MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACE …ukb.lf1.cuni.cz/ppt/bioge_15vscht_diag_tisk.pdf · Zonulin...

VŠCHT seminář - Praha, listopad 2015

LABORATORNÍ METODY A TESTYV GASTROENTEROLOGII

MUDr.Petr Kocna CSc.http://www.lf1.cuni.cz/~kocna/pkweb1.htm

2

LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII Kocna P.

MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACEFUNKČNÍ DIAGNOSTIKA, STOLICE, DECHOVÉ TESTY

HELICOBACTER PYLORI - ŽALUDEKPANKREATICKÁ INSUFICIENCE

CELIAKIE - GLUTENOVÁ ENTEROPATIELAKTÓZOVÁ INTOLERANCE

TLUSTÉ STŘEVO - KOLOREKTÁLNÍ KARCINOM

3


DIAGNOSTICKÝ PROCES

METODYLABORATORNÍ ZOBRAZOVACÍ

METODY

MORFOLOGIE

FUNKČNÍ ODEZVA

REÁLNÝ STAV

01020304050607080

0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 2000

1020304050607080

0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200

4


FUNKČNÍ ODEZVA

VÝCHOZÍ STAV

STIMULACE

ČASOVĚ ZÁVISLÁ ODPOVĚĎ

5







6

MALABSORBCE

LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA MALABSORBCE

7


MALABSORPCESTAV, KDY JEDNA, NEBO VÍCE ZÁKLADNÍCH ŽIVIN NENÍ TRÁVENA A VSTŘEBÁVÁNA, NEBO NEDOSTATEČNĚ

MALABSORPČNÍ SYNDROM (MS) ZAHRNUJE:PORUCHU INTRALUMINÁLNÍHO TRÁVENÍ, DIGESCEPORUCHU VSTŘEBÁVÁNÍ ŽIVIN, ABSORPCEABNORMÁLNÍ SEKRECE TRÁVICÍCH ŠŤAVZÁVAŽNÉ NARUŠENÍ MOTILITY TRÁVICÍ TRUBICENEDOSTATEČNÝ PŘÍJEM POTRAVY

PRIMÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROMPORUCHA NA ÚROVNI ENTEROCYTUCÉLIAKIE, TROPICKÁ SPRUE, WHIPPLOVA CH.....

SEKUNDÁRNÍ MALABSORPČNÍ SYNDROMONEMOCNĚNÍ PANKREATU, ŽLUČNÍKU, JATEROBSTRUKČNÍ CHOROBY STŘEVA, INFEKCE....

MALABSORPCE, MALDIGESCE, MALASIMILACE

8

CROSBYKAPSLE


ŽALUDEČNÍ SONDATYP LEVIN

ŽALUDEČNÍ, DUODENÁLNÍ, STŘEVNÍ SONDA

9


RTG KONTROLA ZAVEDENÍ SONDY

10


KLKY MIKROKLKYENTEROCYTY

DUODENUM - JEJUNUM - ILEUM, DÉLKA 3 - 4 METRYPOVRCH 5 x ZVĚTŠUJÍ KLKY (0,5 - 1 mm, 20 - 40 klků / mm2)

MIKROKLKY - KARTÁČOVÝ LEM - ZVĚTŠUJE POVRCH 30x 100 m2

TENKÉ STŘEVO - FUNKCE ENTEROCYTU

11






ANALÝZA STOLICE UMOŽŇUJE DIAGNOSTICKÝ PROCES ONEMOCNĚNÍ ZAŽÍVACÍHO ÚSTROJÍ, JATER A PANKREATU. UJASNĚNÍ PŘÍČÍN VEDOUCÍCH K SYMPTOMŮM OVLIVŇUJÍCÍ ZAŽÍVACÍ TRAKT VČETNĚ PRŮJMU, NAUSEY, ZVRACENÍ, EDÉMU, BOLESTÍ, KŘEČÍ, HOREČKY, ZTRÁTY CHUTI APOD.

DETEKCE NĚKTERÝCH ENZYMŮ VE STOLICI K URČENÍ MÍRY PANKREATICKÉ FUNKCE.

DETEKCE OKULTNÍHO KRVÁCENÍ PRO SCREENING KOLOREKTÁLNÍCH TUMORŮ

DETEKCE PŘÍTOMNOSTI PARASITŮ, NAPŘ. LAMBLIE

DETEKCE A IDENTIFIKACE NĚKTERÝCH TYPŮ BAKTERIÍ

DETEKCE NENATRÁVENÝCH ZBYTKŮ POTRAVY PŘI MALABSORPČNÍM SYNDROMU

VYŠETŘENÍ STOLICE

12


13

NATIVNÍ PREPARÁTZBYTKY POTRAVYVLÁKNA CELULÓZY

BARVENÍ FRIEDIGER’S REAGENS- SVALOVÁ VLÁKNA ČERVENĚ- TUKOVÉ KAPÉNKY ŽLUTĚ- ŠKROBOVÁ ZRNKA TMAVOMODŘE

SVALOVÁ VLÁKNA

ŠKROBOVÁ ZRNKA

TUKOVÉ KAPÉNKY


Gastroenterologie für die PraxisMünchen, 1975

MIKROSKOPICKÉ VYŠETŘENÍ STOLICE

14

BIOCHEMICKÁ VYŠETŘENÍ VZORKU STOLICE

Helicobacter pylori Ag

Elastáza - 1

Chymotrypsin

Hemoglobin

Lactoferin

Anti Gliadin scIgA

Lipázaβ-Defensin 2

Lysozyme

Albumin

Amyláza

Myeloperoxidáza

PCR / DNA

Calprotectin

PMN Elastáza


EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin

Anti tTG IgA

α1-antitrypsin

Zonulin

Haptoglobin

Transferin

15


VYŠETŘENÍ STOLICE - ODBĚR VZORKU

16


CALPROTECIN VE STOLICI - RAPID TESTY

CerTest - CALPROTECTIN + LACTOFERRIN

CalDetectCalProCalFast

17


KOMBINOVANÉ RAPID-TESTY NA STOLICI

Hemoglobin

Calprotectin

Lactoferin

E-coli toxin

Transferin

18


ODBĚROVÝ SYSTÉM PRO NĚKOLIK TESTŮ

IDK ExtractSingle Tube Analytics

5EDN Eosi.Deriv.Neurotoxin7β-Defensin 25Lysozyme9Albumin9α1-antitrypsin7s-IgA3anti-transglutaminase7anti-Gliadin7Haptoglobin5Hemoglobin7Pancreatic elastase9Lactoferrin9Calprotectin

Stabilita 2-8 CAnalyt

19

Kroma iT Linear

AUTOMATICKÉ ANALYZÁTORY NA STOLICI

NS-Plus Alfresa Pharma


NS-Prime Alfresa Pharma

20

SBĚR STOLICE - 72 hod.

REFERENČNÍ METODAEXOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU

S-CCK TEST

FAT 72 hod.


KVANTITATIVNÍ ANALÝZA TUKŮ VE STOLICI

21

JEDNODUCHÁ OBSLUHABATERIOVÝ TYP

REAL-TIME KINETICKÝ SWROZSAH MĚŘENÍ 0 - 500 ppm

CITLIVOST 1 ppm

LAKTÓZOVÁ INTOLERANCEMALABSORPCE LAKTÓZY

MALABSORPCE SACHARÓZYMALABSORPCE FRUKTÓZYBAKTERIÁLNÍ PŘERŮSTÁNÍ

MOTILITA GIT, TRANSIT TIME

PARAMETRY

APLIKACE

Kód VZP: 15140 249 bodů

klinický kód, GE, odb. 105


H2 MICRO - ANALYZÁTOR

22

APLIKACE H2 - DECHOVÝCH TESTŮ


0

10

20

30

40

50

10 40 70 100 130 160 190 220 250 2800

10

20

30

40

50

10 40 70 100 130 160 190 220 250 280

H2-ppm

cut-off

TEST S LAKTULÓZOUOCTT

OROCAECAL TRANSIT TIME

TEST S FRUKTÓZOUFRUKTÓZOVÁ INTOLERANCE

TEST S LAKTULÓZOUBAKTERIÁLNÍ

PŘERŮSTÁNÍ TS

23


-10-505

101520

-15 0 15 30 45 60 75 90 105 120 135 150 165 180-10

-505

101520

-15 0 15 30 45 60 75 90 105 120 135 150 165 180

KONCENTRACE H2 (ppm) PO PODÁNÍ 25g LAKTÓZYH2 - DECHOVÝ TEST LAKTÓZOVÉ INTOLERANCE

H2 (ppm)

ČAS (min)

Hodnocení dechových testů po podání různých monosacharidů a disacharidůBc. Jana Bartoňová, Praha 2004

http://portal.lf1.cuni.cz/formular/upload/internet/soubor_269.pdf 24


ANAEROBNÍ HYDROLÝZA A PRODUKCE

VODÍKU A METANU STŘEVNÍ MIKROFLÓROU

Pimentel M.,Gunsalus RP.,Rao SSC.,Zhang H.: Methanogens in Human Health and Disease. Am J Gastroenterol Suppl (2012) 1:28–33

H2 /CH4 BAKTERIÁLNÍ PRODUKCE

25


M. Di Stefano, G.R. CorazzaRole of hydrogen and methane breath testing in gastrointestinal diseases

Digestive and Liver Disease Supplements 2009/3, 40–43

Satish S.C. Rao - Ability of the Normal Human Small Intestine to Absorb Fructose: Evaluation by Breath Testing

Clinical Gastroenterology and Hepatology 2007/5, 959-963

KOMBINACE STANOVENÍ VODÍKU a METANU

ELIMINACE FAL.NEGATIVITYMODULÁRNÍ KONCEPCESENZORY: H2 /CH4 /CO2

- VLIV ANTIBIOTIK- NÍZKÁ PRODUKCE VODÍKU

H2 /CH4 /CO2 - LACTOTEST 202

26


KALIBRACE TŘÍ SENSORŮHYDROGEN

METANOXID UHLIČITÝ

REKALKULACEKONCENTRACE H2

PODLE CO2

H2 /CH4 /CO2 - LACTOTEST 202

27

ANALYZÁTORY DECHOVÝCH TESTŮ 13C/12C


FLIP, Humedics

IR force 600, Richen

HeliFAN, Fischer - FAN

BreathID, Exalenz

28


Zkušenosti laboratořeÚKBLD 1.LF UK a VFN

2001 - 2012IR analytické systémy

Isomax 4000HeliFAN plus


29

Standardem PDB je primární referenční materiál pro měření přirozených změn obsahu izotopu uhlíku 13C, stanoveného v uhličitanu vápenatém ze schránek křídových belemnitů rodu Belemnitella americana z geologické formace Pee Dee v Jižní Karolíně (USA)

PDB Pee Dee Belemnitae

Mezinárodní standard 13C = 1.11237 %

13C DECHOVÉ TESTY - PDB STANDARD


30

13C DECHOVÉ TESTY - PDB STANDARD

PDB - Pee Dee Belemnitella americana

1,050

1,060

1,070

1,080

1,090

1,100

1,110

1,120

- 50

- 40

- 30

- 20

- 10

0

+ 10

PeeDee Belemnite

Fosilní zdroje

Uhličitany

C3 rostliny

C4 rostlinyAtmosférický CO2

Jap. - Dech CO2EU - Dech CO2

US - Dech CO2

13C abundances of nutrients and the effect of variations in 13C isotopic abundances of test meals formulated for 13CO2 breath tests.

Schoeller DA. et al.: Am J Clin Nutr. 1980; 33(11): 2375 - 2385

% 13C ‰ δ 13CPDB

31


VÝSKYT IZOTOPU 13C V PŘÍRODĚ

13C - mixed triglycerid

NABÍDKA SUBSTRÁTŮ PRO DECHOVÉ TESTY

32

13C - laktóza


13C - glukóza

13C - bikarbonát

13C - oktanoát

13C - triolein

13C - fenylalanin

13C - kofein

13C - aminopyrin

13C - glykocholát

13C - xylóza 13C - škrob

13C - galaktóza

13C - palmitát

13C - urea13C - methacetin13C - acetát

PRINCIP 13C- MTG DECHOVÉHO TESTU

33

13C-substrát

perorální podání

enzymatickáhydrolytickáfunkce GIT

13C

absorpce

13C

eliminace

stanovenípoměru 13C/12C

kumulativní výdej CO2

cPDR

13CO2

produkce CO2


13C-enriched lactose, derived from milk of cows fed with silo corn (d= -10.885) for 5 weeks.Because it is known that it takes 14 days for cows milk to be in equilibrium with a diet,

milk of seven cows was collected during the last 3 weeks of this 5-week period and pooled.Lactose was obtained by crystallization techniques.


PŘIROZENÉ SUBSTRÁTY 13C PRO DECHOVÉ TESTY

C4 rostliny 13C-laktóza

kukuřice

13C-škrob

mléko

34

krystalizacelaktózy

35

HeliView - IRMS ANALYZÁTORDECHOVÝCH TESTŮNA BÁZI UHLÍKU 13C


analytika, odb. 801, IRMS


36

AUTOSAMPLER

VACUTAINER

NAFION

SEPARACEGC

REF.INJEKTOR

REFERENČNÍCO2

MS

VENTIL

INJEKTOR

HeHeSEPARACE VODY


ANALYZÁTOR 13CO2 - IRMS DETEKCE

37

VÝSTUPZ GC

IONIZACE PLYNU

MAGNETICKÉPOLE

SEPARACE PODLE

HMOTNOSTI

TRIPLEFARADAY

COLLECTOR

DETEKCE44 - 12C16O245 - 13C16O246 - 12C16O18O

I R M S ISOTOPE - RATIO

MASS SPECTROMETRY


ANALYZÁTOR 13CO2 - IRMS DETEKCE

ABSORBČNÍ MAXIMA ISOTOPŮ: 4348,5 nm - 4348,2 nm

13C16O22299.795 cm-1

12C16O22299.642 cm-1

13C16O18O

38


ANALYZÁTOR 13CO2 - NDIRS DETEKCE

39

ZDROJ IRλ = 2 - 8 μm

12CO2

13CO2

VZOREK

REF.PLYN


NonDispersive Isotope-selective

InfraRed Spectroscopy


40


OptoAkustický detektorLehrer & Luft typ

Lehrer E and Luft K F 1938German Patent No 730478

An analytical model of the pneumatic non dispersive infrared detectorDaniel P Lucero: Journal of Physics E: Scientific Instruments, 1973; 6: 281 - 286

- absorpce IR- změna tlaku- deformace membrány- akustický signál


ANALÝZA VYDECHOVANÉHO VZDUCHU

41


NÁDECH VÝDECH

CO2 = 0,04 %

CO2 = 5,20 %

CO2 ÷ 2,5 - 3,5 %

NÁDECH - VÝDECH (BEZ ZADRŽENÍ DECHU) NÍZKÁ KONC.CO2

NÁDECH - ZADRŽENÍ DECHU - KRÁTKÝ VÝDECH NÍZKÁ KONC.CO2

NÁDECH - ZADRŽENÍ DECHU NA 10 sec - DLOUHÝ VÝDECH KONC.CO2 JE OK

42






43

PRŮKAZ INFEKCE HELICOBACTER PYLORI

PRŮKAZEM BAKTERIE/ANTIGENU Hp NIKOLIV DETEKCE PROTILÁTEK K Hp


44


NH2-13CO-NH2 + H2O = 2 NH3 + 13CO2

Hp - UREÁZA

SUBSTRÁT: 13C-MOČOVINADÁVKA: 50 - 100 mgDOBA TESTU: 30 minut

RYCHLÝUREÁZOVÝ

TEST

DECHOVÝTEST

lokální test - biopsie

globální test - žaludku

DECHOVÝ TEST s 13C - MOČOVINOU (UREOU)

45

CLO TEST (RUT) s MOČOVINOU (UREOU)

Rychlý ureázový testzměna pH = změna zbarvení

výsledek během hodiny


46


DECHOVÝ TEST s 13C - MOČOVINOU (UREOU)


klinická část, GE, odb. 105

Pylobactell a InfaiUBT - Hp soupravy

jsou registrovány v ČR - SUKL

47


Five minute endoscopic urea breath test with 25 mg of (13)C-ureain the management of Helicobacter pylori infection.

Isomoto H et al.: Eur J Gastroenterol Hepatol. 2002 Oct;14(10):1093-1100

25 mg 13C-ureaaplikace spray sondou

5 minutový test

ENDOSKOPICKÝ DECHOVÝ TEST - 13C EUBT

48


FILTR

INKUBAČNÍNÁDOBKA

mAb - TEST MEMBRÁNA

ODBĚROVÁNÁDOBKA

PRŮKAZ HELICOBACTER PYLORI

HpStAR TEST - DAKORAPID TEST

MONOKLONÁLNÍ PROTILÁTKA

Kód VZP: 91483 odb. 813, 761 bodů

HELICOBACTER PYLORI - DAKO TEST HpStAR

helicoCare negativníHp StAR negativní

helicoCare pozitivníHp StAR negativní

helicoCare pozitivníHp StAR pozitivní

49


Jeřábek, J.: Stanovení antigenu Helicobacter pylori ve stolici rapid testem.Diplomová práce 1.LF UK Praha 2007

POROVNÁNÍ Hp RAPID TESTŮ

HCl

50

HELICOBACTER PYLORI INFEKCE

HCl

GASTRIN ↑ GASTRIN ↑

ATROFIEKARCINOM

DUODENÁLNÍVŘED

BEZONEMOCNĚNÍ

KMENY BAKTERIE - GENETICKÁ DISPOZICE - VNĚJŠÍ PROSTŘEDÍ - DIETA


H.Pylori + hostitel

51


negativní Hp,normální PGI/PGII

normální G-17b

PODEZŘENÍ NA GASTRITÍDU, HP INFEKCI, CA ŽALUDKU

pozitivní Hp,normální PGI/PGII

normální G-17b

Hp +/-,nízké PGI/PGIIzvýšené G-17b

pozitivní Hp,nízké PGI/PGII

nízké G-17b

Normálnížaludečnísliznice

Rizko žaludečníhonebo duodenálního

vředu

Rizko karcinomužaludku

detekce HpPGI/PGII, G-17b

Hp gastritída Atrofická gastritída

Eradikace Hp infekce + gastroskopie 52






53

SEKRETIN

CCK-PZ

TVORBA ŽLUČE

PANKREATICKÁŠŤÁVA

HCO3-, VODAENZYMY

SPECIFICKÁ STIMULACE HORMONYSEKRETINCHOLECYSTOKININ, = PANKREOZYMIN

0.7 l/den

2.0 l/den


REGULACE PANKREATICKÉ SEKRECE

54

ERCPPAPILA MINOR

D.WIRSUNGID.SANTORINI

ERCP KLASIFIKACEPANKREATITID


CHRONICKÁ PANKREATITÍDAZOBRAZOVACÍ METODY

ERCPŠŇŮRA PEREL

55


Quantitative MRCP assessment of pancreatic exocrine reserve and itscorrelation with faecal elastase-1 in patients with chronic pancreatitis

Manfredi R. el al. Radiol med. - DOI 10.1007/s11547-011-0774-6

MRCP VÝPOČET OBJEMU SEKRECE

FUNKČNÍ TEST PANKREATICKÉ FUNKCE

ŽÁDNÁ STIMULACE

ELASTÁZAVE STOLICI

NEPŘÍMÁSTIMULACE STIMULAČNÍ

POKRM SUBSTRÁT

SEKREČNÍ KAPACITAGRADING CHP

DIGESTIVNÍ FUNKCETRÁVENÍ (TUKŮ)

56


250mg13C-MTG

KUKUŘIČNÝCHLÉB

20g RAMA

PANKREATICKÁLIPÁZA

SUBSTITUČNÍTERAPIE

PERORÁLNÍ PODÁNÍ

SUBSTITUČNÍLIPÁZA

ANALÝZA13C-MARKERU

TESTY EXOKRINNÍ FUNKCE PANKRAETU

57


VOLBA SUBSTRÁTU

13C - DECHOVÉ TESTY FUNKCE PANKREATU

13C - TRIOLEIN13C - HIOLEIN13C - MIXED

TRIGLYCERIDE13C - CHOLESTERYL

OCTANOATE13C - TRIPALMITIN13C - TRIOCTANOIN13C - STARCH13C - BzTyrAla

STEATORHEA > 11 - 14 g/denINTRALUMINÁLNÍ LIPOLÝZASPECIFICITA K PANKREATICKÉ LIPÁZE

VÝDEJ LIPÁZY < 90 kU/hodPANKREAT. CHOLESTEROL ESTERÁZA

STEATORHEA > 11 g/denMALABSORPCE TUKŮTKÁŇOVÉ POŠKOZENÍ, FIBRÓZA > 30%SEKRECE AMYLÁZY < 10%KORELACE s PABA testem

58


CH2 - O - C - (CH2)16 - CH3

O

CH - O - 13C - (CH2)6 - CH3

O

CH2 - O - C - (CH2)16 - CH3

O

PANKREATICKÁ LIPÁZA

1,3 DI - STEAROYL

2 - (13C) - OCTANOYL

JATERNÍ β - OXIDACE

13CO2 V DECHU

METABOLICKÉ PROCESY 13C-MTG

0,0

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

60,0

70,0

80,0

-50 50 150 250 350 450 550 650 750 850 9500,0

10,0

20,0

30,0

40,0

50,0

60,0

70,0

80,0

-50 50 150 250 350 450 550 650 750 850 95059

CUT-OFF FELA: 200 μg/g

FELA μg/g

CUT-OFF MTG: 30 %

PATOLOGICKÝ

100 μg/gcPDR MTG (%)

NORMÁLNÍ

13C-MTG - DECHOVÝ TEST & FELA VE STOLICI

226 DECHOVÝCH TESTŮ 13C-MTG155 CHP - 71 KONTROL (NON-CHP)

SHODA MTG & FELA - 80.2 % (181/226)


CHP-ACHP-BCHP-CCHP-DNON-CHP

60






CO JE CÉLIAKIE ?

CELOŽIVOTNÍ ONEMOCNĚNÍ, PERMANENTNÍ STŘEVNÍINTOLERANCE LEPKU OBILOVIN

GENETICKÝM FAKTOREM JE HLA-B8, HLA-DR3 a HLADQ2

SPOUŠTĚCÍM FAKTOREM JSOU GLIADINOVÉ PEPTIDY

IMUNOLOGICKÁ ODPOVĚĎ, AUTOIMUNITNÍ CHARAKTERONEMOCNĚNÍ

POŠKOZENÍ SLIZNICE TENKÉHO STŘEVA

PROJEVY MALABSORPČNÍHO SYNDROMU

ODPOVĚĎ NA BEZLEPKOVOU DIETU

61


62


tTG

DEAMIDACE

ŽALUDEČNÍ, PANKREATICKÉPEPTIDÁZY, PROLYL-ENDOPEPTIDÁZY

CD4+ T-BUŇKA

TH1-BUŇKATH2-BUŇKA

B-BUŇKA

TKÁŇOVÁTRANSGLUTAMINÁZA

M.BUNĚK

ZÁNĚTLIVÁ ODPOVĚĎ

MESENCHYMÁLNÍBUŇKY

CÉLIAKIEATROFIE KLKŮ

CÉLIAKIEHYPERPLASIE KRYPTPROTILÁTKY

IL2, γIFN, TNFIL 4,5,10

GLIADIN

33-mer PEPTID PŠENICE

podle: Mowat AT, Lancet 2003, 361: 1290

19-mer PEPTID

Zonulin

63

Definitivní diagnóza celiakie

Bezlepková dieta

HLA typizace,opakovat biopsii

Biopsie TS,histologie

C. Briani et al. / Autoimmunity Reviews 2008; 7, 644 – 650

negativní protilátkynormální IgA

pozitivníprotilátky

deficit IgA

pozitivní protilátky

histologický obraz celiakie

klinická a histologická normalizace

vysoké klinicképodezření

negativníhistologie

Předběžná diagnóza celiakie

Vysoká pravděpodobnostceliakie

Nízká pravděpodobnostceliakie

IgG atTG , IgG EmAnebo IgG AGA

IgA atTG / IgA EmAa celkové IgA

ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI PODEZŘENÍ NA CS


64

Definitivní diagnóza celiakie

Střevní biopsie

negativní HLA pozitivní HLA

anti TG2> 3x normy

Vyloučit IgA deficienciNízký příjem glutenu

Není riziko CS

HLA DQ2 and/or DQ8

negativní protilátky

anti TG2< 3x normy

Marsh2 or 3

EmA negativní

Marsh 0 or 1

Normální dietaFalešně pozitivní test

Potenciální CS

Tranzientně falešná pozit.anti TG2

Normální dietaDalší serologické testy

IgA EmA

EmA pozitivní

IgA atTG2 & total IgA

ALGORITMUS LAB.METODIK PŘI ZVÝŠENÉM GENETICKÉM RIZIKU

European Society for Pediatric Gastroenterology,Hepatology, and Nutrition Guidelines for the Diagnosis ofCoeliac Disease. Husby S. at al. JPGN 2012; 54: 136–160


65

BIOPSIE TENKÉHO STŘEVA - KLASIFIKACE

Clinical practice - Coeliac disease. Kneepkens C. M., von Blomberg B. M.Eur J Pediatr. 2012; 171(7) : 1011 - 1021

Marsh 0 Marsh 1 Marsh 2 Marsh 3a Marsh 3b Marsh 3c


66Old and new serological tests for celiac disease screening.

Volta U., Fabbri A., Parisi C. et al. Expert Rev. Gastroenterol. Hepatol. 2010, 4(1)

SOUČASNÝ PROTOKOLSTANOVENÍ PROTILÁTEK

(EVIDENCE - BASED)

PERSPEKTIVNÍ PROTOKOLSTANOVENÍ PROTILÁTEK(PRACOVNÍ HYPOTÉZA)

IgA atTG IgA atTG

+ IgA EmA

+ IgG atTG

+ IgA AGA

+ IgG DGP

ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA atTG

ZVÝŠENÍ SPECIFICITY IgA atTGDETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU

DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET

DETEKCE CELIAKIE PŘI IgA DEFICITU

DETEKCE CELIAKIE PRO DĚTI DO 2 LET

+ IgA


67

EmA IF - opičí jícenAGA-16, AGG-1, atTG-1.5

pacient D.K. 10/2004

EmA IF - opičí jícenAGA-238, AGG-220, atTG-233

CSF, pacient M.P. 02/2002

EmA IF - opičí jícenpozitivní kontrola

ANTIENDOMYSIÁLNÍ PROTILÁTKY - EmA


68

anti-tTG, anti-DGP, EmAKombinace tří základních protilátek pro screening a diagnostiku celiakie imunofluorescenční technologií

AKLIDES® - CytoBead CeliAK


69

α-gliadin

ω γ β α

ŠKROBOVÁ - GELOVÁ ELEKTROFORÉZA

(SGE)SEPARACE JEDNOTLIVÝCH

PROTEINŮ - GLIADINŮKLASIFIKACE GLIADINŮ

NA ČTYŘI SKUPINY

α − β − γ − ω

GLIADINY - SEPARACE PROTEINŮ


70

SCREENING CELIAKIE - POCT TESTY


anti-tTG (IgA & IgG)

anti-DGP (IgA &IgG) + celkové IgA

RYCHLÉ, RAPID TESTYZ PLNÉ KRVE

POCT ANALÝZA

anti-tTG (IgA, IgG, IgM)

anti-tTG (IgA) + celkové IgA

71

SCREENING CELIAKIE - POCT TESTY

Fingertip rapid point-of-care test in adult case-finding in coeliac disease. Popp A., Jinga M., Jurcut C.,

Balaban V., Bardas C., Laurila K., Vasilescu F., Ene A., Anca I., Mäki M. BMC Gastroenterology 2013, 13:115

Diagnostic accuracy of a new point-of-care screening assay for celiac disease, Benkebil F., Combescure C.,

Anghel SI., Duvanel CB., Schäppi MG.World J Gastroenterol 2013; 19(31): 5111-5117

Evaluation of a DGP point-of-care test for celiac disease in a pediatric population. Marti CO., Fellay B.,

Bürgin-Wolff A., Magnin JL., Baehler P.International Journal of Celiac Disease, 2015, 3/1


72






73


β-D-galactose

OCH2OH

HH

OH

H

OH

OH

H H OH

OCH2OH

HH

H

OH

OH

H

HO

OCH2OH

HH

OH

H

OH

OH

H H OH

OCH2OH

HH

H

OH

OH

H

HO1 4

α-D-glucose

LAKTÁZA

DISACHARID - LAKTÓZA JE HYDROLYZOVÁN

STŘEVNÍ DISACHARIDÁZOU

AKTIVITA ENZYMUV KARTÁČOVÉM LEMU

ENTEROCYTU

STŘEVNÍ DISACHARIDÁZA - LAKTÁZA

74


HISTOCHEMICKÝ PRŮKAZ AKTIVITY LAKTÁZY V KARTÁČOVÉM LEMU ENTEROCYTUIMUNOHISTOCHEMICKÁ DETEKCE

MODERNÍ RAPID TESTDETEKCE AKTIVITY LAKTÁZYCHROMOGENNÍ METODOU

DIAGNOSTIKA LAKTÁZOVÉ INTOLERANCE

75






01020304050607080

1960 1970 1980 1990 2000 20100

1020304050607080

1960 1970 1980 1990 2000 2010

76

INCIDENCE

MORTALITA

na 100.000


Epidemiologie nádorů České republikyhttp://www.svod.cz/

INCIDENCE A MORTALITAKOLOREKTÁLNÍHO KARCINOMU V ČR

77

Proteomics of colorectal cancer: overview of discovery studies and identification ofcommonly identified cancer-associated proteins and candidate CRC serum markers.

Jimenez CR, Knol JC, Meijer GA, Fijneman RJ. - J Proteomics. 2010;73:1873-1895

5 leté přežití (%)

normální adenom progresivní lokalizovaný KRCA lymfatické KRCA jaternísliznice adenom KRCA metastázy metastázy

10 - 15 let

KRCA stádium: Dukes I-II Dukes III Dukes IV


78


TESTY OKULNÍHO KRVÁCENÍ VE STOLICI - FOBT/TOKS

2005

Schweiz Med Wochenschr. 1976 Feb 28;106(9):297The hemoccult test in the screening for colonic carcinomaDeyhle P, Nüesch HJ, Kobler E, Jenny S, Säuberli H.

J Med Screen. 2002;9(3):99-103. Basic variables at differentpositivity thresholds of a quantitative immunochemical test for faecal occult blood. Castiglione G, Grazzini G, MiccinesiG, Rubeca T, Sani C, Turco P, Zappa M.

g-FOBT - 1.generace

i-FOBT - 2.generace

1975

1990

qi-FOBT - 3.generace

0

20

40

60

80

100

g-FOBT i-FOBT qi-FOBT0

20

40

60

80

100

g-FOBT i-FOBT qi-FOBT

79


SENZITIVITA TESTŮ - FOBT/TOKS

Ferkl M., Kocna P. et al. ČLČ 1992; Benešová A., Frič P. et al. ČLČ 1993Dvorak M., Kocna P. et al. Z.- Facharzt, 2003; Kohout P., Granatova J. et al. GUT 2009

Haemoccult

ImmoCare, HemeSelect, Hemolex, Actim FB, Hexagon OBTI

OC Sensor 100 ng/ml

senzitivita specificita28,7% 56,8% 83,4%

80


Levi Z.,Rozen P.,Hazazi R.,Vilkin A.,Waked A.,Maoz E.,Birkenfeld S.,Leshno M.,Niv Y.Ann Intern Med. 2007;146:244-255

A Quantitative Immunochemical Fecal Occult Blood Test for Colorectal Neoplasia

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

NORMAL ADENOM ADV.ADENOM CANCER0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

NORMAL ADENOM ADV.ADENOM CANCER

ng Hb/ml iFOBT - OC Micro - Eikencut-off 75 ng/ml

315 - 654 ng/mlmean 485 ng/ml



697 - 1477 ng/mlmean 1087 ng/ml

81


HLINÍKOVÝ UZÁVĚRPRO PERFORACI

NÁSTŘIKOVOU JEHLOU

SEPTUM DEFINUJÍCÍMNOŽSTVÍ STOLICE

FILTRAČNÍVLOŽKA

KARTÁČEKPRO ODBĚR STOLICE

IDENTIFIKAČNÍČÁROVÝ KÓD VZORKU

ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ

82


ODBĚROVÝ SYSTÉM - OC SENSOR μ

PERFORACEHLINÍKOVÉ FÓLIE

TRANSFER EXTRAKTUPŘES FILTR DO

VZORKOVACÍ JAMKY

NÁSTŘIK 25 μlPRO ANALÝZU

VLOŽENÍVZORKU STOLICE

ELIMINACENADBYTKU STOLICE

TRANSFER 10 mg

83

HM-Jack Kyowa

Kroma iT Linear

OC-DIANA Eiken

i-FOBT LABORATORNÍ & POCT ANALYZÁTORY

Senti FIT Sentinel

NS-Plus Alfresa Pharma

SmartPlus Eurolyser

i-Chroma Boditech

QuikRead Orion

SENTi-FIT Sentinel


84

KVANTITATIVNÍ ANALÝZA Hb VE STOLICI - VFN

Kocna P., Májek O., Blaha M., Zima T., Dušek L.: Characteristics of Colorectal Cancer Detected by Quantitative Faecal Haemoglobin

Test in Hospital Opportunistic Screening.Clin Chem Lab Med 2014; 52, Special Suppl, pp S416

Kvantitativní stanovení Hb ve stolicianalyzátorem Eiken OC-Sensor-microVšeobecná fakultní nemocnice Praha

15 000 analýz za 5let (2008 - 2013)Data-mining analytický nástroj I-COP

umožnil zkompletovat několik databázíOpenLIMS, laboratorní data, FIT, Hb ve

stolici s výstupemNárodního onkologického registru

prosinec 2013


85

810 ng/ml(180-1646)

969 ng/ml(346-1855)

LOKALIZACE TUMORU - HODNOTY FIT TESTU

Hodnoty Hb ng/ml sevýznamně neliší

podle lokalizace tumoru

Metodu FIT OC-Sensor lze spolehlivě použítpro screening KRCA v kterékoliv lokalizaci tumoru


627 ng/ml(309-1422)

1322 ng/ml(695-1580)

86

810 ng/ml(180-1646) 969 ng/ml

(346-1855)

LOKALIZACE TUMORU - FALEŠNÁ NEGATIVITA

627 ng/ml(309-1422)

1322 ng/ml(695-1580)


3/16 5/29

1/81/11

18.7%

12.5%9.1%

17.2%

Falešná negativita je 15,62%

Senzitivita pro KRCA je 84,38%

Kelley L, Swan N, Hughes DJ. - Colorectal Dis. 2013 Sep; 15(9): e512-21An analysis of the duplicate testing strategy of an Irish immunochemical FOBT

colorectal cancer screening programme

Při jednom testu a cut-off (75 ng/ml)je procento nezachycených karcinomů 17.6%

http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm

87


Medline on-linenejnovější publikace

Přímý link na MZČRNárodní číselník

http://gelab.zde.cz

http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm

http://gelab.zde.cz

88


ON - LINE ZDROJE NA INTERNETU

http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ginet/index.htm

http://gweb.zde.cz

http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ge_atlas/ge_frames.htm

http://geatlas.zde.cz

http://www1.lf1.cuni.cz/ukb/lectures.htm

Date post:	29-Sep-2018
Category:	Documents
Upload:	vonhan
View:	217 times
Download:	0 times

MALABSORPCE-MALDIGESCE-MALASIMILACE …ukb.lf1.cuni.cz/ppt/bioge_15vscht_diag_tisk.pdf · Zonulin...

Documents