Priony, prionové nemoci. Histologické a immunohistochemické

vyšetření prionů.

Zpracovala: Eva ParobkováSpoluautorky:I. Gajdičiarová, M.Zajacová,

M. Štecherová

Terminologie

• Priony jsou (infekční) bílkoviny

• Proteinaceous infectious particles

• PrPC jsou normální bílkoviny, které se nacházejí na povrchu řady buněk (hlavně CNS)

• Funkce není nejasná - synaptický přenos?

• buněčná diferenciace?

Patologické priony

• PrPSc - scrapie, PrPres - rezistentní

• PrPSc jsou isoforma PrPC

• Aminokyselinový řetěz obou forem je stejný

• Liší se v trojrozměrné struktuře

• PrPC má převahu alfa helixů (šroubovnice)

• PrPSc má převahu beta sheet (plizování)

Klíčová patogenetická událost

• Strukturální přechod • od

• alfa helixů• na

• beta strukturu

Povaha prionových chorob

• Priony jsou jediné známé patogeny, které nemají nukleové kyseliny – jen bílkoviny

• Prionové choroby jsou

• sporadické

• genetické, tj. podmíněné mutacemi

• infekční (vč. iatrogenních)

Prionové choroby jsou vzácné

• Alzheimerova nemoc 1450/1 milion

• Parkinsonova nemoc 360/ 1 milion

• FTD 14/1 milion

• Huntington 11/1 milion

• ALS 7/1 milion

• Pickova nemoc 2/1 milion

• Prionové nemoci 1-2/1 milion

Lidské prionové nemoci

• Gerstmannův-Sträusslerův-Scheinkerův syndrom (GSS)

• Fatální familiální insomnie (FFI)• Sporadická fatální insomnie (FSI)• Kuru• Creutzfeldtova-Jakobova nemoc (CJD)

• sporadická• iatrogenní• familiální• nová varianta

KURU

• Laughing disease/death

• Papua-Nová Guinea

• Fore People

• 50tá léta 20. století

• D. C. Gajdusek

Creutzfeldtova-Jakobova nemoc (CJD)

• Vzácné neurodegenerativní onemocnění

• 4 formy:

– Sporadická: všude na světě 1-2/1milion

– Iatrogenní: přenos lékařským výkonem

– Familiální: mutace v genu

– Nová varianta: lidská obdoba „nemoci šílených krav“

Definitivní diagnóza CJD

• Histologický nález

• Imunohistochemický nález

• Western blot

• Genetické vyšetření

Histologické vyšetření

• Spongiformní změny

• Úbytek neuronů

• Astrocytóza

• PrP plaky– floridní plaky u vCJD

Imunohistochemické vyšetření

• Průkaz patologického proteinu PrPSC

metodou nepřímé imunohistochemie v parafinovém řezu po aplikaci proteolytického enzymu (Proteináza K) nebo po působení proteolytického činidla (guanidin thiokyanát).

Proteináza K, Guanidin thiokyanát

Imunohistochemické vyšetření

• Monoklonální protilátky– klon 3F4 (Dako)– klon 12F10 (Cayman Research)– klon 6H4 (Prionics)

Nová varianta CJD (vCJD)

• Přibližně 176 zemřelých na celém světě (téměř všichni ve Spojeném království), Francie, Itálie, USA, Kanada, Irsko, Holandsko, Španělsko, Saudská Arábie, Japonsko,

• Zřejmě vzniká v souvislosti s požíváním masa z krav, které onemocněly BSE

• Inkubace je 10 a více let• Onemocnění je u mladších jedinců• Klinicky i histologicky se liší od sCJD

Vlastní zkušenosti2001 - 2007

• 80 klinických podezření

• 49 případů CJN

43 sporadických

6 familiálních

Klinicko-patologická korelace CJN NRL 1.7.2001-1.7.2006

Klinická diagnóza 80

Definitivní diagnóza 47

Klinicky falešně positivní diagnóza 28

Klinicky falešně negativní diagnóza 3

Případy ve vyšetřování 2

Děkuji Vám za pozornost•