci 7 osob nemělo IgA protilaacutetky Jejich vyacutesledek považujeme za neprůkaznyacute zatiacutem předpoklaacutedaacuteme že infekci neprodělali U těchto osob bude s časovyacutem odstupem proveden kontrolniacute odběr s ciacutelem zjistit zda došlo ke změnaacutem hladin protilaacutetek (seacuterokonverzi)
POUZE POZITIVNIacute IgA 43 osob (43 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 37 osob (37 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG Tyto osoby pravděpodobně majiacute falešně pozitivniacute vyacutesledek vyšetřeniacute a jejich IgA protilaacutetky jsou jen svou strukturou velmi podobneacute protilaacutetkaacutem proti koronaviru Ale několik osob bude miacutet specifickeacute IgA protilaacutetky U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Strakonice Ve Strakoniciacutech bylo celkem vyšetřeno 1011 osob V Tabulce č 5 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 5 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Strakonice
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 855 77 46
IgG hran 7 1 1
IgG pos 10 3 11
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 855 osob (846 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 24 osob (237 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami z nich mělo 11 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky 3 osoby měly hraničně pozitivniacute IgA a 10 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 9 osob (089 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 1 osoba měla IgA pozitivniacute tedy je možneacute uvažovat o prodělaneacute infekci U 7 osob s negativniacutem IgA a 1 osoby s hraničniacutem IgA se kloniacuteme spiacuteše k tomu že infekci koronavirem SARS-Cov-2 neprodělaly
POUZE POZITIVNIacute IgA 46 osob (455 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 77 osob (761 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG U osob s pozitivniacutem IgA bylo provedeno PCR vyšetřeniacute U žaacutedneacute osoby nebyla detekovaacuten SARS-CoV-2 U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
9
Opakovaneacute odběry Opakovaneacute odběry plaacutenujeme proveacutest 1-2 měsiacutece po prvniacutem vyšetřeniacute U jedneacute osoby jsme již opakovanyacute odběr provedli V prvniacutem odběru bylo zjištěno pozitivniacute IgA ale IgG bylo negativniacute Ve druheacutem odběru (po měsiacuteci) jsme zjistili naacuterůst IgA a IgG ktereacute je již hraničniacute (Graf č 4) Tento konkreacutetniacute přiacuteklad potvrzuje že osoby s pozitivniacutemi IgA a s negativniacutemi nebo hraničniacutemi IgG je třeba přetestovat Neniacute možneacute je v teacuteto chviacuteli považovat za pozitivniacute ale nelze je označit ani za osoby ktereacute COVID-19 neprodělaly Většinu z nich bude možneacute zařadit do spraacutevně či falešně pozitivniacutech skupin až po druheacutem odběru
Graf č 4 ndash Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek u osoby s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG
Zaacutevěry vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek v okresech Strakonice a Piacutesek Celkovyacute přehled vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek je uveden v Tabulce č 6
1 Na Strakonicku bylo zjištěno viacutec osob s protilaacutetkami IgG proti SARS-CoV-2 než v Piacutesku (237 vs 12 ) Jednaacute se s vysokou pravděpodobnostiacute o osoby ktereacute prodělaly infekci SARS-CoV-2 Žaacutednaacute z nich již neměla v době studie virus přiacutetomnyacute
2 Hraničniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek a pozitivniacute vyacutesledek IgA byl zjištěn u jedneacute osoby na
Strakonicku (01 ) a čtyř osob na Piacutesecku (04 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
3 Pozitivniacute IgA protilaacutetky a negativniacute IgG protilaacutetky byly zjištěny u 46 osob na Strakonicku (46 ) a 43 osob na Piacutesecku (43 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
4 Ostatniacute hraničniacute vyacutesledky považujeme za spiacuteše nespecifickeacuteZcela bez protilaacutetek bylo 855 osob
na Strakonicku (8457 ) a 897 osob na Piacutesecku (897 )
5 Je pravděpodobneacute že pozitivniacutech osob tedy ještě přibude O jakyacute počet se bude celkově jednat neniacute nyniacute možneacute odhadnout Finaacutelniacute vyacutesledky budeme znaacutet po druhyacutech odběrech cca v půlce července
0
05
1
15
2
25
IgA IgG
OD
RA
TIO
Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek
652020
962020
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
8
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 897 37 43
IgG hran 7 0 4
IgG pos 7 0 5
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 897 osob (897 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 12 osob (12 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami (modře) - z nich mělo 5 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky a 7 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem Tedy neměli akutniacute infekci
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 11 osob (11 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 4 osoby měly IgA pozitivniacute tedy u nich je vyššiacute riziko že prodělaly infekci 7 osob nemělo IgA protilaacutetky Jejich vyacutesledek považujeme za neprůkaznyacute zatiacutem předpoklaacutedaacuteme že infekci neprodělali U těchto osob bude s časovyacutem odstupem proveden kontrolniacute odběr s ciacutelem zjistit zda došlo ke změnaacutem hladin protilaacutetek (seacuterokonverzi)
POUZE POZITIVNIacute IgA 43 osob (43 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 37 osob (37 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG Tyto osoby pravděpodobně majiacute falešně pozitivniacute vyacutesledek vyšetřeniacute a jejich IgA protilaacutetky jsou jen svou strukturou velmi podobneacute protilaacutetkaacutem proti koronaviru Ale několik osob bude miacutet specifickeacute IgA protilaacutetky U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
Vyacuteskyt protilaacutetek v okrese Strakonice Ve Strakoniciacutech bylo celkem vyšetřeno 1011 osob V Tabulce č 5 je uveden přehled počtu osob podle naměřenyacutech hodnot IgA a IgG Tabulka č 5 ndash Počty osob s pozitivniacutem hraničniacutem a negativniacutem vyacutesledkem IgG a IgA protilaacutetek v okrese Strakonice
IgA neg IgA hran IgA poz
IgG neg 855 77 46
IgG hran 7 1 1
IgG pos 10 3 11
NEGATIVNIacute OSOBY (bez protilaacutetek) 855 osob (846 ) nemělo ani IgA ani IgG protilaacutetky tedy se s infekciacute pravděpodobně nesetkaly
PROKAZATELNĚ POZITIVNIacute OSOBY (s IgG protilaacutetkami) 24 osob (237 ) s pozitivniacutemi IgG protilaacutetkami z nich mělo 11 osob pozitivniacute IgA protilaacutetky 3 osoby měly hraničně pozitivniacute IgA a 10 lidiacute mělo negativniacute IgA U všech těchto osob byl proveden test PCR vždy s negativniacutem vyacutesledkem
HRANIČNIacute VYacuteSLEDEK IgG 9 osob (089 ) s hraničniacute hladinou IgG - z nich 1 osoba měla IgA pozitivniacute tedy je možneacute uvažovat o prodělaneacute infekci U 7 osob s negativniacutem IgA a 1 osoby s hraničniacutem IgA se kloniacuteme spiacuteše k tomu že infekci koronavirem SARS-Cov-2 neprodělaly
POUZE POZITIVNIacute IgA 46 osob (455 ) s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG a 77 osob (761 ) s hraničniacutem IgA a negativniacutem IgG U osob s pozitivniacutem IgA bylo provedeno PCR vyšetřeniacute U žaacutedneacute osoby nebyla detekovaacuten SARS-CoV-2 U obou skupin bude proto proveden kontrolniacute odběr v časoveacutem odstupu k ověřeniacute seacuterokonverze
9
Opakovaneacute odběry Opakovaneacute odběry plaacutenujeme proveacutest 1-2 měsiacutece po prvniacutem vyšetřeniacute U jedneacute osoby jsme již opakovanyacute odběr provedli V prvniacutem odběru bylo zjištěno pozitivniacute IgA ale IgG bylo negativniacute Ve druheacutem odběru (po měsiacuteci) jsme zjistili naacuterůst IgA a IgG ktereacute je již hraničniacute (Graf č 4) Tento konkreacutetniacute přiacuteklad potvrzuje že osoby s pozitivniacutemi IgA a s negativniacutemi nebo hraničniacutemi IgG je třeba přetestovat Neniacute možneacute je v teacuteto chviacuteli považovat za pozitivniacute ale nelze je označit ani za osoby ktereacute COVID-19 neprodělaly Většinu z nich bude možneacute zařadit do spraacutevně či falešně pozitivniacutech skupin až po druheacutem odběru
Graf č 4 ndash Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek u osoby s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG
Zaacutevěry vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek v okresech Strakonice a Piacutesek Celkovyacute přehled vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek je uveden v Tabulce č 6
1 Na Strakonicku bylo zjištěno viacutec osob s protilaacutetkami IgG proti SARS-CoV-2 než v Piacutesku (237 vs 12 ) Jednaacute se s vysokou pravděpodobnostiacute o osoby ktereacute prodělaly infekci SARS-CoV-2 Žaacutednaacute z nich již neměla v době studie virus přiacutetomnyacute
2 Hraničniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek a pozitivniacute vyacutesledek IgA byl zjištěn u jedneacute osoby na
Strakonicku (01 ) a čtyř osob na Piacutesecku (04 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
3 Pozitivniacute IgA protilaacutetky a negativniacute IgG protilaacutetky byly zjištěny u 46 osob na Strakonicku (46 ) a 43 osob na Piacutesecku (43 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
4 Ostatniacute hraničniacute vyacutesledky považujeme za spiacuteše nespecifickeacuteZcela bez protilaacutetek bylo 855 osob
na Strakonicku (8457 ) a 897 osob na Piacutesecku (897 )
5 Je pravděpodobneacute že pozitivniacutech osob tedy ještě přibude O jakyacute počet se bude celkově jednat neniacute nyniacute možneacute odhadnout Finaacutelniacute vyacutesledky budeme znaacutet po druhyacutech odběrech cca v půlce července
0
05
1
15
2
25
IgA IgG
OD
RA
TIO
Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek
652020
962020
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
9
Opakovaneacute odběry Opakovaneacute odběry plaacutenujeme proveacutest 1-2 měsiacutece po prvniacutem vyšetřeniacute U jedneacute osoby jsme již opakovanyacute odběr provedli V prvniacutem odběru bylo zjištěno pozitivniacute IgA ale IgG bylo negativniacute Ve druheacutem odběru (po měsiacuteci) jsme zjistili naacuterůst IgA a IgG ktereacute je již hraničniacute (Graf č 4) Tento konkreacutetniacute přiacuteklad potvrzuje že osoby s pozitivniacutemi IgA a s negativniacutemi nebo hraničniacutemi IgG je třeba přetestovat Neniacute možneacute je v teacuteto chviacuteli považovat za pozitivniacute ale nelze je označit ani za osoby ktereacute COVID-19 neprodělaly Většinu z nich bude možneacute zařadit do spraacutevně či falešně pozitivniacutech skupin až po druheacutem odběru
Graf č 4 ndash Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek u osoby s pozitivniacutem IgA a negativniacutem IgG
Zaacutevěry vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek v okresech Strakonice a Piacutesek Celkovyacute přehled vyacutesledků vyšetřeniacute protilaacutetek je uveden v Tabulce č 6
1 Na Strakonicku bylo zjištěno viacutec osob s protilaacutetkami IgG proti SARS-CoV-2 než v Piacutesku (237 vs 12 ) Jednaacute se s vysokou pravděpodobnostiacute o osoby ktereacute prodělaly infekci SARS-CoV-2 Žaacutednaacute z nich již neměla v době studie virus přiacutetomnyacute
2 Hraničniacute vyacutesledek IgG protilaacutetek a pozitivniacute vyacutesledek IgA byl zjištěn u jedneacute osoby na
Strakonicku (01 ) a čtyř osob na Piacutesecku (04 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
3 Pozitivniacute IgA protilaacutetky a negativniacute IgG protilaacutetky byly zjištěny u 46 osob na Strakonicku (46 ) a 43 osob na Piacutesecku (43 ) U těchto osob nyniacute nelze jednoznačně určit zda prodělaly nebo neprodělaly infekci SARS-CoV-2 Proto u nich bude proveden opakovanyacute odběr a stanoveniacute protilaacutetek
4 Ostatniacute hraničniacute vyacutesledky považujeme za spiacuteše nespecifickeacuteZcela bez protilaacutetek bylo 855 osob
na Strakonicku (8457 ) a 897 osob na Piacutesecku (897 )
5 Je pravděpodobneacute že pozitivniacutech osob tedy ještě přibude O jakyacute počet se bude celkově jednat neniacute nyniacute možneacute odhadnout Finaacutelniacute vyacutesledky budeme znaacutet po druhyacutech odběrech cca v půlce července
0
05
1
15
2
25
IgA IgG
OD
RA
TIO
Opakovaneacute vyšetřeniacute protilaacutetek
652020
962020
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
10
Tabulka č 6 ndash Přehled vyšetřeniacute protilaacutetek ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
POZITIVNIacute IgG 24 (237 )
12 (120 )
HRANIČNIacute IgG + POZ IgA 1 (010 )
4 (040 )
NEGATIVNIacute IgG + POZ IgA 46 (455 )
43 (430 )
HRANIČNIacute IgG + NEG HR IgA 8 (079 )
7 (070 )
NEGATIVNIacute IgG + HRAN IgA 77 (761 )
37 (370 )
ZCELA NEGATIVNIacute 855 (8457 )
897 (8970 )
CELKEM 1 011 1 000
ČAacuteST 4 ndash Zhodnoceniacute vyacuteskytu protilaacutetek v zaacutevislosti na informaciacutech o klinickeacutem stavu profesniacutem zařazeniacute cestovaacuteniacute či věku Vyacuteskyt protilaacutetek byl hodnocen u sledovanyacutech skupin osob i s ohledem na věk a pracovniacute zařazeniacute V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali zda vyšetřovaneacute osoby měly klinickeacute přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a takeacute zda vycestovaly do zahraničiacute Mohli jsme proto porovnat vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute cestovaly a naopak nevycestovaly a u osob ktereacute byly nemocneacute a u osob bez přiacuteznaků onemocněniacute
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u osob s klinickyacutemi přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků Pomociacute dotazniacuteků jsme zjišťovali zda měly osoby nějakeacute z přiacuteznaků respiračniacuteho onemocněniacute v době od ledna do začaacutetku května Mezi klinickeacute přiacuteznaky byly zařazeny teplota nad 375degC ryacutema kašel dušnost ztraacuteta čichu chuti velkaacute uacutenava Vyacutesledky porovnaacuteniacute jsou uvedeny v Tabulce č 7
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
11
Klinickeacute přiacuteznaky nemělo ve Strakoniciacutech 553 (547 ) osob v Piacutesku 598 osob (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak mělo ve Strakoniciacutech 458 osob (453 ) v Piacutesku 402 osob (402 )
Viacutece jak tři přiacuteznaky mělo Ve Strakoniciacutech 165 osob (163 ) v Piacutesku 121 osob (121 )
Tabulka č 7 ndash Vyacuteskyt klinickyacutech přiacuteznaků o vyšetřovanyacutech osob ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice Piacutesek
Žaacutedneacute klinickeacute přiacuteznaky 553 (547 ) 598 (598 )
Aspoň jeden přiacuteznak 458 (453 ) 402 (402 )
Tři a viacutece přiacuteznaků 165 (163 ) 121 (121 )
Celkem osob 1 011 1 000
K testovaacuteniacute častěji chodiacute lideacute kteřiacute již nějakeacute respiračniacute onemocněniacute prodělali a očekaacutevali že se potvrdiacute že měli koronavirovou infekci Pro posouzeniacute korelace vyacuteskytu protilaacutetek a vyacuteskytu přiacuteznaků jsme společně hodnotili vyacutesledky ze Strakonic a Piacutesku (Tabulka č 8) Tabulka č 8 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob s přiacuteznaky respiračniacuteho onemocněniacute a bez přiacuteznaků
S přiacuteznaky Bez přiacuteznaků
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
Strakonice a Piacutesek
Celkem ()
IgG poz 14 162 22 192
IgG hraničniacute 8 093 12 104
Pouze IgA protilaacutetky 36 417 50 436
Bez protilaacutetek 805 9328 1 064 9268
Celkem 863 1 148
Očekaacutevaacuteniacute že ti kteřiacute měli přiacuteznaky respiračniacutech onemocněniacute budou miacutet častěji protilaacutetky proti koronaviru se nepotvrdilo
Pozitivniacute IgG protilaacutetky mělo 14 lidiacute s přiacuteznaky a 22 lidiacute bez přiacuteznaků
Hraničniacute IgG mělo 8 lidiacute s přiacuteznaky 12 lidiacute bez přiacuteznaků
Pouze pozitivniacute IgA protilaacutetky mělo 36 lidiacute s přiacuteznaky a 50 bez přiacuteznaků
Bez prokaacutezanyacutech protilaacutetek bylo 805 osob s přiacuteznaky a 1064 osob bez přiacuteznaků Vyacuteskyt protilaacutetek proti SARS-CoV-2 byl miacuterně vyššiacute u osob bez přiacuteznaků než s přiacuteznaky Domniacutevaacuteme se že tento vyacutesledek je ovlivněn
častyacutem bezpřiacuteznakovyacutem průběhem onemocněniacute COVID-19
tiacutem že přiacuteznaky jsou nespecifickeacute a vyskytujiacute se i u jinyacutech forem respiračniacutech onemocněniacute
tiacutem že každyacute z naacutes posuzuje vlastniacute zdravotniacute stav velmi subjektivně Zaacutevěry Klinickeacute přiacuteznaky je vhodneacute v přiacutepadě těchto studiiacute sledovat ale vyacutesledek zkoumaacuteniacute je vyacuterazně ovlivněn jejich subjektivniacutem vniacutemaacuteniacutem respondenty Co je pro jednoho bdquonormaacutelniacute stavldquo pro druheacuteho
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
12
je už bdquopřiacuteznak onemocněniacuteldquo Nelze vyloučit že koronavirovaacute infekce velmi často proběhne bezpřiacuteznakově
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u různyacutech profesniacutech skupin Jedniacutem z uacutekolů teacuteto studie bylo zjistit zda jsou některeacute profesniacute skupiny viacutece ohroženeacute vyacuteskytem infekce koronavirem než jineacute Je pravdou že tento pohled je miacuterně zkreslenyacute tiacutem že spiacuteše naacutehodou se může staacutet že jedna osoba zanese infekci do sveacuteho pracovniacuteho tyacutemu a tiacutem paacutedem i danaacute skupina osob bude viacutece nakaženaacute než jinaacute skupina či profese Tedy pokud jedna skupina hasičů bude ohrožena infekciacute protože se v niacute vyskytla osoba s COVID-19 neniacute možneacute tento zaacutevěr zobecnit na tvrzeniacute bdquovšichni hasiči jsou ohroženiacute koronaviremldquo Počet osob s protilaacutetkami v různyacutech profesniacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech resp Piacutesku jsou vyneseneacute v Tabulce č 9 a resp 10 Nezjistili jsme vyacuterazneacute rozdiacutely ve vyacuteskytu protilaacutetek mezi jednotlivyacutemi skupinami Tabulka č 9 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin ve Strakoniciacutech
Strakonice Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 40 0 0 40 1
Řidiči 72 3 1 68 3
Policisti 96 4 2 90 9
Pokladniacute 97 2 1 94 0
Hasiči 86 2 3 81 9
Uacuteředniacuteci 67 0 0 67 3
Ostatniacute 35 1 0 34 0
Celkem 493 12 7 474 25
Tabulka č 10 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek IgG a IgA u různyacutech profesniacutech skupin v Piacutesku
Piacutesek Celkem IgG poz IgG hran IgG neg IgA poz
Zdravotniacuteci 163 1 2 160 7
Řidiči 61 0 1 60 3
Policisti 94 1 1 92 4
Pokladniacute 67 0 0 67 3
Hasiči 69 2 0 67 3
Městskeacute služby 23 0 0 23 0
Ostatniacute 23 0 0 23 1
Celkem 500 4 4 492 21
Zaacutevěry V žaacutedneacute ze sledovanyacutech profesniacutech skupin nebyl zjištěn vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronavirům v porovnaacuteniacute s ostatniacutemi skupinami V okrese Strakonice byl poměr vyacuteskytu protilaacutetek mezi profesniacute a dobrovolnickou skupinou 1212 v Piacutesku byl 48 tedy vyššiacute ve prospěch dobrovolnickeacute skupiny
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
13
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru u lidiacute kteřiacute byli v zahraničiacute a kteřiacute nevycestovali V raacutemci dotazniacuteků jsme zjišťovali
a) zda byly osoby v zahraničiacute v době od ledna do května 2020 b) kam vycestovaly c) zda jezdiacute za praciacute do zahraničiacute
V Tabulce č 11 je uvedena přiacutetomnost protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly do zahraničiacute a u osob ktereacute nevycestovaly V Tabulce č 12 je uveden počet pozitivniacutech osob z těch ktereacute do zahraničiacute vycestovaly a země ktereacute navštiacutevily V souboru bylo celkem 12 pendlerů nikdo z nich neměl IgG protilaacutetky pouze jeden měl pozitivniacute IgA protilaacutetky Okres Strakonice
853 osob ze Strakonic (844 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 158 osob (156 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 20 osob mělo IgG protilaacutetky a 9 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly 5 osob mělo IgG protilaacutetky Okres Piacutesek
836 osob z Piacutesku (836 ) do zahraničiacute ve sledovaneacutem obdobiacute nevycestovalo 164 osob (164 ) bylo v zahraničiacute
Z osob ktereacute nevycestovaly 11 osob mělo IgG protilaacutetky a 10 osob mělo hraničniacute IgG
Z osob ktereacute vycestovaly pouze jedna osoba měla pozitivniacute IgG a 1 osoba měla hraničniacute IgG
Tabulka č 11 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute byly v zahraničiacute a ktereacute nebyly v zahraničiacute
Strakonice Piacutesek
Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute Nevycestovalo Bylo v zahraničiacute
853 158 836 164
Pozitivniacute IgG 20 5 11 1
Hraničniacute IgG 9 0 10 1
Negativniacute 824 153 815 162
Tabulka č 12 ndash Vyacuteskyt protilaacutetek u osob ktereacute vycestovaly a přehled navštiacutevenyacutech zemiacute
Počet osob ktereacute vycestovaly
Pozitivniacute IgG Hraničniacute IgG
Německo 119 4 1
Slovensko 5 1 0
Rakousko 124 1 0
Itaacutelie 42 0 0
Jineacute 90 0 0
Zaacutevěry V zahraničiacute bylo 322 osob z obou okresů a z nich pouze 6 osob mělo protilaacutetky IgG (186 ) Tito lideacute byli v Německu na Slovensku nebo v Rakousku Naše studie neprokaacutezala že by pozitivniacutech osob bylo viacutece mezi lidmi kteřiacute byli v zahraničiacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
14
Porovnaacuteniacute vyacuteskytu protilaacutetek proti koronaviru v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech dobrovolniacuteků V raacutemci studie naacutes zajiacutemalo zda některaacute z věkovyacutech skupin nemaacute vyššiacute vyacuteskyt protilaacutetek proti koronaviru Počet lidiacute v jednotlivyacutech věkovyacutech skupinaacutech u dobrovolniacuteků ve Strakoniciacutech a v Piacutesku byl stanoven na zaacutekladě věkoveacuteho rozloženiacute obyvatel v danyacutech okresech (Tabulka č 13) Zaacutevěry V dobrovolnickeacute skupině jsme nezjistili vyacuteznamně vyššiacute vyacuteskyt pozitivniacutech osob v některeacute z věkovyacutech skupin ani v Piacutesku ani ve Strakoniciacutech
Tabulka č 13 ndash Počet vyšetřenyacutech dobrovolniacuteků a vyacuteskyt protilaacutetek v různyacutech věkovyacutech skupinaacutech ve Strakoniciacutech a v Piacutesku
Strakonice celkem
Strakonice pozitivniacute
Piacutesek celkem
Piacutesek pozitivniacute
5 ndash 9 let 17 0 15 0
10 ndash 19 let 40 1 35 0
20 ndash 29 let 62 2 49 0
30 ndash 39 let 77 2 59 3
40 ndash 49 let 89 1 98 1
50 ndash 59 let 76 0 91 1
60 ndash 69 let 80 1 74 2
70 ndash 79 let 53 3 59 1
80+ let 24 1 20 0
Celkem 518 11 500 8
ČAacuteST 5 - Porovnaacuteniacute jihočeskeacute a celorepublikoveacute studie PREVAL bdquoSrovnaacutevaciacute průřezovaacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo byla plaacutenovaacutena v půlce dubna 2020 tedy dřiacuteve než byla ukončena celorepublikovaacute studie PREVAL Chtěli jsme zmapovat situaci ve dvou okresech Jihočeskeacuteho kraje a přidat dalšiacute pokud možno co nejpřesnějšiacute data do diskuze o problematice koronaviroveacute epidemie Ačkoli nebylo našiacutem ciacutelem jakkoli celorepublikovou studii zpochybnit nebo s niacute ldquosoutěžitrdquo od začaacutetku jsme s jejiacutemi zaacutevěry porovnaacuteni Z tohoto důvodu je nezbytneacute uveacutest proč je srovnaacuteniacute obou studiiacute nesnadneacute a proč je složiteacute zobecňovat data z obou studiiacute na celou populaci Z vyacuteše uvedenyacutech vyacutesledků je zřejmeacute že naacutemi vykazovanyacute procentuaacutelniacute počet osob s protilaacutetkami proti koronaviru je vyššiacute než ten kteryacute je uvedenyacute v celorepublikoveacute studii Preval
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
15
Předně je důležiteacute zmiacutenit že všechny studie jako je ta naše i ta celorepublikovaacute se musiacute vypořaacutedat se třemi probleacutemy pokud majiacute byacutet jejich zaacutevěry aplikovatelneacute na obecnou populaci 1) Ziacuteskaacuteniacute naacutehodneacuteho vzorku populace - naacutehodnyacute vyacuteběr znamenaacute že lideacute jsou naacutehodně vybraacuteni a
osloveni např na zaacutekladě volebniacutech seznamů V tomto smyslu byly obě studie naše zatiacuteženeacute tiacutem
že zkoumaly dobrovolniacuteky - tedy lidi kteřiacute byli motivovaniacute přijiacutet třeba proto že se prodělali vaacutežnějšiacute
respiračniacute onemocněniacute I když se ani v našiacute ani v celorepublikoveacute studii neprokaacutezala korelace mezi
klinickyacutem přiacuteznaky a pozitivitou protilaacutetek přesto neumiacuteme určit jakeacute je ldquodobrovolnickeacute zkresleniacuterdquo
oproti naacutehodneacutemu vyacuteběru
2) Korelovanost zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin - pokud testujeme tyacutemy lidiacute (např hasiče
z jedneacute jednotky) majiacute tyto osoby obdobneacute riziko expozice infekci (jeden je nemocnyacute postupně
onemocniacute dalšiacute kolegoveacute na pracovišti) I když ani toto se ve studii neprokaacutezalo je nutneacute s tiacutem
počiacutetat
3) Vyacutesledky každeacute studie zaacutevisejiacute na kvalitě testů resp jejich senzitivitě a specificitě ktereacute
k testovaacuteniacute použijeme Tyto parametry určujiacute i počet falešně negativniacutech a falešně pozitivniacutech
vyacutesledků
Obraacutezek č 2 - Studie PREVAL ndash Epidemiologickyacute gradient v geografickyacutech jednotkaacutech prevalenčniacute studie
Situace v testovanyacutech oblastech
Jihočeskaacute studie probiacutehala v okresech ktereacute měly minimaacutelniacute vyacuteskyt PCR pozitivniacutech naacutelezů
V Piacutesku bylo 12 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel ve Strakoniciacutech bylo 466 zaacutechytů na 100 tisiacutec
obyvatel Data jsou vztažena k 164
Celorepublikovaacute studie PREVAL probiacutehala převaacutežně v okresech s vyššiacutem vyacuteskytem PCR
pozitivniacutech naacutelezů ndash v Brně a Jihomoravskeacutem kraji bylo 36 resp 38 zaacutechytů na 100 tisiacutec obyvatel
(Obraacutezek č 2) Data jsou vztažena k 164
Porovnaacuteniacute vyacutesledků jihočeskeacute studie s celorepublikovou studiiacute PREVAL Teorie statistiky umožňuje vypočiacutest interval ve ktereacutem by se vyacutesledek pro celou populaci okresu s velkou pravděpodobnostiacute nachaacutezel (obvykle se uvažuje 95 ) ale vzhledem k tomu že ani jedna studie nemaacute naacutehodnyacute vyacuteběr je opravdu těžkeacute odhadovat ldquomiacuteru dobrovolnickeacuteho zkresleniacuterdquo Je však možneacute neurčovat interval ale jen horniacute hranici kterou celopopulačniacute proporce (resp proporce okresu) s velkou jistotou (opět 95 ) nepřekročiacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
16
Pokud tento vyacutepočet udělaacuteme pro okres Piacutesek pak můžeme řici že kdybychom přeměřili všechny lidi v okrese Piacutesek mělo by pozitivniacute IgG protilaacutetky asi 16 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 25 (Obraacutezek č 3) Ve Strakoniciacutech by mělo IgG protilaacutetky 23 z nich a dost jistě by to nebylo viacutece než 34 (Obraacutezek č 3) Tyto odhady vychaacutezely jen ze vzorku dobrovolniacuteků čiacutemž předchaacuteziacuteme probleacutemu korelovanosti zdravotniacuteho stavu u profesniacutech skupin Ten totiž znemožňuje spraacutevneacute stanoveniacute podobnyacutech intervalů Obraacutezek č 3 ndash Odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek v Piacutesku a Strakoniciacutech včetně horniacute hranice vyacuteskytu
Na obraacutezku č2 Epidemiologickyacute gradientrdquo je vidět že promořenost populace v okrese Piacutesek je minimaacutelniacute (12 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) oproti okresům ve kteryacutech probiacutehala celorepublikovaacute studie Nabiacuteziacute se tedy spiacuteše srovnaacuteniacute vyacutesledků z okresu Strakonice (466 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) s Brnem (36 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) nebo Jihomoravskyacutem krajem (38 PCR pozitivniacutech osob na 100 tisiacutec obyvatel) Interval promořenosti uvaacuteděnyacute ve studii Preval byl 0 ndash 029 (Obraacutezek č 4) Zaacutevěry Jihočeskaacute data ukazujiacute že skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci je sice niacutezkyacute ale pohybuje se v řaacutedu procent Jihočeskeacute vyacutesledky jsou řaacutedově vyššiacute než vyacutesledky celorepublikoveacute studie Preval Obraacutezek č 4 ndash Předběžneacute odhady vyacuteskytu pozitivity protilaacutetek ve studii Preval
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
17
Porovnaacuteniacute použityacutech metodik v jihočeskeacute a celorepublikoveacute studii Preval Každaacute ze studiiacute byla provedena jinyacutem typem testu V našiacute studii bylo proveden odběr venoacutezniacute krve a protilaacutetky IgA a IgG byly stanoveny metodou ELISA firmy EUROIMMUN V celorepublikoveacute studii byl použit odběr kapilaacuterniacute krve (kromě Olomouce kde byla odebiacuteraacutena krev venoacutezniacute) Ke stanoveniacute protilaacutetek byl použit rychlotest WANTAI Stanovoval se celkovyacute imunoglobulin Podle designu republikoveacute studie PREVAL je ještě plaacutenovaacuteno v Olomouci proveacutest stanoveniacute protilaacutetek ze žilniacute krve takeacute pomociacute ELISA metody což podle autorů studie umožniacute ldquolaboratorniacute validaci vyacutesledků rapid-testů a přesnějšiacute odhad jeho senzitivity a specificity důležityacute pro odhad skutečneacute prevalencerdquo Bohužel ale dosud nejsou vyacutesledky tohoto testovaacuteniacute k dispozici Nebylo sděleno ani jakyacutem kitem budou protilaacutetky stanoveny My jsme takeacute provedli verifikaci (porovnaacuteniacute) metod ale v opačneacutem pořadiacute Pozitivniacute vzorky z testu ELISA jsme otestovali pomociacute rychlotestů několika vyacuterobců Vyacutesledky teacuteto verifikace byly velmi špatneacute Verifikace rychlotestů provedenaacute v Piacutesku (Tabulka č 14)
20 vzorků (13 s pozitivniacutem IgG a 7 s hraničniacutem IgG) bylo otestovaacuteno pomociacute rychlotestu Innovita Ani jeden test neměl validniacute kontrolniacute zoacutenu tedy test nebyl hodnotitelnyacute Šlo o nekvalitniacute soupravu
Pět vzorků s pozitivniacutem IgG bylo otestovaacuteno třemi rychlotesty jinyacutech vyacuterobců ndash All Test Nadal Rapid a Deep Blue Pouze v jednom testu bylo zjištěno pozitivniacute IgG (15 vzorků na All Test) Všechny ostatniacute vzorky vyšly negativniacute na testech Nadal a Deep Blue
Tabulka č 14 - Piacutesek ndash Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ALL TEST DEEP BLUE INNOVITA
383 13 neg neg neg nelze hodnotit
838 14 neg poz neg nelze hodnotit
318 14 neg neg neg nelze hodnotit
494 16 neg neg neg nelze hodnotit
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
18
229 18 neg neg neg nelze hodnotit
Verifikace rychlotestů provedenaacute ve Strakoniciacutech (Tabulka č 15)
Bylo otestovaacuteno 24 seacuter s pozitivniacutem IgG z ELISA testu
U 224 vzorků vyšly pozitivniacute IgG v testu Nadal
U 124 vzorků vyšlo pozitivniacute IgG v testech Acro Rapid a Safecare Tabulka č 15 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s pozitivniacutem IgG v ELISA testu
EUROIMMUN NADAL ACRO RAPID SAFECARE
S0116367 13 neg neg neg
S0116443 29 neg neg neg
S0116505 11 neg neg neg
S0116528 45 neg neg neg
S0116564 15 neg neg neg
S0116639 12 neg neg neg
S0116672 17 neg neg neg
S0116759 11 neg neg neg
S0116832 24 neg neg neg
S0116843 19 neg neg neg
S0116994 11 neg neg neg
S0116995 23 neg neg neg
S0117001 18 neg neg neg
S0117008 20 neg neg neg
S0117073 44 poz neg neg
S0117098 23 neg neg neg
S0117193 12 neg neg neg
S0117253 109 poz poz poz
S0117255 26 neg neg neg
S0117349 21 neg neg neg
S0117354 16 neg neg neg
S0117423 14 neg neg neg
S0117482 17 neg neg neg
S0117514 22 neg neg neg
Pozitivita IgG protilaacutetek byla prokaacutezaacutena pouze tehdy pokud byla použita seacutera pacientů s COVID-19 (PCR pozitivniacutech osob) viz Tabulka č 16 U těchto osob již vyacutesledky rapid testů vyšly většinou pozitivniacute ale je to daacuteno vysokou koncentraciacute protilaacutetek (viz vyššiacute OD ratio v testu ELISA) Tabulka č 16 - Strakonice - Porovnaacuteniacute ELISA a rychlotestů - použity vzorky s COVID-19 pacientů
Euroimmun Nadal Rapid Acro rapid Safecare
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
19
S0116269 16 neg neg neg
S0116180 29 poz poz poz
S0116179 39 slabě poz slabě poz poz
S0116178 42 poz slabě poz poz
S0116191 89 poz poz poz
S0117751 109 poz poz poz
Za zmiacutenku stojiacute i verifikace z partnerskyacutech laboratořiacute ve kteryacutech byly porovnaacuteny pozitivniacute vzorky z ELISA EUROIMMUN s rychlotesty Innovita ndash pouze tři ze sedmi vzorků byly pozitivniacute Porovnaacuteniacute bylo provedeno s laboratorniacutemi metodami systeacutemem Abbott a Elecsys COBAS Roche ktereacute stanovujiacute množstviacute protilaacutetek Shodnyacute vyacutesledek s ELISA metodou byl dosažen u 6 ze 7 vzorků v přiacutepadě Abbotu a 5 ze 6 vzorků v systeacutemu Roche (Tabulka č 17) Zaacutevěry Z našich verifikačniacutech studiiacute vyplyacutevaacute že na trhu je k dispozici celaacute řada rychlotestů ktereacute nejsou vhodneacute pro testovaacuteniacute osob neboť jejich citlivost je velmi niacutezkaacute Naopak laboratorniacute metody jako je třeba ELISA EUROIMMUN umožňujiacute stanovovat protilaacutetky v seacuterech osob Rozdiacutel mezi našiacute studiiacute a studiiacute celorepublikovou je způsoben zřejmě použityacutem testem ale to bude možneacute zjistit až po zveřejněniacute vyacutesledků verifikaciacute provaacuteděnyacutech v laboratoři v Olomouci Tabulka č 17 ndash Porovnaacuteniacute ELISA Euroimmun s rychlotestem INNOVITA a systeacutemy Abbott a Elecsys COBAS ROCHE
IgG EUROIMMUN (gt11)
IgG INNOVITA
(rychlotest)
IgG Alinity Abbott
(IPge14)
Total Ig Elecsys COBAS
ROCHE (COIgt10)
4981 161 poz 358 7480
3182 202 neg 122 008
4980 212 neg 205 1170
4839 256 neg 159 1695
5054 322 neg 246 1141
4924 489 poz 440 3814
3981 524 poz 750 Neprov
Zaacutevěry bdquoSrovnaacutevaciacute průřezoveacute studie seacuteroprevalence protilaacutetek proti SARS-CoV-2 v okresech Piacutesek a Strakoniceldquo
Protilaacutetky proti SARS-CoV-2 byly vyšetřeny u 2011 osob z okresů Piacutesek a Strakonice
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
20
Skutečnyacute vyacuteskyt protilaacutetek v populaci se pohybuje v řaacutedu procent (16 v Piacutesku a 23 ve Strakoniciacutech) a je řaacutedově vyššiacute než bylo zjištěno v celorepublikoveacute studii Preval
Doporučujeme dokončit druhou čaacutest republikoveacute studie tedy stanovit protilaacutetky v seacuterech olomouckyacutech dobrovolniacuteků metodou ELISA kteraacute by měla validovat vyacutesledky rychlotestů
Doporučujeme proveacutest novou celorepublikovou studii stanoveniacute protilaacutetek metodou ELISA s nižšiacutem počtem probandů ale s čistě naacutehodnyacutem vyacuteběrem
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute
21
Seznam citaciacute 1 httpswwwczsoczcsuczsopocet-obyvatel-v-obcich-k-112019 2 Xu G Yang Y Du Y et al Clinical pathway for early diagnosis of COVID-19 Updates from
experience to evidence-based practice Clin Rev Allergy Immunol 2020 Apr 24 1ndash12 doi 101007s12016-020-08792-8
3 Bloch EM Shoham S Casadevall A et al Deployment of convalescent plasma for the prevention and treatment of COVID-19 J Clin Invest 2020 Apr 7 138745 doi 101172JCI138745
4 Theel ES Slev P Wheeler S et al The role of antibody testing for SARSCoV-2 Is there one J Clin Microbiol 2020 Apr 29 JCM00797-20 doi 101128JCM00797-20
5 Kraacutetkaacute Z Luxovaacute Š Maliacutečkovaacute K et al Testovaacuteniacute COVID-19 ndash co bychom měli miacutet na paměti Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 72-77
6 Grifoni A Weiskopf D Ramirez SI et al Targets of T cell responses to SARS-CoV-2 coronavirus in humans with COVID-19 disease and unexposed individuals Cell 2020 June 25 1-13
7 Střiacutežovaacute Z Milota T Bartůňkovaacute J Aktuaacutelniacute problematika COVID-18 z pohledu imunologa Časopis leacutekařů českyacutech 2020 2 67-71
vaacute 3 4Tomaacuteš Fuumlrst 3 5Halina Šimkovaacute