Prediktivní a prognostická Prediktivní a prognostická patologiepatologie

Část II Část II

Prediktivní a prognostická patologiePrediktivní a prognostická patologie

Úloha v diagnostice a léčběÚloha v diagnostice a léčbě Regulace buněčného cyklu – základní principyRegulace buněčného cyklu – základní principy Metodiky a požadavkyMetodiky a požadavky Interpretace výsledkůInterpretace výsledků Klinické aplikace (část II)Klinické aplikace (část II) Perspektivy (část II)Perspektivy (část II)

Zpřesnění diagnózyZpřesnění diagnózy(viz. folie)(viz. folie)

• Histogeneze malignitHistogeneze malignit

• Fenotypizace nádorů lymfoidní řady (WHO Fenotypizace nádorů lymfoidní řady (WHO klasifikace)klasifikace)

Stanovení prognózy a predikce u maligních Stanovení prognózy a predikce u maligních tumorů tumorů

Karcinom plicKarcinom plic Karcinomy GITKarcinomy GIT Karcinomy mléčné žlázyKarcinomy mléčné žlázy Nádory CNSNádory CNS Genitourinární karcinomyGenitourinární karcinomy Hematologické malignityHematologické malignity OstatníOstatní

Karcinom plicKarcinom plic

SCLC x NSCLC – jiná genetická cesta vývojeSCLC x NSCLC – jiná genetická cesta vývoje Rozsáhlé delece krátkého raménka chromozomu 3 Rozsáhlé delece krátkého raménka chromozomu 3

(90% SCLC, 50% NSCLC)(90% SCLC, 50% NSCLC) Mutace RB, p53Mutace RB, p53 Mutace RAS, MYC Mutace RAS, MYC Delece CDK4IDelece CDK4I

GIT - kolorektální karcinomGIT - kolorektální karcinom

„„model of colorectal tumorigenesis“ (Vogelstein) – vícestupňový model of colorectal tumorigenesis“ (Vogelstein) – vícestupňový procesproces

Alterace MYC, RAS, p53Alterace MYC, RAS, p53 MCC (mutated in colorectal cancer) MCC (mutated in colorectal cancer) DCC (deleted in colorectal cancer)DCC (deleted in colorectal cancer) APC mutace (adenomatous polyposis)APC mutace (adenomatous polyposis) Defekty opravných mechanizmů (chybné párování) – Defekty opravných mechanizmů (chybné párování) –

microsatellite instability (replication error –RER), protilátka microsatellite instability (replication error –RER), protilátka HMSH1 HMSH1

Genetické změny u familiárních forem kolorektálního karcinomuGenetické změny u familiárních forem kolorektálního karcinomu- APCAPC- HNPCC (hereditary nonpolyposis colon cancer)HNPCC (hereditary nonpolyposis colon cancer)

GIT - kolorektální karcinomGIT - kolorektální karcinom

GIT – karcinom žaludkuGIT – karcinom žaludku

GIT - ostatníGIT - ostatní

MYC, RASMYC, RAS Mutace genů kódujících růstové faktory a jejich Mutace genů kódujících růstové faktory a jejich

receptory (PDGF, EGF, TGF, EGFR,…)receptory (PDGF, EGF, TGF, EGFR,…) p53 (jícen, játra), cyklin D (jícen)p53 (jícen, játra), cyklin D (jícen) Onkogenní viry!! (EBV, HBV)Onkogenní viry!! (EBV, HBV)

Karcinomy mléčné žlázyKarcinomy mléčné žlázy

Mutace RAS, MYCMutace RAS, MYC Mutace p53Mutace p53 Amplifikace HER2/neu (c-erbB-2)Amplifikace HER2/neu (c-erbB-2) Mutace BRCA1,2Mutace BRCA1,2 Stanovení BCL-2Stanovení BCL-2 Stanovení estrogenových a progesteronových receptorůStanovení estrogenových a progesteronových receptorů Stanovení proliferační aktivityStanovení proliferační aktivity

Karcinomy mléčné žlázyKarcinomy mléčné žlázykancerogenezekancerogeneze

Normální žlazkaNormální žlazka HyperplasieHyperplasie Dysplasie (atypická lobulární/duktální hyperplasie)Dysplasie (atypická lobulární/duktální hyperplasie) AdenomAdenom KarcinomKarcinom

- lobulární x duktálnílobulární x duktální

- sporadický x hereditárnísporadický x hereditární

- low grade – mid grade – high gradelow grade – mid grade – high grade

Karcinomy mléčné žlázyKarcinomy mléčné žlázy p53p53

Sporadické formy ca.mammySporadické formy ca.mammy Prognostický indikátor ?Prognostický indikátor ? Indikátor odpovědi na terapiiIndikátor odpovědi na terapii

Karcinomy mléčné žlázyKarcinomy mléčné žlázyAmplifikace HER2/neu (c-erbB-2)Amplifikace HER2/neu (c-erbB-2)

Detekce pomocí IHS, FISHDetekce pomocí IHS, FISH HercepTestHercepTest Herceptin – součást terapie (chemoterapie, hormonální Herceptin – součást terapie (chemoterapie, hormonální

terapie, terapie pomocí monoklonálních protilátek)terapie, terapie pomocí monoklonálních protilátek)

Karcinomy mléčné žlázyKarcinomy mléčné žlázyAmplifikace HER2/neu (c-erbB-2)Amplifikace HER2/neu (c-erbB-2)

TypTyp ER/PRER/PR HERHER GradeGrade TreatmentTreatment

AA ++ -- Low gradeLow grade HormonalHormonal

BB -- ++ High gradeHigh grade ChemotherapyChemotherapy

HerceptinHerceptin

ABAB ++ ++ VariousVarious HormonalHormonal

HerceptinHerceptin

OO -- -- No predictionNo prediction ChemotherapyChemotherapy

Karcinomy mléčné žlázyKarcinomy mléčné žlázyAmplifikace HER2/neu (c-erbB-2)Amplifikace HER2/neu (c-erbB-2)

Karcinomy mléčné žlázyKarcinomy mléčné žlázyMutace BRCA1,2, stanovení BCL-2Mutace BRCA1,2, stanovení BCL-2

BRCA 1, 2 – „care taker of genome“BRCA 1, 2 – „care taker of genome“ Mutace – role v rozvoji nádorů (presymptomatic Mutace – role v rozvoji nádorů (presymptomatic

testing), prognostický indikátor ? testing), prognostický indikátor ? BCL-2 – anti-apoptotický proteinBCL-2 – anti-apoptotický protein Stanovení BCL-2 – vyšší exprese – lepší prognóza Stanovení BCL-2 – vyšší exprese – lepší prognóza

Karcinomy mléčné žlázyKarcinomy mléčné žlázyStanovení progesteronových a estrogenových Stanovení progesteronových a estrogenových receptorů, stanovení proliferační aktivity – receptorů, stanovení proliferační aktivity –

algoritmus (folie)algoritmus (folie)

Nádory CNSNádory CNS

Reaktivní glióza X low grade astrocytomReaktivní glióza X low grade astrocytom

- P53P53 Low grade astrocytom X sekundární high grade Low grade astrocytom X sekundární high grade

astrocytom (glioblastom) astrocytom (glioblastom)

- Ki 67Ki 67 Primární glioblastom X sekundární glioblastom Primární glioblastom X sekundární glioblastom

- molekulární genetikamolekulární genetika

Nádory CNSNádory CNS

Nádory močového a pohlavní systémuNádory močového a pohlavní systému

Karcinom čípku děložníhoKarcinom čípku děložního

- HPV typizace (ISH) – 16, 18, 31, 33, 35HPV typizace (ISH) – 16, 18, 31, 33, 35 Karcinom močového měchýřeKarcinom močového měchýře

- mutace EGFRmutace EGFR

- mutace p53mutace p53

- DNA ploidieDNA ploidie Karcinom prostatyKarcinom prostaty

- Cyrokeratin basálních membrán - chybí Cyrokeratin basálních membrán - chybí

- ER/PR statusER/PR status

- PSAPSA

- pozn. – in vitro studie na liniích (DU 45, LNCaP, P3)pozn. – in vitro studie na liniích (DU 45, LNCaP, P3)

Genitourinární nádoryGenitourinární nádoryKarcinom prostaty Ck-VKarcinom prostaty Ck-V

Hematologické malignityHematologické malignity

• CD typizace (viz.folie)CD typizace (viz.folie)

• Detekce chromozomálních translokacíDetekce chromozomálních translokací

• Stanovení proteinů buněčného cyklu a apoptózy (BCL-Stanovení proteinů buněčného cyklu a apoptózy (BCL-2: folikulární lymfom x folikulární hyperplasie)2: folikulární lymfom x folikulární hyperplasie)

• Identifikace nových chomozomálních a genových Identifikace nových chomozomálních a genových poruch (FISH, knock-out myši,…)poruch (FISH, knock-out myši,…)

• Testovaní Testovaní in vitroin vitro citlivosti na cytostatika citlivosti na cytostatika

Hematologické malignityHematologické malignityDetekce chromozomálních translokací – BCR/ABL Detekce chromozomálních translokací – BCR/ABL

u CMLu CML

Hematologické malignityHematologické malignityIdentifikace nových chomozomálních a genových Identifikace nových chomozomálních a genových

poruchporuch

16

16

16

16

Hematologické malignityHematologické malignityIdentifikace nových chomozomálních a genových Identifikace nových chomozomálních a genových

poruchporuch

Ostatní aplikaceOstatní aplikace

Léčba pomocí monoklonálních protilátek (folie)Léčba pomocí monoklonálních protilátek (folie) Nádory dětského věkuNádory dětského věku- Wilmsův tumor (gen WT1)Wilmsův tumor (gen WT1)- Ewingův sarkomEwingův sarkom- Neuroblastom (cytogenetika)Neuroblastom (cytogenetika)- Leukemie (cytogenetika)Leukemie (cytogenetika) Familární nádory Familární nádory - NF1, NF2 (NF1,2 geny)NF1, NF2 (NF1,2 geny)- MEN 1, 2 (cytogenetika – chromozom 10, 11)MEN 1, 2 (cytogenetika – chromozom 10, 11)

Ostatní aplikaceOstatní aplikacecytogenetický profil dětského pacietnta s EWS – cytogenetický profil dětského pacietnta s EWS –

familární formafamilární forma

Ostatní aplikaceOstatní aplikace

Detekce virůDetekce virů Detekce infekčních agensDetekce infekčních agens Soudní lékařstvíSoudní lékařství ……

ProblémyProblémy

MetodickéMetodické- vhodný modelvhodný model- dostupnost materiáludostupnost materiálu InterpretaceInterpretace- existence regulačních „sítí“existence regulačních „sítí“- komplementární diagnostika nebo metoda volby?komplementární diagnostika nebo metoda volby? EtickéEtické- „„vlastnictví“ genetického materiáluvlastnictví“ genetického materiálu- právní validita a dopad informace resp. výsledků právní validita a dopad informace resp. výsledků

molekulárně biologických/patologických vyšetření molekulárně biologických/patologických vyšetření (prescreening, prenatální diagnostika)(prescreening, prenatální diagnostika)

Prediktivní a prognostická patologiePrediktivní a prognostická patologie

Úloha v diagnostice a léčběÚloha v diagnostice a léčbě Regulace buněčného cyklu – základní principyRegulace buněčného cyklu – základní principy Metodiky a požadavkyMetodiky a požadavky Interpretace výsledkůInterpretace výsledků Klinické aplikace (část II)Klinické aplikace (část II) Perspektivy (část II)Perspektivy (část II)

PerspektivyPerspektivy

Tissue arraysTissue arrays DNA arraysDNA arrays MikrodisekceMikrodisekce

Genová terapieGenová terapie